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방법 논문

우울증 같은 행동의 모델로 강제 수영 테스트

40.7K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/52587

⸱

2015년 3월 2일

 ,  ,  , 
1School of Psychological Sciences, Tel-Aviv University, 2School of Behavioral Sciences, Academic College of Tel Aviv-Yaffo, 3Department of Education and Psychology, The Open University of Israel, 4School of Health and Life Sciences, Hadassah Academic College

이 논문에서

요약

이 프로토콜은 설치류의 우울증과 유사한 행동을 연구하는 데 사용되는 강제 수영 테스트를 설명합니다. 이 절차는 물이 담긴 용기에 동물을 넣는 것을 포함하며, 이는 결국 행동적 절망을 반영하는 것으로 간주되는 부동성 행동의 전시로 이어질 것입니다.

초록

본 프로토콜의 목표는 설치류의 우울증과 유사한 행동을 연구하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 분석 중 하나인 강제 수영 테스트(FST)를 설명하는 것입니다. FST는 물이 담긴 용기에 동물을 넣었을 때 처음에는 탈출하려고 노력하지만 결국에는 행동적 절망의 척도를 반영하는 것으로 간주될 수 있는 부동성을 보일 것이라는 가정을 기반으로 합니다. 이 검사는 동물을 스트레스에 노출시키는 것과 관련이 있기 때문에 광범위하게 사용되었으며, 이는 주요 우울증 경향에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났습니다. 또한 FST는 음식 섭취의 변화, 수면 이상, 약물 금단 현상으로 인한 무쾌감증을 포함하여 인간의 우울증에 의해 영향을 받거나 변경되는 몇 가지 요인을 공유하는 것으로 나타났습니다. 이 절차의 주요 장점은 수행이 비교적 쉽고 결과를 쉽고 빠르게 분석할 수 있다는 것입니다. 또한, 광범위한 항우울제에 대한 민감성으로 적합한 선별 검사가 되는 것은 높은 예측 타당성으로 이어지는 가장 중요한 특징 중 하나입니다. 그 매력에도 불구하고 이 모델에는 여러 가지 단점이 있습니다. 첫째, 이 검사에서는 만성 확대 문제가 문제가 되는데, 그 이유는 실제 환자가 증상이 완화되기까지 최소 몇 주 동안 치료를 받아야 하기 때문입니다. 마지막으로, FST의 혐오감으로 인해 이 절차에 따라 뇌 분석을 수행할 경우 FST가 뇌 구조/기능에 미칠 수 있는 가능한 영향을 고려하는 것이 중요합니다.

서론

우울증은 생명을 위협하는 정신 장애와 5 %의 발생률이 15 ~ 20 %의 평생 유병률 전 세계 주요 공중 보건의 관심사입니다. 또한, 2020 년 우울증은 질병 1,2의 부담에 상위 세 기여자에있을 것으로 추정된다. 우울증 장애와 연관된 건강 관련 비용 증가, 삶의 질 저하 및 3,4- .Current의 약리학 치료 적 치료 효능을 제한 및과 연관된 심혈관, 대사 질환 및 신경 정신 질환을 포함하여 다양한 질환에 대한 주요 위험 인자로 간주되고 많은 해로운 부작용 5,6. 따라서, 혁신 및 개선 된 치료법의 발전과 함께이 질환의 병태 생리에 대한 이해가 중요 남아있다. 따라서, 동물 모델은이 분야에서 연구를 진행에 필수적이다.

이 질환의 연구 (사용 많은 모델이 있습니다 예를 들어, 자당 기본 설정 테스트 또한이 모델 7, 8의 개발자 후 Porsolt의 테스트로 알려진 강제 수영 테스트 (FST와, 꼬리 서스펜션 테스트)) 가장 일반적으로 사용되는 분석 7,9-12 중 하나 인.

