당연히 여성 쥐 사이클링에 에어컨 공포의 멸종 유학을위한 프로토콜

요약

에스트로겐과 같은 생식선 호르몬은 공포, 소멸, 기억을 포함한 여러 실험 패러다임에서 기억 형성을 조절합니다. 이 프로토콜은 발정 주기 모니터링 및 외인성 에스트로겐 투여를 포함하여 자연적으로 순환하는 암컷에서 사멸 중 특히 생식선 호르몬의 영향을 조사하기 위한 일련의 방법을 설명합니다.

초록

조건화 된 공포의 멸종 광범위 남성 설치류에서 연구되고있다. 최근, 특정 행동 작업 및 대응 행동에 대한 신경 메커니즘이 여성과 남성의 차이가 있음을 나타내는 연구의 증가가 있었다. 연구 조사에서 여성을 사용하면 자체 발정주기 동안 성선 호르몬의 변화의 도전을 나타낼 수 있습니다. 이 프로토콜은 암컷 쥐의 공포 멸종 메모리의 통합에 에스트로겐의 역할을 조사하는데 유용하다 잘 확립 된 절차에 대해 설명합니다. 발정주기 및 외인성 에스트로겐 투여 전에 멸종 훈련의 단계는 24 시간 이상 멸종 리콜에 영향을 미칠 수있다. 여기에 설명 발정 상 동정을위한 질 보라고 기술은 심사 자연스럽게 성선 호르몬의 순환 조작을 돕는다. 또한 에스트로겐은 공포 멸종 메모리를 변조 할 수있는 메커니즘을 서술 수도 기본 설치류 모델의 사용여성.

서론

고유의 성별 차이는 인간과 쥐 모두에서 다양한인지 적 행동과 학습 패러다임에서 관찰된다. 예를 들면, 사람들이 더 나은 공간 능력 ^1-3 반해 여성은 일반적으로, 강력한 구두 및 세부 지향 능력을 가지고 있다고보고되고있다. 이러한 성별 차이는 성선 호르몬의 영향으로 일부 원인 일 수 있습니다. 높은 에스트라 디올 수치는 여성이 더 나은하는 작업에 대한 성능을 향상시킬 수 있지만, 사람들이 일반적으로 잘 ^4-6을 작업의 성능을 악화. 이 증거는 강제적이지만, 완전 인간 연구에서의 실험 환경을 제어하는​​ 능력은 제한된 행동에 이러한 효과가 호르몬에 특이 적으로 기인 할 수 있는지 결정하기 어렵게 할 수있다. 동물 연구는 반대로 완전히 제어 상황을 허용.

공포 소멸 신경 기본 메커니즘이 확인되었으며, 수컷 잘 연구되어 있지만하는지 확실이 시스템은 여성 또는 그들이 어떻게 발정주기에 걸쳐 변경에 동일합니다. 공포 컨디셔닝 및 멸종 널리 불안 장애에 관한 연구를 수행하는 설치류와 인간의 행동 패러다임을 사용한다. 여성이 불안 장애 위험이 높은뿐만 아니라 높은 증상 기간과 심각성 ^7-13을 감안할 때, 이러한 연구에 여성을 포함하는 것이 중요하다. 이 연구에서 여성의 대표되지 못하고는 성 ....

프로토콜

참고 :이 프로토콜의 모든 절차는 매사추세츠 종합 병원의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 역할을 연구 동물 관리에 분과위원회에 의해 승인 및 National Institutes of Health 안내문을 준수하고 있습니다.

1. 동물 주택 및 취급 절차

1. 도착 후, 집 성인 스프 라그 돌리 암컷 쥐 나이의 약 8-10주 우드 칩 침구와 3-4 인치 플라스틱 쓰레기통 그룹 (2백~2백25g 무게). 이 국수 임의로 액세스식이 요법과 물과 12 시간 / 암주기를 유지한다. 일주 최소 주택 및 동물 시설 조건에 적응 쥐를 남겨.
   참고 :이 원고의 모든 절차가 빛을주기 동안 수행된다.
2. 이 적응 기간 후, 5 분 2~3일에 대한 각각의 모든 동물을 처리합니다. 제대로, (몸통에 의해 아닌 꼬리가 지원하는) 한 번에 쥐를 데리러안전하게를 개최하고,이 시간 동안 그들을 애완 동물. 흠칫, 또는 오랜 기간에 대한 불안, 스트레스를 더 나타날 동물을 처리합니다. 이 프로토콜에서 다음 단계에 영향을 미칠 수있는 스트레스를 처리 최소화하기 위해이 작업을 수행합니다.
   참고 : 일수 및 시간 다른 실험실에 따라 다를 수 있습니다 동물을 처리하는 금액 그러나, 이들은 같은 실험실 내 실험 ....

