임플란트 - 관련 감염은 중요한 임상 합병증입니다. 이 연구는 임플란트 - 관련 감염을 방지하기 위해 혈소판이 풍부한 혈장 (PRP)를 사용하여 접근 방식을 설명 지속적인 혈소판 농도와 PRP를 준비 프로토콜을 제시하고, PRP의 새로 확인 된 항균 특성 및 항균 특성을 조사에 대한 관련 프로토콜을보고 체외 인치
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
임플란트 - 관련 감염 항생제 저항, 동물과 인간 사이의 항생제 내성 박테리아의 전송과 감염을 치료의 높은 비용을 증가로 인해 점점 더 의료 산업에 더 도전 세계적되고 있습니다.
본 연구에서는, 우리는 혈소판이 풍부한 혈장 (PRP)의 잠재적 인 항균 특성을 바탕으로 임플란트 - 관련 감염을 예방에 효과가있을 수 있습니다 새로운 전략을 공개. 치유를 촉진위한 잘 연구 특성으로 인해, PRP는 (생물 제품) 점점 정형 외과 수술, 치주 및 구강 수술, 악안면 수술, 플라스틱 수술, 스포츠 의학 등 임상 응용에 사용되었습니다
PRP는 임플란트 - 관련 감염을 예방 기존의 항생제 치료에 대한 고급 대안이 될 수 있습니다. PRP의 사용은 기존의 항생제 치료시에 비해 유리할 수있다PRP는 항생제 저항을 유도 할 수 있고 PRP의 항균 및 치료 - 홍보 속성이 감염 예방에 시너지 효과가있을 수 있습니다 적은 가능성이 nce. 그것은 잘 병원균과 인간의 세포가 이식 표면에 경주하는 알려져 있으며, 홍보 치유의 PRP의 속성함으로써 감염 가능성을 줄여 인간의 세포 첨부 파일을 향상 수 있습니다. 또한, PRP는 본질적으로 biocompatible하고, 안전하고 전도 할 수있는 질병의 위험에서 무료입니다.
우리의 연구를 들어, 우리는 일반적으로 정형 외과 감염에서 발견하고 PRP이 박테리아에 대한 체외 항균 속성에 있는지 여부를 검사 몇 가지 임상 박테리아 변종을 선택했습니다. 우리는 같은 혈소판 농도가 모든 샘플에 대해 얻을 수 할 수있는 두 번 원심 분리 방식을 사용하여 PRP를 준비했습니다. 우리는 일관성있는 항균 결과를 달성하고 PRP는 methi 같은 세균에 대한 시험 관내 항균 속성에 강한 것으로 나타났습니다cillin에 민감한와 methicillin - 내성 황색 포도상 구균, 그룹 연쇄상 구균과 Neisseria gonorrhoeae. 따라서, PRP의 사용은 감염을 예방하고 임플란트 - 관련 감염의 비용이 많이 드는 수술 치료의 필요성을 줄일 수있는 가능성이있을 수 있습니다.
서론
임플란트 - 관련 감염은 상당한 임상 합병증입니다. 포도상 구균 (S. 구균)이 임플란트 - 관련 감염으로부터 격리 가장 흔한 미생물 중 하나입니다. 그것은 임플란트의 표면을 커버하고 항생제 내성 감염 1,2으로 이어질 수있는 biofilm을 생산 할 수 있습니다. 임플란트 - 관련 감염의 치료가 자주 반복 debridements과 장기간 비경 항생제 치료 장기 입원이 필요합니다. 항생제 내성의 경우, 보형물의 제거가 필요할 수 있습니다. 항생제에 대한 박테리아의 증가 저항도 등의 질병 통제 및 예방 (CDC)의 센터에 의해 참조되었습니다 "세계에서 가장 급박 한 건강 문제 중 하나입니다." 시간이, 새로운과 효과적인 항균 요법의 개발없이, 그것은 다중 약물 내성 병원균은 기존의 항생제와 untreatable 될 가능성이 있습니다. 임플란트 - 관련 예방감염 것이 중요하며, 새로운 예방 대리인 또는 접근 방법은 이러한 감염을 예방하기 위해 필요합니다.
혈소판이 풍부한 혈장 (PRP)은 뼈와 뼈 이식 치료 3-5으로 도움을 줄 수 30 성장 요인을 포함 autologous 혈액의 농도이다. 뼈 재생과 부드러운 조직 성숙을 향상시키는 PRP의 응용 프로그램이 점점 때문에 혈소판에 의해....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
1. 준비와 PRP의 활성화
1.1 혈액 무승부
- isoflurane의 흡입 (유도를위한 O 2 2 % 유지 보수 1 %)에서 토끼를 마취.
- 20 ML의 주사기로 2 ML 0.129 M 트라이 - 나트륨 구연산을 (anticoagulent 솔루션)립니다. 트라이 나트륨 구연산 솔루션은 50 ML 증류수 H 2 O에 1.897 g 트라이 - 나트륨 구연산을 용해하고 0.22 μm 살균 필터로 필터링하여 준비가되어 있습니다.