FST 동안 동물이 탈출 할 수있는 물이 가득 컨테이너에 배치됩니다. 동물은 첫 번째 탈출을 시도하지만 결국 (즉, 물 위의 코를 유지하기 위해 필요한 것을 제외하고 움직임이없는 부동) 부동을 전시 할 예정이다. FST는 여러 가지 이유로 동물 연구에서 매우 인기있는 모델입니다. 첫째, 주요 우울증 12-14 경향에 대한 역할이 나타났다 응력에 동물의 노출을 수반한다. 또한 우울증은 종종 스트레스를 15-17으로 처리 할 수있는 능력의 부족으로 볼 수 있습니다. 둘째, 테스트 이전 항우울제 약물 치료 FST <부동성에서 감소하는 것으로 나타났다SUP> 18 ~ 23. 따라서, 종종 전위 항우울제 15-17,24 가진 신규 한 화합물에 대한 스크리닝 검사로서 사용된다. 또한, FST는 식품 소비의 변화, 수면 이상과 같은 영향을 또는 인간에 우울증에 의해 변경되는 몇 가지 요소 공유하는 것으로 나타났다 무 쾌감 증 15-17,24을 약물 철수를 유도. 이 (25), (26)는 ( '야생형'쥐에 비해)이 시험은 때때로 기저 부동의 증가 또는 감소와 돌연변이 생쥐에서 우울증 같은 행동을 평가하는 데 사용되는 이유이다.

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프로토콜

참고 : 모든 실험 프로토콜은 이스라엘의 동물 관리 및 사용에 대한 국제위원회에 의해 승인되었다. 모든 노력은 사용되는 동물과 이들의 고통 수를 최소화 하였다.

강제 수영 테스트 1. 준비

  1. 두 개의 인접한 객실을 사용합니다. 행동 시험 전 동물을 유지하는 '대기실'및 절차를 수행하기위한 다른 하나 방 사용.
  2. 투명한 원통형 유리 용기를 준비 50 cm이고 높이 20cm의 직경을 측정 (컨테이너의 수에 대한 유일한 제한은 가능한 공간이다).
    참고 : 같은 방에 동시에 여러 동물을 실행할 수 있습니다. 그렇다면 동물이 절차를 수행하는 동안 서로를 보지 않도록, 어두운 화면을 사용하여 서로 물을 별도의 용기.
  3. 모든 카메라 w하는 방식으로 하나 이상의 컨테이너를 인식하도록 콘테이너 앞의 비디오 카메라 (S)를 준비영상을 보는 동안 병이 나중에 동물의 행동의 명확한 관찰 할 수 있습니다.
  4. 저체온증을 방지하기 위해 절차를 완료 한 동물을위한 깨끗한 건조 케이지, 열 램프 및 열 패드를 준비합니다. 새장 바닥이 압지했다 있는지 확인하고 젖은 경우 변경합니다. 시험 방에 케이지를 설치하지 마십시오.
    주 :이 과도 건조 케이지에 체류하는 동안 다른 가정 케이지에서 동물을 혼합하지 않도록합니다.

2. 동물 취급을 시험하기 전에

  1. 12 시간 빛 / 어둠 사이클이 방에 주택의 동물.
  2. 실험 절차의 일 동안 동물에게 절차의 방에 소요되는 특정 시간을 제외하고 음식과 물에 자유롭게 접근을 제공합니다.
  3. 래트를 사용하는 경우, 오일 앞서 실험 과정의 시작으로, 매일 약 2 분 동안 동물을 처리한다.

3. 교육 과정

절차는 쥐에 대해 다르​​게 수행한다.

참고 : 그들은 항상 물에있는 동안 모두 마우스 및 쥐의 경우, 동물을보고. 경우 동물 (예를 들어 매우 피곤, 플로트을 머물 수 없습니다) 물에서 동물을 제거하고 실험에서 제외 심각한 고민에 나타납니다.