결과

이 공포 멸종 리콜 프로토콜에서 %의 동결은 공포의 지표로 측정 하였다. 물론 진화와 멸종 훈련의 기억을 유지 동물 멸종 리콜 동안 행동 테스트의 마지막 날에 저 두려움을 나타냈다. 남성과 여성의 쥐 크게 에어컨, 멸종 동안 조건화 된 공포의 발현에 차이가, 그리고 단계 (그림 2)을 기억하지 않습니다. 동물 하이 사이드 및 로우 에스트로겐 발정 단계 그룹으로 개별적으로 분석된다 그러나 성별 차이가 분명해진다. 발정주기의 낮은 에스트로겐 metestrus 단계에서 멸종 훈련을 받아야 암컷 쥐가 3 일뿐만 아니라 발정 훈련 것과 같은 (그림 3)에 멸종 메모리를 기억하지 않습니다. 이 metestrus 여성은 남성에 비해 멸종 리콜 (가난한 멸종 메모리) 동안 상당히 큰 두려움 복구를 나타낸다. 그러나 metestrus 여성은 피하 injec 때입니다테드는 멸종 학습 이전에 에스트라 디올의 15 ㎍ / kg의 용량으로, 공포 멸종 메모리의 통합은 멸종 리콜

토론

공포 멸종 다양한 조작에서 확인 및 평가 조건화 된 공포의 멸종을 중재 신경 메커니즘을 수컷 쥐에서 광범위하게 연구되고있다. 상대적으로 적은 연구는 암컷 쥐 공포의 멸종에서 성선 호르몬의 역할을 조사했다. 특히 공포 멸종에 에스트로겐의 효과를 연구하기 위해, 자연 순환 암컷 쥐에는 3 일간의 행동 패러다임을 실시한다. 이 절차는 습관화 / 에어컨, 멸종 및 멸종 리콜 단계로 구성됩니다. 이 프로토콜을 이용하면, 암컷 쥐 하이 에스트로겐 발정 ¹⁵ 소멸 여성에 비하여 낮은 에스트로겐 metestrus 위상 전시 높은 빙점 (손상 또는 소등 리콜) 동안 훈련 멸종 것이 입증되었다. metestrus 단계에서 멸종 훈련에 앞서 에스트라 디올의 관리 멸종 메모리 ^(16)의 통합을 변조한다. 이 얼어의 감소에 의해 입증된다멸종 리콜 동안 g. 함께, 이러한 결과는 난소 호르몬의 영향과 행동에 발정주기에주의와 여성 연구를 수행의 중요성을 강조 표시합니다. 대조 실험은 여기에 설명되지 않았지만, 그것.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
공포 컨디셔닝 챔버	Coulbourn Instruments
Graphic State	Coulbourn Instruments
사운드 감쇠 상자	Med Associates, Inc.	NIR-022MD
에스트라디올	시그마-알드리치	E1024	피하 주사용 참
기름	시그마-알드리치	S3547-250ML
프리즈스캔	클레버시스, Inc.
딥 퀵 스테인	Jorgensen Laboratories, Inc.	J0322A1, J0322A2, J0322A3
면 팁 애플리케이터	Fisher Scientific	23-400-114	6인치, 멸균
0.9% 식염수	LabChem, Inc.	LC23460-2	염화나트륨 w/v
Selectfrost 현미경 슬라이드	Fisher Scientific	12-550-003
Virex II 256	Diversey, Inc.	5019317	물로 1:256을 희석하십시오
Luer-Lok 팁 1ml 주사기	Becton Dickinson	309628
피하 일회용 바늘	Exelint International, Co.	26402	26 게이지