이 절차의 전반적인 목표는 쥐의 갈비뼈에서 뼈의 일부를 성공적으로 절제하는 것입니다. 이 절차는 대규모의 긴 뼈 복원을 연구하기 위한 모델로 개발되었습니다.
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방법 논문
마우스 리브를 절제하는 수술 : 대규모 긴 뼈 수리에 대한 모델
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이 논문에서
요약
초록
이 프로토콜은 마우스 리브를 이용하여 대규모 뼈 수리에 대한 새로운 모델 연구원을 소개합니다. 주변 늑간근에서 원하는 리브 노출 흉추 원통 벽을 개방 기흉 유도없이 리브의 원하는 부분을 절개하고, 절개 폐쇄 수술에 대한 동물의 제조 : 절차는 다음과 같은 세부. 팔다리 뼈대의 뼈에 비해 매우 리브 접근 가능하다. 인접한 리브 자연 고정을 제공하기 때문에 또한, 더 내부 또는 외부 고정 장치는 필요하지 않습니다. 수술은 시판 공급 장치를 사용 배우기 간단하고, 동물에 의해 잘 용납입니다. 절차 또는 주변 골막을 제거하지 않고 수행 할 수 있기 때문에 보수 골막에의 기여가 평가 될 수있다. 2 개월 - 결과는 골막이 유지되는 경우, 강력한 수리 (1)에서 발생하는 것을 나타냅니다. 우리는 것이 프로토콜의 사용을 기대리브 수리에 대한 연구를 자극하고 결과는 몸 주위에 다른 위치에서 뼈 수리를 자극 할 수있는 새로운 방법의 개발을 촉진됩니다.
서론
골격 손상, 만성 관절염을 쇠약하게하고, 재건 수술과 관련된 심각한 문제는 경제 생산성, 가족 복지, 삶의 질에 영향을. 작은 휴식과 병변이 상당히 잘 치유 할 수 있지만, 인간의 구조와 기능을 복원 재건 절차에 의존해야하므로 큰 결함을 수리하고 할 수 없습니다. 재건은 동종 또는 heterogeneic 이식, morcellized 뼈 이식 비계, 또는 사지 연장술을 포함 할 수있다. 불행하게도,뿐만 아니라 이러한 치료하지만 수리 뼈의 원래 강도가 거의 달성하지 않습니다와 관련된들이 지속적인 병적 요인이있다. 따라서, 새로운 임상 적 접근 방법이 필요하다.
분절 결함을 치료하는 혁신적인 방법을 개발 일방향 대규모 수리 자연스럽게 발생하는 상황을 연구하는 것이다. 포유 동물이 일에 제한 간주하는 동안 양서류는 유명 골격 요소를 재생성 할 수 있습니다능력이다. 그러나, 20 세기 초반 이후, 인간의 리브의 재생의보고는 적다 인간 그렇게 1-4 한정되지 않을 수 있음을 제안 발표되었다. 현재 이러한 현상은 제일 턱, 얼굴 및 귀 재건 리브 재료를 사용하여 성형 외과 의사에 의해 공지되어 있지만, 5보다 폭넓게 이해되지 않는다. 더 자세하게 수리를 연구하기 위해, 우리는 마우스를 사용하여....
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프로토콜
참고 : 모든 절차가 남부 캘리포니아 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인 동물 프로토콜에 따라 있습니다.
수술 1. 준비
- 필요한 수술 도구 및 소모품의 레이아웃 (1 항목 살균 - 재료 목록 18)과 해부 현미경 및 후드 또는 하강 기류 테이블에 광섬유 트랜스 조명을 정렬합니다.
- 마취를 유도하기 위해 4 % 이소 플루 란과 유도 챔버 (3 개월 - - 30 G, 1 ~ 20) 성적으로 성숙한 마우스를 놓습니다.
- 발 및 / 또는 꼬리 핀치 테스트 마취를 확인합니다.
- 수술 중 안구 건조를 방지하기 위해 마우스의 눈에 연고를 적용합니다.
- 현미경 단계로 마우스를 이동합니다. 유지 보수 호스의 코 콘에 마우스를 놓고 옆에 위치. 체온을 유지하는 데 도움 동물에 인접한 온난화 파우치를 제공합니다.
하지E :. 마우스의 위치는 개인 취향 및 / 또는 외과 의사의 손 방향에 따라 달라집니다, 왼쪽 또는 오른쪽 중 어느 쪽이 괜찮습니다. - 유지 보수를 위해 3 %, 그리고 속도를 호흡 시계 - 2 이소 플루 란을 조정합니다.
- 25 G 바늘 수술 후 통증 부 프레 노르....
