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형광 파우더를 사용하여 소매 환경에서의 미생물 오염을 추적 - 소매 델리 카트슨 환경 예

DOI:

10.3791/51402

March 5th, 2014

In This Article

Summary

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이 연구의 전반적인 목표는 소매 델리 설정에서 인성 병원균 리스테리아의 잠재적 교차 오염의 메커니즘을 설명했다. 이 방법론은 병원균 오염을 추적하기 위해 다른 다양한 환​​경에 적용 할 수있다.

Abstract

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소매 환경에서의 인성 병원균의 교차 오염이 식중독에 대한 위험이 증가에 기여하는 중요한 공중 보건 문제입니다. 이러한 델리 고기, 치즈, 경우에 신선한 농산물로 먹을 준비가 된 (RTE) 가공 식품 등 리스테리아 등 병원균의 오염으로 인한 식품 매개 질병 발생에 관여하고있다. L.에 대하여 모노 사이토는, 델리 슬라이서는 종종 교차 오염의 주요 원천입니다. 이 연구의 목적은 세균 오염을 시뮬레이션과 소매 환경이 오염을 추적하기 위해 형광 화합물을 사용하는 것이 었습니다. 모의 델리 부엌은 소매 환경을 시뮬레이션하기 위해 설계되었습니다. 델리 고기가 형광 화합물로 접종과 자원 봉사자는 식품 소매 직원의 예상과 유사한 일련의 작업을 완료하기 위해 모집했다. 자원 봉사자는 패키지를 슬라이스와 델리 냉장고에 고기를 저장하는 지시했다. 잠재적 인교차 오염은 특정 지역을 보라고하고 분광 광도계 채취 영역의 광학 밀도를 측정하여 모의 소매 환경에서 추적했다. 결과는 슬라이서의 냉장고 (즉, 델리 경우) 그립과 다양한 영역이 교차 ​​오염에 대한 높은 위험이 있다고 지적했다. 본 연구의 결과는 소매 직원 집중된 교육 자료를 개발하기 위하여 사용될 수있다. 또한, 유사한 방법 또한 식량 생산 환경 (예를 들어, 작은 농장), 병원, 요양원, 유람선 및 호텔에서 미생물 오염을 추적하는 데 사용할 수 있습니다.

Introduction

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특히 소매 부분의 음식 준비 환경에서 인성 병원균의 교차 오염으로 인해 고기뿐만 아니라 야채 1-5 다양한 소스에서 식중독의 위험이 증가의 주요 관심사입니다. 대부분의 경우, 세균성 병원체에 오염 된 식품 (6)를 통해 소매 유통 환경을 입력합니다. 이전의 소비 7에 더 개입이나 치료 (즉, 조리 또는 가열)이 보통이 없기 때문에 소매 수준에서 준비를 먹을 준비가 된 음식은 특별한 관심의이다. 또한, 오염 RTE 식품에 존재하는 병원체는 소매 환경에서 다른 식품 또는 식품 접촉 표면에 전사 할 수있다.

교차 오염은 소매 음식 환경의 거의 모든 유형에서 발생할 수 있지만, 샌드위치 가게는 특히 때문에 병원균 리스테리아 monocytog와 RTE 델리 고기의 협회의 특정 관심의ENES 2. 미국 식품의 약국 (FDA) 및 농업 식품 안전 및 검사 서비스 (USDA-FSIS)의 미국학과에서 실시한 위험 평가 분석을 바탕으로, 오염 된 델리 고기는 리스테리아 증의 경우 90 %에 대한 가능성이 책임이 있습니다 - 희귀 L.에 의한 아직 심각한 인간의 질병 리스테리아 모노 사이토 겐 - 미국 8.<....

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Protocol

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1. 표준 곡선

  1. 37.5 mg의 형광 분말을 달아 6 ML 200 증거 에탄올에 용해. 200 증거 에탄올이 솔루션의 2 배 연속 희석을합니다.
  2. 소용돌이 모두 10 초 샘플 및 370 nm에서의 흡광도를 측정한다.
  3. 1 ㎖ 200 증거 에탄올 당 형광 분말의 양을 계산합니다.
  4. 형광 분말의 농도에 기초하여 흡광도를 보여주기 위해 (x-축에서 370 ㎚에서의 Y 축과 흡광도 ㎎ / ml의 농도에서) 표준 곡선을 준비한다.

