우리는 여기에서 비 침습적 18F-fluorodeoxyglucose와 양전자 방출 단층 촬영을 이용하여 급성 이식 거부 반응을 평가하기 위해 쥐의 신장 이식 모델을 제시한다.
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방법 논문
쥐 신장 이식 후 급성 동종 이식 거부의 비 침습 이미징 사용
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
말기 신장 질환 환자의 수, 신장 이식 수혜자의 수는 지속적으로 증가한다. 급성 세포 동종 이식 거부 (AR)의 에피소드 장기 이식 생존을위한 부정적인 예후 인자이며, 적시에 진단 이식 기능 1 중요합니다. 현재, AR은 확실히 침략 방법으로, 이식 부상 또는 손실이 상당한 위험을 드러낸다, 코어 생검에 의해 진단 할 수 있습니다. 또한, 생검은 AR이 초점 또는 누덕 누덕 기운 경우 위음성 결과를 초래할 수 있습니다 항응고제 약물과이 기술의 제한된 샘플링 사이트를 복용하는 환자에서 가능하지 않습니다. 결과적으로, 이것은 종종 다양한 이식 모델의 사용을 포함하여 동물에서 수행해야하는 새로운 AR 탐지 방법에 대한 지속적인 검색에 상승했다.
60 년대 쥐의 신장 이식 대해 조사를 위해 잘 확립 된 실험 방법이기 때문에AR 2 ATION 및 분석. 또한 작은 동물 양전자 방출 단층 촬영 (PET)은 동종 uninephrectomized 쥐의 신장 이식 모델에서 AR을 평가하고 비 침습, 특정의 새로운 옵션으로 이식 FDG-PET 영상을 제안하는 18 F-fluorodeoxyglucose (FDG)를 사용하여에 우리는 여기에 존재 인간의 상황을 3도 AR과 조기 진단. 또한,이 방법은 이식 거부 4 모니터링을 개선하기 위해 후속 적용 할 수 있습니다.
프로토콜
1. 기증자의 장기 복구
- 정위 현미경, 8-10 주 된 쥐 (기증자와받는 사람의 체중이 일치해야합니다)의 기록 중량을 설정합니다.
- 기증자 쥐 (루이스 브라운 노르웨이 F1, LBN F1)은 산소 / isoflurane을 흡입 (isoflurane을 4 % / 2 L / 분 산소)를 사용하여 마취. 2-2.5 %로 isoflurane을 낮추는 방법으로 마취를 유지합니다.
- 수술 패드에 마취 쥐를 놓습니다. 패드에 접착 테이프를 가진 쥐의 사지를 고정하고 쥐의 눈에 안과 연고 (Bepanthen, 바이엘)을 적용합니다.
- 면도 쥐의 복부를 소독하고 치골에서 간 꼬리 국경 복부 정중선 절개를 수행합니다. 주의 깊게 오른쪽으로 대장으로 이동하여 왼쪽 신장과 혈관을 노출합니다. 왼쪽 신장에 거즈의 얇은 시트를 배치하고 건조를 방지하기 위해 예열 등장 식염수로 적시십시오.
- 조심스럽게 (뒤몽 각도 팁 집게로 지방 조직을 해부 몬트 SS-45 집게 이녹스 의료, 파인 과학 도구, cat.no. 11203-25) 좌측 요관을 포위. 요관과의 직접적인 접촉을 피 대신에, 충분한 주변의 지방 조직으로 동원.
- 뒤몽 각도 팁 집게를 사용하여 신장 동맥에서 좌측 신장 정맥을 분리합니다. 두 선박의 모든 지방과 ....
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결과
조직학
거절의 심각도는 염증의 정도에 의해 반영되는 반면 AR 백혈구 동안, 즉, 주로 T 림프구가 이식으로 모집하고 있습니다. 여기에 묘사주기 - 산성 - 쉬프 (PAS) 염색에 (그림 1), 신장 이식은 AR, 즉 사구 체 신염, tubulitis, endothelialitis 및 이식 침투 (그림 1, ATX POD4) (POD = 수술 일) 상당한 조직 학적 흔적을 보여줍니다 거부의 징후 기본 컨트롤 신장 (그림 1, CTR)에 결석하는 동안, 이식 침투 세포는 포도당의 대량 소비 높은 대사 활성 세포 수 있습니다. 후자는 FDG로 대체되는 경우,이 세포에 축적되며, 측정 및 PET로 정량화 할 수있다.
