쥐의 만성 영양 주입의 모델

요약

쥐의 혈당과 Intralipid 만성 주입을위한 프로토콜이 설명되어 있습니다. 이 모델은 기관의 기능과 생리 학적 매개 변수에 대한 영양 과잉의 영향을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

초록

영양소의 과도한 수준에 만성 노출은 여러 장기와 조직의 기능에 영향을 미치는 비만과 관련된 여러 합병증의 개발과 제 2 형 당뇨병 등의 대사 증후군에 기여할 것으로 가정합니다. 포도당과 지방산의 과도한 수준은 췌장 베타 세포와 인슐린의 분비에 영향을 미치는하는 메커니즘을 연구하기 위해, 우리는 쥐의 만성 영양 주입 모델을 설립했다. 7 일 회복 기간을 허용; 회전과 케이지에서 자유롭게 이동하는 동물의 수 평형 시스템을 사용하여 펌프에 카테터를 연결하고 주입 절차는 전신 마취하에 우측 경정맥 정맥과 왼쪽 경동맥을 catheterizing으로 구성 포도당 및 / 또는 Intralipid (헤파린 주입하면 약 80 % unsaturated/20 % 포화 지방산의 혼합물을 생성하는 콩 오일 에멀젼) 72 시간 동안. 이 모델은 여러 가지 ADVANTA을 제공합니다약물 화합물을 공동으로 주입 할 수있는 옵션, 그리고식이 모델에 반대 비교적 짧은 시간 프레임 정밀 포도당과 지방산 순환의 목표 수준을 조절 할 수있는 가능성 등 GES. 그것은 장기의 다양한 영양소에 의한 장애의 메커니즘을 검토하고, 이러한 맥락에서 약물의 효과를 테스트하는 데 사용할 수 있습니다.

서론

순환 포도당과 지질의 만성 높은 수준을 포함​​ 포도당 항상성의 유지에 연루 여러 장기의 기능을 변경하여 제 2 형 당뇨병의 병인에 기여하는 제안 국한되지 않은, 췌장 베타 세포 (리뷰 ^1). 만성 고혈당증 따라서 악순환을 만들고 제 2 형 당뇨병 환자에서 혈당 조절의 악화에 기여 첫 번째 장소에서 혈당 상승을 준 베타 세포 결함을 악화하는 glucotoxicity 가설 posits. 마찬가지로, glucolipotoxicity 가설은 주로 제 2 형 당뇨병에서 관찰 포도당과 지질 수준을 수반 상승은, 베타 세포에 해로운 것을 제안한다.

췌장 베타 세포 기능에 만성적으로 높은 영양소의 해로운 효과의 세포 및 분자 메커니즘을 해독하는 u​​nderstandi의 열쇠입니다제 2 형 당뇨병 ^1의 병인의 NG. 이를 위해 많은 연구가 랑게르한스의 고립 된 섬이나 클론, 인슐린 분비 세포 라인에 체외에서 만성 영양 과잉 전직 생체의 메커니즘을 조사했다. 배양 세포 나 섬에서 사용되는 지방산의 농도는 거의 생체 ^2의 베타 세포의 주변에 순환 수준을 일치하지 않기 때문에, 전체 유기체 이러한 모델 시스템에서 얻은 결과의 번역은 특히 복잡합니다. ....

프로토콜

개요, 7 일 회복 기간을 허용, 회전 및 케이지에서 자유롭게 이동하는 동물의 수 평형 시스템을 사용하여 펌프에 카테터를 연결하는 절차는 전신 마취하에 우측 경정맥 정맥과 왼쪽 경동맥을 catheterizing으로 구성 72 시간 동안 (헤파린 ⁹ 주입 할 때 포화 지방산 약 80 % unsaturated/20 %의 혼합물을 생성하는 콩 오일 에멀젼) 포도당 및 / 또는 Intralipid을 주입.

