에서 신경 혈관 리모델링의 분석 Entorhino - 해마 Organotypic 슬라이스 문화

Sophorn Chip; Xinzhou Zhu; Josef P. Kapfhammer

doi:10.3791/52023

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방법 논문

에서 신경 혈관 리모델링의 분석 Entorhino - 해마 Organotypic 슬라이스 문화

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DOI:

10.3791/52023

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2014년 10월 23일

Sophorn Chip¹ , Xinzhou Zhu² , Josef P. Kapfhammer¹

¹Anatomical Institute, Department of Biomedicine Basel, University of Basel, ²Department of Neonatology, University Children's Hospital (UKBB), University of Basel

이 논문에서

요약

허혈성 뇌 손상의 여러 측면을 재생할 수 있습니다 entorhino - 해마의 Organotypic 슬라이스 문화에 대한 프로토콜은 제공됩니다. 신경 세포의 변화에 더하여 neurovasculature의 변화를 연구함으로써,이 프로토콜은 손상 후 신경 조직 플라스틱 변화를 연구하는 다양한 도구입니다.

초록

허혈성 뇌 손상은 적절한 뇌 기능을 저하 가장 일반적이고 치명적인 상태 사이이며 종종 영향 환자에서 기능적 결손을 지속 리드. 집중적 인 연구 노력에도 불구하고, 여전히 신경 세포의 손상을 줄이고 지연 보조 죽음 허혈 영역의 신경 세포를 보호 가능한 효과적인 치료 옵션이 없습니다. 이 분야의 연구는 일반적으로 문제가 정교하고 동물 모델의 사용을 포함한다. 산소와 포도당 결핍 (OGD)에 도전 Entorhino - 해마의 Organotypic 슬라이스 문화는 뇌허혈을 모방 생체 모델에서 설정됩니다. 본 연구의 목적은 신규 한 뇌 혈관의 변화가 비교 상관 될 수있는 변경 및 신경 신경 혈관 구획과 구획 모두 반응 이외에 다룬다는 것이다. 이 프로토콜에서 제시된 방법은 실질적으로의 잠재적 인 응용 범위를 확장하거나ganotypic 슬라이스 문화 접근 방식. OGD 또는 단독 저산소증 유도의 Organotypic 슬라이스 문화 오히려 간단한 방법에 의해 적용하고 신경 조직의 신뢰성과 재현성 손상에 이르게 할 수 있습니다. 이 생체 내에서 뇌졸중 및 허혈을 유도 복잡하고 문제가 동물 실험 완전히 대조적이다. 분석을 확대하여 보존하고 뇌 기능을 복원하는 방법에 대한 새로운 방법을 제공 할 수있는 혈관의 반응에 대한 연구를 포함합니다. 여기에 제시된 슬라이스 문화 접근 방식은 허혈성 뇌 손상의 연구를위한 매력적이고 중요한 도구로 발전 할 수 있으며 신경 보호하기위한 잠재적 인 치료 대책을 테스트하는 데 유용 할 수 있습니다.

서론

중추 신경계는 혈관에 의한 손실이나 산소와 포도당 공급의 감소에 특히 민감하다. 뇌에 혈액을 공급하더라도 다소 짧은 중단 일반적인 스트로크 증후군 선도 중요한 뇌 영역의 기능에 영구적 손실을 유도 할 수있다. 주 영향 영역에서 신경 세포 손실에 더하여, 일반적으로 이차 손상으로 인한 추가적인 지연 성 뉴런의 손실이있다. 불행하게도 지금까지 차 신경 죽음의 감소에 대한 신경 치료는 ¹ 사용할 수 없습니다. 이차 손상의 기전 연구를위한 연구 노력은 중간 대뇌 동맥 폐쇄 다양한 혈전 폐색 기법 등 뇌허혈 동물 모델의 사용에 의존한다 (검토를 위해 최근 ² 참조). 병렬로 인해 제한 및 동물 모델, 다양한 CNS 조직의 Organotypic 슬라이스 문화의 사용과 윤리적 인 문제로 스튜를 허용하는 사용되었다상해 ^3-5의 다양한 유형에 대한 신경 반응의 마구.

허혈성 뇌 손상을 모방하는 조건 하에서 반응 신경 연구를위한 산소 포도당 박탈 모델 시스템 (OGD)가 개발되었다. 이 모델에서, 슬라이스 문화 일시적 글루코스 부족과 산소의 부재하에 질소 가스로 평형화 한 매체에 노출된다. 이러한 처리로, 생체 ^6,7 허혈성 손상 후 관찰 된 것과....