PET 이미지
알 시리즈의 동적 전신 인수의 대표 PET 영상loge.......
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토론
FDG-PET 영상은 급성 거부 반응의 진단을위한 새로운 옵션입니다. 때문에 비 침습적 특정 성격, FDG-PET 코어 생검에 의한 고전적인 진단에 비해 장점이다. 생검, FDG-PET 분석은 전체 이식의 제한된 샘플 크기는 대조적으로. 또한, 하나의 항 응고 치료에 환자에 적용 할 수 있습니다, 하나는 반복 처리 효율 4를 모니터링하는 예를 들어 PET 조치를 수행 할 수 있습니다. 또한, 우리는 이미 AR, 허혈 재관류 손상 및 급성 칼시 뉴린 억제제의 독성에 의한 즉, 급성 세뇨관 괴사의 두 가지 주요 감별 진단은 FDG-PET 3를 사용하여 AR 구별 할 수있는 것으로 나타났습니다. FDG-PET 영상은 상대적으로 낮은 활동의 금액과 이식 환자 및 / 또는 신기능 장애 환자 중 하나의 영상을 필요로하기 때문에 심각한 합병증의 위험이 증가 이러한 접근 방식을 쉽게 전송할 수 있습니다와 연결되어 있지 않습니다에 매일 임상 일과.
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공개 사항
관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.
감사의 글
이 작품은 독일 Forschungsgemeinschaft (SFB 656, 뮌스터, 독일, 프로젝트 C7 & C6)와 IZKF 뮌스터 (코어 단위 SMAP)에 의해 지원되었다. 저자는 트룩 반 르, 앤 Kanzog, 유트 NEUGEBAUER, Wiebke Gottschlich 및 radiotracers 생산을위한 우수한 기술 지원과 다니엘 BURKERT와 스벤 Fatum에 대한 로마 Priebe에 감사합니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 장비 | |||
| Mathieu 지침 홀더 - 14 cm | Fine Science Tools | 12010-14 | |
| Castroviejo 미세 지침 홀더 - 9 cm | Fine Science Tools | 12061-01 | |
| 수술용 가위 - Sharp_Blunt | Fine Science Tools | 14001-12 | |
| Iris 가위 - ToughCut 직선형 11.5 cm | Fine Science Tools | 14058-11 | |
| Student Vannas 스프링 가위 | Fine Science Tools | 91500-09 | |
| Vannas 스프링 가위 - 3 mm 날 | Fine Science Tools | 15000-00 | |
| Student 조직 포셉 - 1x2 치아 12 cm | Fine Science Tools | 91121-12 | |
| Dumont SS-45 포셉 - Inox Medical | Fine Science Tools | 11203-25 | |
| 잠금 장치가 있는 Micro-Serrefine 클립 어플리케이터 | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm | Fine Science Tools | 18055-03 | |
| Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm | Fine Science Tools | 18055-04 | |
| 시약 | |||
| Isoflurane (예: Forene 100% v/v) | Abott | ||
| 피부 소독제 (예: Octeniderm) | Schülke | ||
| 포비돈 요오드 (예: Betaisodona) | Mundipharma | ||
| 안연고 (예: Bepanthen) | Bayer | ||
| Buprenorphin (예: Temgesic) | RB Pharmaceuticals | ||
| HTK 관류액 (예: CUSTODIOL HTK) | Dr. Franz Köhler Chemie | ||
| 수술용 봉합사 Mersilene 0 | Ethicon | EH6665E | |
| 수술용 봉합사 Mersilene 4-0 | Ethicon | EH6732H | |
| 수술용 봉합사 Prolene 6-0 | Ethicon | 8697H | |
| 수술용 봉합사 Ethilon 9-0 | Ethicon | 2809G | |
| 수술용 실크 5-0 | Vömel | 14739 | |
| 캐뉼라 (예: Microlance 3, 27G ¾) | BD | 302200 |
참고문헌
- Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
- Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194
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재인쇄 및 허가