1. 오른쪽 경정맥 정맥과 좌측 경동맥의 Canulation

1. 수술기구를 소독. Canulation 튜브는 절차 이전에 액체 살균 에이전트 (2.6 % 글루 타르 알데히드)를 사용하여 콜드 소독해야합니다. 16-24 시간 동안 멸균 용기에 튜브를 담가. 린스 사용하기 전에 글루 타르 알데히드의 모든 흔적을 제거하는 멸균 증류수로 충분히 세척하십시오.
2. 계산 쥐 무게약물 복용량 :
   Carprofen 5 ㎎ / ㎏ : 희석 1 / 10 = 본체 무게 (g) × 0.001 ML SC (진통제)
   0.01 ㎎ / ㎏ Glycopyrrolate : 희석 1 / 10 = BW (G) X 0....

결과

수술을 시행 한 42 쥐의 일련의 밖으로 5 쥐가 수술 후 기간 동안 손실 된 1 쥐가 86 %의 성공률을 나타내는 주입하는 동안 끊어졌습니다. 결국 주입 된 37 쥐의 평균 체중은 608이었다 ± 5 수술 전 g 및 588 ± 주입 개시 6 개의 G (평균 ± SE, N = 37, P <0.0001로 t-test를 쌍).에게 72 시간 주입 기간 동안 식염수 (SAL) 및 + Intralipid (GLU + IL) 그림 2A와 2B 쇼 혈액 포도당과 지방산 수준은 각각 포도당 :. 다음과 같은 대표적인 결과는 2 주입 그룹 하였다. 디자인으로, 혈당 수치는 정기적으로 측정하고 그림 3과 같이 포도당 주입 속도 (GIR)의 조정에 따라, 주입에 걸쳐 220-250 MG / DL 주위에 유지됩니다. 설치류는 내인성 인슐린 자체를 증가시켜 포도당 주입을 보상하는 강한 능력을 가지고cretion. 따라서, GIR은 상대적으로 정상 상태로 유지되는 혈당 수준에 대한 주.......

토론

이전 연구의 숫자가 우리의 지식 만성 포도당 주입 (예 : ^10-15) 또는 설치류의 지질 (예 : ^{16, 17)을} 고용하고 있지만 두 연료의 혼합 투여는 생쥐 ^{18보고되었다.} 여기에 제시된 만성 주입 모델은 쥐의 생물학적 기능의 다양한 영양소 과잉에 미치는 영향을 연구하는 여러 가지 이점을 제공합니다. 첫째, 유 전적으로 비만 설치류를 포함하지 않으며, 인간의 일반적인 비만 다원 ^19이기 때문에, 연구 결과는 따라서 일반 인구에 영양 공급 과잉의 영향에 관련이있을 가능성이 더 높습니다. 둘째,이 모델은 자연과 주입 유량을 변경하여 다른 순환 수준에서 다른 영양소의 효과를 (특히 설탕이나 지방)를 테스트 할 수있는 가능성을 제공합니다. 셋째, 행정의 IV의 경로는 NUTR와 함께 화합물이나 약물의 공동 주입 수의 ients ^20. 마지막으로, 실험의 비교적 짧은 기간 (높은 지방 다이어트 유도 모델.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
식염수 0.9%	BD	JB1324
포도당 70%	McKesson
Intralipid 20%	Fresenius Kabi	JB6023
미터화물(글루타르알데히드 2.6%)	Metrex	11-1401
헤파린 나트륨 10,000 USP u/ml	PPC
Carprofen	Metacam
글리코피롤레이트	산도즈
이소플루란	애보트
클로헥시딘 2%
알코올 70%
오드
PE-50	BD	427411
CO-EX T22	인스텍 솔로몬	BCOEX-T22
커넥터 22G	인스텍 솔로몬	SC22/15
스위블 22G	인스텍 솔로몬	375/22PS
Y-커넥터 22G	인스텍 솔로몬
카운터밸런스 및 암	인스텍 솔로몬	CM375BP
23G 무딘 바늘	인스텍 솔로몬	LS23 23G
캐귤레이션 핀	인스텍 솔로몬	SP23/12
테더 (12 인치)	Lomir	RT12D
주입 재킷	Lomir	RJ01, RJ02, RJ03, RJ04
(SM-XL)
테더 부착 피스	Lomir	RS T1
60ml 주사기	BD	309653
1ml 주사기	BD	309602

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