  1. 쥐 - 사전 검사 (제 2 분) 및 테스트 (마지막 4 분)로 나누어, 하나의 세션 6 분 긴있다.
    1. 마우스 위해서는 대기실에 행동 테스트에 최소 30 분 이전에 자신의 홈 케이지에 동물을 수송, 테스트 환경에 적응 얻을 수 있습니다.
    2. 25 ° C에서 수돗물 실린더를 채우고 그 뒷다리와 용기의 바닥에 접촉 할 수 없도록, 마우스 '의 크기에 따라 물 깊이를 조정한다.
    3. 영상을 보면서 나중에 동물의 식별을 위해 동물의 실린더 번호를 표시한다.
    4. 비디오 카메라 / S를 켠 다음 6 분 동안 물이 채워진 실린더 용기의 각 마우스를 놓습니다.
    5. 6 분 경과 후, 오프이야 / 카메라 전원을 켭니다 컨테이너에서 마우스를 제거하고 위의 가열 램프와 그 아래 열 패드 과도 건조 케이지에 넣습니다. 이 케이지에서 회복하는 동안 마우스는 밀접하고 지속적으로 모니터링해야한다. 이러한 목적을 위해 그 장에 ​​온도가 37 ° C를 초과하지 않음을 확인하기 위해 마우스의 수준에 온도계를 배치 할 수있다. 또한, 모든 그것의 램프 아래 또는 패드에 떨어지면 그 같은 케이지를 배치; 이 원하는 경우 마우스가 시원한 영역으로 이동할 수 있습니다.
    6. 다음 마우스에 어떤 영향을 피하기 위해 모든 세션 후 물을 변경합니다.
  2. 쥐 - 24 시간 떨어져 2 세션이 있습니다. 첫 번째 세션 사전 테스트 단계 (15 분)이며, 두 번째 세션 테스트 단계 (5 분)이다.
    1. 쥐 위해서는 풍토에 순화 얻을환경 테스트, 대기실 행동 시험 적어도 30 분 전에 자신의 홈 케이지에 동물을 수송.
    2. 23 ± 1 ℃에서 수돗물 실린더를 채우고 그 뒷다리와 용기의 바닥에 접촉 할 수 없도록, 쥐의 크기에 따라 물 깊이를 조정한다.
    3. 영상을 보면서 나중에 동물의 식별을 위해 동물의 실린더 번호를 표시한다.
    4. 15 분 동안 물이 채워진 실린더 용기에 각각의 쥐를 놓습니다.
    5. 15 분은 컨테이너에서 쥐를 제거하고 위의 가열 램프와 그 아래 열 패드 과도 건조 케이지에 배치 경과 한 후. 이 케이지에서 회복하는 동안 쥐 밀접하고 지속적으로 모니터링해야한다. 이러한 목적은 케이지의 온도가 37 ° C를 초과하지 않음을 확인하기 위해 쥐의 수준에서 온도계를 배치 할 수있다. 또한, 그러한 케이지를 놓지 모든 그것의 FA램프, 또는 패드를 통해 재편; 이 원하는 경우 쥐가 시원한 영역으로 이동할 수 있습니다.
    6. 다음 쥐에 어떤 영향을 피하기 위해 모든 세션 후 물을 변경합니다.
      주 :이 사전 검사 스테이지의 단부이다.
    7. 쥐에 대한 순서는 테스트 환경에 적응 얻을에 24 시간 이상, 대기실에 행동 테스트에 최소 30 분 이전에 자신의 홈 케이지에 동물을 운반 할 것.
    8. 23 ± 1 ℃에서 수돗물 실린더를 채우고 그 뒷다리와 용기의 바닥에 접촉 할 수 없도록, 쥐의 크기에 따라 물 깊이를 조정한다.
    9. 영상을 보면서 나중에 동물의 식별을 위해 동물의 실린더 번호를 표시한다.
    10. 비디오 카메라 / S를 켠 다음 5 분 동안 물이 채워진 실린더 용기에 쥐를 놓습니다. 각각의 쥐 전날과 같은 방에 같은 컨테이너 위치에서 테스트되어 있는지 확인합니다.
    11. 5 분 카메라를 켭니다 경과 한 후에는 온 / 오프이야, 컨테이너에서 쥐를 제거하고 위의 가열 램프와 그 아래 열 패드 과도 건조 케이지에 넣습니다. 이 케이지에서 회복하는 동안 쥐 밀접하고 지속적으로 모니터링해야한다. 이러한 목적은 케이지의 온도가 37 ° C를 초과하지 않음을 확인하기 위해 쥐의 수준에서 온도계를 배치 할 수있다. 또한, 모든 그것의 램프 아래 또는 패드에 떨어지면 그 같은 케이지를 배치; 이 원하는 경우 쥐가 시원한 영역으로 이동할 수 있습니다.
    12. 다음 쥐에 어떤 영향을 피하기 위해 모든 세션 후 물을 변경합니다.
      참고 :이 테스트 단계의 끝입니다.