2. 형광 파우더와 델리 고기 (볼로냐) 접종

  1. 깨끗한 칼을 사용하여 보드를 절단 약 100 mm 두께의 샘플로 델리 고기를 잘라. A, B 및 C라는 3 개의 시료를 준비
  2. 코트 샘플에 약간의 물기를 깨끗한 스폰지를 사용하여 형광 파우더로 균일하게. 균등 고기 샘플의 분말을 확산. 형광 분말 샘플 B와 C를 접종하지 마십시오. 리>
  3. 플라스틱 랩으로 샘플을 감싸고 'A'와 테이프로 B와 C 등 두 개의 샘플을 나머지로 형광 분말 코팅 샘플을 레이블.
  4. 델리 경우 또는 실험이 실시 될 모의 부엌에서 4 ° C에서 개최 냉장고에 샘플을 놓습니다.

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Results

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그림 1은 자원 봉사자가 할당 된 작업을 완료 한 후 채취 된 슬라이서의 영역을 나타냅니다. 자원 봉사자는이 다양한 표면에 손을 접촉의 평균 주파수를 분석하기 위해 비디오 촬영을했다. 손 접촉의 빈도는 네 개의 서로 다른 관찰자에 의해 분석 및 평균 하였다. 이러한 결과는 그림 2에서 설명된다. 데이터는 고기 그립, 델리 고기 래퍼, 델리 고기, 그리고 델리 종이가 손 접촉 (8-14 연락처의 평균)의 최고 속도를했다 있음을 보여줍니다.

이 후, 분석은 자원 봉사자가 작업을 완료 한 후 정량적 슬라이서와 델리 주방의 다양한 구성 요소에 형광 분말의 양을 공부 하였다. 이러한 냉장고 손잡이, 테이블, 고기 그립, 슬라이서 블레이드, 캐리지 트레이의 다양한 구성 요소로 표면을 교환했다. 도 3에 도시 된 바와 같이, 결과는 보여 주었다 오염의 최고 수준냉장고 그립 (약 25 %)에서 발견되.......

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Discussion

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이 연구의 전반적인 목표는 세균의 교차 오염이 식중독의 위험을 관리하고 줄일 수있는 전략을 개발하기 위해 소매 델리 환경에서 발생할 수있는 방법을 설명했다. 소매 델리 환경 L.에 대한 특히 높은 위험을 가지고 오염 모노 사이토 겐. USDA-FSIS는 소매점에서 슬라이스 델리 고기 델리 고기 슬라이스 및 연방 검사 공장 9시 포장 리스테리아와 일곱 배 높은 연관성을 가지고 있다고 보도했다.

형광 기반의 방법은 도체 (13, 14)의 표면에 분변 오염을 검출하기 특허에서보고되었다. 독립적 인 연구는 가금류 가공 공장 15 ~ 17에있는 고기와 교차 오염 소스에 분변 오염의 존재를 확인하기 위해 형광 화합물을 사용했습니다. 다른 연구자들은 여기에보고 된 것과 유사한 연구를 수행 하였다. 그들은 터키의 브리에 형광 화합물을 코팅성 처브 높은 오염 (18)의 영역을 결정하.......

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Disclosures

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관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

Acknowledgements

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저자는이 연구에 도움 식품 안전 실험실 학생들과 자원 봉사자 모두에게 감사의 말씀을 전합니다. 이 연구는 USDA 국가 통합 된 식품 안전 이니셔티브 (NIFSI) 부여 (보너스 번호 10507316)에 의해 투자되었다.

....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Glo Germ PowderGlo Germ Co공급업체에서 구매
에탄올SigmaE7023
영구 마커Sharpie문구점에서 구매
장갑VWR82026-424
Deli MeatNANA Bologna Chub 일반 식료품점에서
도마NANAA 레구카르 부엌 도마
나이프NANAA 레귤러 나이프 
5 cm x 5 cm 멸균 템플릿NANA알루미늄 호일 템플릿은 5 cm x 5 cm 템플릿으로 자르고 살균 
15ml 폴리프로필렌 원심 분리기 튜브VWR89039-664
면봉Puritan25-806
유리 큐벳VWR470019-186
VortexVWR58816-121
플립 카메라플립 울트라 HDNA온라인 구매
델리 슬라이서BizerbaSE-12
델리 냉장고True CompanyTDBD-722
스케일NA
분광 광도계Milton Roy CompanyNASpectronic 20D

References

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  1. Sheen, S., Hwang, C. A. Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing. Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).
  2. Crandall, P., Neal, J. Jr, et al.

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