- 70 % 에탄올을 사용하여 토끼 귀를 살균.
- 나비 바늘 (25 G) 주사기에 연결을 통해 토끼 귀 정맥에서 (예를 들면 5 ML) 혈액을 그립니다.
- 부드러운 교반하여 트라이 나트륨 구연산 솔루션으로 피를 섞는다. 혈액 및 트라이 - 나트륨 구연산 솔루션의 볼륨 비율이 9시 1분입니다.
1.2 PRP 준비 (그림 1)
- 50 ML 플라스틱 원심 분리기 튜브에 anticoagulated 혈액을 전송합니다. 10 μl의 나누어지는 해hemocytometry를 사용하여 기준 혈소판 수....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
PRP는 reproducibly 두 번 원심 분리 방식 (그림 1)를 사용하여 준비가되어 있습니다. PRP는 methicillin 내성 S.에 대한 체외 항균 속성에 (CFUs에서 최대 100 배 감소) 강한 제시 찾을 수 있습니다 구균 (MRSA) (그림 3)은, 그는 일반적으로 전세계 병원 14에서 발견됩니다. 마찬가지로, PRP는 methicillin에 민감한 S.에 대한 강력한 항균 특성을 가지고 구균 (MSSA), 그룹 연쇄상 구균과 Neisseria gonorrhoeae.
두 번 원심 분리 방식은 동일한 혈소판 농도 (즉, 2.0 X 10 6 혈소판 / μl)는 있지만 PRP 취득을 허용하지.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
혈소판이 풍부한 혈장은 점점 그 치유 - 홍보 등록 15-17으로 인해 임상 응용에 사용되었습니다. 본 연구에서는 PRP는 감염 예방을위한 새로운 접근 방법으로 제시되었다. PRP는 MRSA, MSSA, 그룹 연쇄상 구균 및 Neisseria gonorrhoeae에 대한 강력한 항균 특성을 가지고 발견되었습니다. 기존의 항생제 치료에 비해 PRP의 주요 장점은, 감염 예방을 위해 포함 : (1) 현재 항생제 치료는 점점 더보고 항생제 저항 14,18-20 등의 도전에 직면하고 있습니다. PRP는 혈소판은 (i) PRP의 혈소판 microbicidal 단백질 등 호중구, 단핵 세포와 병원체 공격 21에 대한 방어에 중요한 역할을 T 세포 등 면역 세포에 대한 chemotactic 속성을 가지고 할 수 있기 때문에 고급 대안, 그리고 (ii) 기존의 항생제에 비해 수 microbicidal 단백질은 내가이 적.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
제작자들은 더 경쟁 금융 이익이 없다는 점 선언합니다.
감사의 글
저자는 Therwa 함자, 존 E. Tidwell, 니나 클로비스, 그리고 실험 지원 및 교정을위한 수잔 스미스 수잔 스미스 감사드립니다. 저자는 자신의 지원과 미생물학, 면역학 및 웨스트 버지니아 대학에서 세포 생물학의 부에있는 생물 안전 실험실의 사용에 대한 세균의 임상 격리하고 존 B. 바넷, 박사 학위를 제공하는 존 토마스, 박사 학위를 감사합니다. 저자 Osteosynthesis 및 외상 관리 재단과 국립 과학 재단 (National Science Foundation) (# 1003907)에서 재정 지원을 인정합니다. 현미경 실험 및 이미지 분석도 메리 Babb 랜돌프 암 센터와 NIH 보조금 P20 RR016440에 의해 부분적으로 지원되는 웨스트 버지니아 대학 이미징 시설에서 수행되었다.
피를 동물 사용은 웨스트 버지니아 대학 기관 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다립니다. 모든 실험은 모든 관련 guidelin을 준수 실행 된어, 규정 및 규제 기관.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 소 트롬빈 | King Pharmaceuticals, Inc | 60793-215-05 | 트롬빈 (소 유래) |
| 염화칼슘 | King Pharmaceuticals, Inc | 60793-215-05 | 10 % 염화칼슘 |
| 에탄올 | 시그마 - 알드리치 | E7023 | |
| 이소 플루란 | Baxter | 1001936060 | |
| Mueller Hinton 육수 | Becton, Dickinson and Company | 275710 | |
| 인산염 완충 식염수 | Sigma-Aldrich | D8662 | |
| 시트르산 삼나트륨 | Sigma-Aldrich | W302600 | |
| 트립틱 대두 한천 | Fisher Scientific | R01202 | |
| 원심분리기 | Kendro 실험실 제품 | 750043077 | |
| 주사기 필터 | Millipore | SLGP033RS |
참고문헌
- Gristina, A. G. Biomaterial-centered infection: microbial adhesion versus tissue integration. Science. 237, 1588-1595 (1987).
- Gristina, A. G., Costerton, J. W. Bacterial adherence to biomaterials and tissue. The significance of its role in....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