4. 행동 코딩

마우스의 경우, 시험 단계로 정의 마지막 4 분 번호. 래트의 경우, 시험 단계의 5 분 번호.

  1. 마우스가 플로팅되는 경우 코드의 시간의 지속 기간은 "부동"로 보냈다물 위에 코를 유지하기 위해 필요한 것을 제외하고 모든 운동의 부재와.
  2. 코드와 시간의 기간 "고투 / 등산"앞다리의 빠른 이동이 앞발이 물의 표면을 파괴되도록 발견되면.
  3. 코드 얕은 방식으로 앞발의 움직임이나 뒷다리가 관찰되는 경우 "수영"로 보낸 시간의 기간.
    주 : 이것은 시간 - 샘플링 방법을 포함한다, 이러한 행동을 코딩하는 다른 방법을 사용할 수있다. 테스트 세션에 걸쳐 5 초 간격으로 에피소드의 주파수로 어려움을 겪고 또는 부동, 수영을 평가.

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결과

다음과 같은 결과는 우리가 실험실에서 출판되지 않은 데이터를 기준으로 한 것입니다. 이 실험에서, 성인 ICR 암컷 마우스는 선택적 세로토닌 재 흡수 억제제 (SSRI) 에스시 탈 로프 람 또는 새로운 허브 항 우울 및 항 불안 치료 (NHT) 치료 3 주 후 시험 하였다 (한방 치료에 대한 자세한 정보는, 12 참조 , 27, 28). 편도 ANOVA는 치료가 FST에서 우울증 같은 행동을 감소 것으로 나타났다 [F (2,58) = 4.88, P <0.05]. 일방적 Dunnet 분석은 에스시 탈 로프 람 또는 NHT 중 치료가 FST (도. 사후 비교를위한 1A)에서 우울증 같은 행동을 감소 것으로 나타났습니다. 치료는 FST에 어려움을 겪고 동작을 증가 [F (2,58) = 4.36, P <0.05]. 일방적 Dunnet 분석은 에스시 탈 로프 람과 치료 (사후 비교를 위해 그림 1B 참조)

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토론

FST은 우울증과 같은 행동을 모니터링하는 데 사용되며,이 행동 절망 부동성 (3)의 측정 값을 반영한다는 가정에 기초한다. 이 절차의 주요 장점은 상대적으로 쉬운 조작과 빠른 결과에 거짓말. 또한, 적절한 선별 검사하게 항우울제의 넓은 범위에서 감도가 높은 예측 타당성 (29)에 이르는 가장 중요한 특징 중 하나이다. 중요한 것은,이 시험은 또한 항불안제 3,30 효과를 갖는 것으로 밝혀졌다 벤조디아제핀, 우울증의 치료를 목적으로하지 않는 약제를 구별 할 수있다. 또한 얼굴의 유효성에 기여하는 우울증의 연구 FST의 값의 또 다른 예는 우울증의 소인 모델 부동 거동에 영향을 발견 사실이다. 예를 들어, 유전자 연구에서 우울증 같은 행동의 마커로 사용. 유전자 동물 모델일부 균주는 FST (33, 34)에 본질적으로 높은 부동을 표시하고 있지만 우울증 성공적으로 유전 적 특성에 의해 결정되는 부동 제안, FST (32)에서의 부동...

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공개 사항

저자는 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

이 연구는 이스라엘 과학 재단(보조금 번호 738/11), 이스라엘 국립 정신생물학 연구소(NIPI-7-2011-12) 및 오픈 유니버시티 재단(Open University Foundation)의 지원을 받았습니다

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
컴퓨터DellIntel® 코어™ i3-2120 cpu @ 3.30 GHz, 4 GB ram
카메라VIDOAU-CB422B/W CCD 카메라 
http://www.vido-europe.com/products_detail.asp?id=33&pcategory=2
코딩 소프트웨어BiobserveFST 분석
http://www.biobserve.com/products/fst/index.html
가열 램프IkeaAA-19025-3ESPRESSIVIO 400.504.46 - 20W G4 전구 
http://www.ikea.com/ms/en_US/customer_service/assembly/E/E00050467.pdf
난방  베개삭스EF-188B38*38cm 난방  pillow
http://www.sachs.co.il/eng/lego_tree.php?instance_id=21&actions=show&id=
604

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