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결과
동물은 일반적으로 절개가 잘 치유,이 과정에서 신속하게 복구하고, 동물은 정상적인 동작을 나타낸다. 절차는 시판 공급 장치를 사용하고 실시 후, 1 시간에 따라 완성 될 수있다. 실험 데이터를 생성하는 절차를 사용하기 전에, 어떤 큰 뼈 조각이 절제 영역 내에 남아있을 수 있는지 확인 일 0 시점 절제술을 분석하는 것이 중요하다. 이것은 전형적으로 특별한 방사선 안전 승인을 필요로하더라도 적절한 절차를 평가하는 한 가지 방법은, 수술 후 X 선 또는 microCT 촬상 의해 동물을 평가하는 것이다. 대신, 또 다른 간단한 평가는도 1a에 도시 된 바와 같이 골격 염색 준비 수행함으로써 완성 될 수있다. 이것은을 EtOH에 고정, 흉곽를 수집 포함하고, 알리자린 레드 염색 표준 프로토콜 11을 사용. 그것은 그쪽 때문에 (부드러운 조직을 멀리 소화하는 데 사용) 수산화 칼륨을 생략하는 것이 유용 할 수 있습니다원한다면 여전히 표본 t 조직학 분석을 위해 나중에 사용될 수있다. 샘.......
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토론
처음이 프로토콜을 학습 할 때, 어디에서 문제가 될 수있는 초기 절개를 찾을 수 결정. 그러나 안락사 마우스에 연습 외과 의사가 초기 절개를 배치하고 절제 할 원하는 리브 노출 위치를 배울 수 있습니다. 시체에서 작업도 또는 골막없이 리브 부분을 제거하는 데 필요한 미세 운동 능력을 향상시킨다. 또한,이 절차에 새로운 사람이 훌륭한 도구와 얇은 봉합을 조작하는 것은 어려운 할 수없는 경우도 있습니다. 오프 묶는 동안, 초과 봉합에 당기는 조직을 찢어 수 있습니다. 따라서, 시체에 일부 연습 봉합 도움이 될 수 있습니다. 외과 의사가 설치류와 수술에 새로운 마지막 경우, 그것은 다른 사람이 처음 몇 수술 중 감시 및 마취 조정을 지원하는 것이 유용 할 수있다.
이 프로토콜의 가장 중요한 단계는 흉막 스파 (기흉을 유발하지 않고 공기의 이상 수집을 뼈를 절제한다흉막 막 수술 닫 너무 얇은 때문에 어려운 CE)는 마우스에 치료하는. 리브 열등 근육과 정수리 늑막의 층은 매우 얇고 .......
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다
감사의 글
원고를 비판적으로 읽어주신 Mariaani 연구실 구성원들에게 감사드립니다. 우리의 자금 출처는 다음과 같습니다: Baxter Medical Scholar Research Fellowship(M.K.S.로), USC 학부 펠로우십 및 Provost, Dean Joan M. Schaeffer 및 Rose Hills Fellowships(M.K.S.로). 우리는 또한 Pasadena City College(T.T.T로)를 통해 CIRM BRIDGES 펠로우십을 인정합니다. James H. Zumberge Research and Innovation Fund, USC 재생 의학 이니셔티브 및 NIAMS NIH는 Award Number R21AR064462(F.V.M에).
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 중형 미세해부 가위(Vannas-Tü bingen 스프링 가위 5mm) | Fine Science Tools | 15003-08 | |
| Fine Micro-dissection scissors (Vannas Spring Scissors - 2mm Cutting Edge) | Fine Science Tools | 15000-04 | 곡선 팁이 유익합니다. |
| 마이크로 메스 5.0mm | Fine Science Tools | 10315-12 | 기타 미세 메스로 대체할 수 있습니다. |
| Dumont 55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| 견인기 | Fine Science Tools | 17004-05 | 조절성이 편리한 |
| 마이크로 니들 홀더 | Fine Science Tools | 12060-01 | |
| 9.0 나일론 봉합사 (Ethilon), 테이퍼 포인트 베스트 | Ethicon | 2819G 또는 이와 유사한 | 테이퍼 포인트 가장 좋지만 역 절단도 좋습니다 |
| 7.0 prolene 봉합사 (Prolene) | Ethicon | 8700H 또는 이와 유사한 | 6-0도 사용할 수 있으며 바늘 포인트는 다를 |
| 수 있습니다.큰 집게 (Adson 집게) | Fine Science Tools | 11006-12 | 다른 브랜드는 고급 |
| 윤활제 눈 연고 (Akwa Tears) | Akorn | 17478-062-35 | |
| 봉합 접착제 (GLUture 국소 조직 접착제) | Abbot | 32046-01 | 은 우수한 작업 시간을 가지고 있습니다 |
| 면도기 | Wahl | 9918-6171 또는 유사한 | |
| 클램프 램프 | Zoo Med | LF-5 | |
| 적외선 전구, 75W | Zoo Med | RS-75 | |
| RC2 설치류 마취 시스템 | VetEquip | 922100 | |
| IsoFlo (Isoflurane) | Abbot | 05260-05 | |
| 부프레노르핀 (Buprenex) | 레킷 벤키저 | 12496-0757-1 | |
| 베타딘 | 퍼듀 프레드릭 | 67618015017 | |
| 맛을 낸 젤라틴, 라즈베리 | 젤로 | B000E1FYL0 | '지글러'의 일관성으로 단단하게 만들어졌습니다 |
참고문헌
- Philip, S. J., Kumar, R. J., Menon, K. V. Morphological study of rib regeneration following costectomy in adolescent idiopathic scoliosis. Eur Spine J. 14 (8), 772-776 (2005).
- Munro, I. R., Guyuron, B. Split-rib cranioplasty. Ann Plast Surg. 7 (5), 341-346 (1981). ....
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재인쇄 및 허가
