의 분자 메커니즘의 특성<em&gt; 생체에</em&gt; UVR 유도 백내장

Konstantin Galichanin; Nooshin Talebizadeh; Per Söderberg

doi:10.3791/4016

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방법 논문

의 분자 메커니즘의 특성

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DOI:

10.3791/4016

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2012년 11월 28일

Konstantin Galichanin¹^,² , Nooshin Talebizadeh² , Per Söderberg²

¹St. Erik's Eye Hospital, Karolinska Institutet, ²Gullstrand lab, Section for Ophthalmology, Department of Neuroscience, Uppsala University

이 논문에서

요약

백내장은 세계에서 실명의 주요 원인이다. 태양 자외선 방사 (UVR)는 백내장 개발을위한 주요 위험 요소입니다. 지금까지 UVR-B 유발 백내장의 동물 모델은 개발되었습니다. UVR, 정량 RT-PCR 및 immunohistochemistry에 노출 :이 글에서 우리는 백내장 형성에 대한 조사를하는 방법을 설명합니다.

초록

백내장은 세계 ¹ 실명의 주요 원인이다. 세계 보건기구 (WHO)는 빛의 전송을 막는 눈의 수정체의 뿌옇게로 백내장 정의합니다. 백내장은 당뇨병, 흡연, 자외선 방사선 (UVR), 알코올, 이온화 방사선, 스테로이드 및 고혈압과 관련된 여러 요소 질병입니다. UVR은 백내장 일으키는 강력한 ^2-4 실험 및 역학 증거 ^5,6가 있습니다. 우리는 anesthetized ⁷ 비 anesthetized 동물 ^팔 모두에 UVR B 유발 백내장에 대한 동물 모델을 개발했습니다.

백내장에 대한 유일한 치료는 수술이지만이 치료는 모든 액세스 할 수 없습니다. 그것은 10 년 동안 백내장의 발병을 지연 50 % ⁹ 백내장 수술에 대한 필요성을 줄일 수있는 것으로 추산되었습니다. 백내장의 발생을 지연하기 위해, 그것은 백내장 형성의 메커니즘을 이해하고 효과적인 예방 strat를 찾을 필요합니다egies. 백내장 개발을위한 메커니즘 중 apoptosis 인간과 동물 ¹⁰ 백내장의 개시에 중요한 역할을 담당하고 있습니다. 우리의 초점은 최근 백내장 개발 ^{8,11,12을위한} 메커니즘으로 렌즈의 apoptosis있다. 그것은 apoptosis 경로에 UVR의 효과를 더 잘 이해 백내장 방지 할 수있는 새로운 의약품의 발견에 대한 가능성을 제공 할 것으로 예상된다.

이 문서에서는, 우리는 실험적으로 UVR-B에 생체 노출에 의해 유도 할 수있는 방법 백내장 설명합니다. 또한 RT-PCR 및 immunohistochemistry이 도구 UVR-B 유발 백내장의 분자 메커니즘을 연구하기로 제공됩니다.

프로토콜

1. 자외선 방사선에 노출

15 분 노출되기 전에, 90 밀리그램 / kg Ketalar (케타민)와 intraperitoneal 주사로 10 밀리그램 / kg Rompun (xylazine)의 혼합물 여성 Sprague-Dawley 쥐를 마취.
쥐 restrainer에서 동물을 놓고 트렁크 짜 ¹³ 발생하지 않고 쥐의 고정까지 벨트를 조이십시오.
mydriasis를 유도 할 수있는 쥐의 두 눈에 Mydriacyl (tropicamide), 10 MG / ML을 심어.
그 한쪽 눈이 절반이 최대 10 nm의 전체 폭이 300 nm의 ¹⁴ UVR의 좁은 빔에 대해 위치 될 수 있도록 동물을 놓고 검은 색 테이프 contralateral 눈을 보호.
15 300 nm의 분 ^15에서 쥐 일방적으로 하위 임계 복용 한 kJ / m ² UVR-B을 쉽게받을 수 있습니다.

2. 해부

미리 정해진 후 노출 간격 (1, 5, 24 및 120 시간) 후, carbo하여 육주 늙은 쥐 (체중 <200g)를 희생N 개의 이산화 질식과 경추의 전위.