실린더 시험의 고전 앞다리 비대칭 분석 일상적 뇌 손상 또는 뇌졸중 다음 래트에서 행동 결손을 평가하기 위해 사용된다; 그러나, 쥐에서 일관된 적자를 감지하지 못한다. 이 연구는 발 드래그 동작을 정량화하는 것은 쥐의 뇌 손상에 더 민감 분석 것을 보여줍니다.
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이 논문에서
요약
초록
실린더 테스트는 통상적으로 설치류 앞다리 운동 피질 허혈 손상에 초점을 예측하는 데 사용된다. 실린더에 배치하는 경우, 설치류는 양육과 자세 지원을위한 자신의 앞다리의 발과 실린더의 벽을 만져 탐구. 앞다리의 감각 피질에 허혈 손상 후, 쥐 앞다리 비대칭이라고한다 그들의 영향을받는 발을 적은 접촉의 결과로 자세 지원을 위해 자신의 영향을받지 앞다리의 발에 더 많이 의존하고있다. 반면에, 마우스의 뇌에 초점 허혈성 손상은 앞다리의 비대칭 성에서 비교 일치 적자가 발생되지 않습니다. 앞다리 비대칭 적자가 자주 관찰되는 반면, 마우스는 "발 드래그"라고 새로운 행동 포스트 행정을 보여 않습니다. 발 - 드래그는 4 다리 자세로 후면에서 분리 할 때 직접 벽에서 밀어보다는 실린더 벽을 따라 그 영향을받는 발을 끌어 마우스의 경향이다. 우리는 이전에 있음을 증명하고있다발 드래그 동작은 앞다리의 운동 피질에 작은 대뇌 피질의 허혈성 손상에 매우 민감하다. 여기에 우리가 발 드래그 분석에 대한 자세한 프로토콜을 제공합니다. 우리는 발 드래그가 무엇인지 정의하고 발 드래그 동작을 정량화하는 방법을 보여줍니다. 실린더 테스트 관리하는 간단하고 저렴한 실험이며 사전 훈련 또는 음식 박탈 전략을 필요로하지 않는다. 작은 초점 부상의 인기가 계속 증가하고 생산되는 두 가지 모델 - 실린더 테스트와 발 드래그 분석을 사용하여, 이러한 photothrombosis 및 엔도 텔린 -1 (ET-1) 유도 된 허혈과 같은 대뇌 피질의 허혈성 손상을 예측하는 틈새 시장을 채 웁니다 중간 대뇌 동맥 폐색보다. 마지막으로, 실린더 시험에서 발 - 드래그 동작을 측정하는 단계 이전 앞다리 비대칭 분석 일관성 결손을 검출하지 못한 트랜스 제닉 마우스 균주를 사용하여 넓은 코호트 피질 손상 후 기능 회복의 연구를 허용 할 것이다.
서론
신경 재생 전략 목표는 조직 복구 및 복구 기능을 모두 보여주는 것이다. 기능 회복은 일반적으로 특정 뇌 영역에 대한 손상과 관련된 운동 능력이 관련된 경우에, 기능적 결손을 측정 행동 시험으로 평가된다. 외상성 뇌 손상 또는 피질의 감각 앞다리 영역 허혈성 손상, 행동 시험에 의해 증명 될 수있다. 하나의 그러한 테스트는, 실린더 테스트는 앞다리 1 작용 성 활성을 평가하기위한 결손 래트에서 광범위하게 사용된다. 이 테스트는 투명 상단 만 실린더, 카메라와 테이블을 필요로하는 낮은 셋업 비용이 있습니다. 그것은이 설치류의 자연 탐구 행동을 기반으로 관리하기 쉽고, 그래서 사전 교육 및 음식 부족 또는 보상은 필요하지 않습니다. 이러한 많은 장점에도 불구하고, 실린더 시험은 앞다리 s의 초점 부상 다음 쥐에서 앞다리 적자를 평가하기 위해 아래-활용우리가 실린더 시험에서 마우스 동작의 분석 특성 피질, ensorimotor. 앞다리 비대칭 실린더 시험 분석의 고전 척도이다. 실린더에 배치하는 경우, 설치류 자연스럽게 자신의 뒷다리에 양육 및 자세 균형에 대한 자신의 앞다리의 발과 실린더 벽을 터치하여 실린더의 벽을 탐구한다. 각 앞다리와 벽 발 접촉의 수는 쉽게 실린더의 탐사 기간 동안 설치류 촬영에 의해 정량화된다. 영향을받는 앞다리 발은 영향을받지 앞다리 발보다 벽 적....
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프로토콜
윤리 문 : 모든 실험 동물 관리에 캐나다위원회의 지침에 따라 뉴 펀들 랜드의 동물 관리 윤리위원회의 기념 대학에 의해 승인되었습니다.
1. 마우스
- 성인 마우스를 사용합니다. 이 연구에서, 성인 남성 FVBN 마우스 (N = 10) 사이 2-4개월 사용 하였다. 12시 12분 시간에 집 마우스는 명암 사이클을 역 및 표준 설치류 식사 및 임의 량의 물을 제공한다.
실린더 테스트에 필요한 2. 재료
- 실린더 테스트를 촬영하는 투명 상단에 표를 얻습니다. 테이블의 크기는 상단 플렉시 글라스 또는 유리이어야하며, 테이블 아래에 거울을 배치 할 수있는 충분한 공간이 있어야 무관하다. 마우스가 아래에 녹화되게한다. 실린더를 통해 이미지를 반영하기 위해 테이블 아래에 거울을 사용합니다. 가능한 경우 다른 방법으로, 거꾸로 카메라를 사용합니다. 이 프로토콜에서 사용되는 테이블의 사이즈는 54 X 56 X 66.5cm 51 X 51cm 상단 (WXL)와 (wxlxh).
- 거울을 얻습니다. 이 프로토콜에서 사용되는 미러의 크기는 34 X 58cm (WXL)이다.
- 마우스에서 수행하기위한 투명 / 플렉시 글라스 실린더를 얻습니다.이 프로토콜에 ....
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결과
우리는 이전에 그 발 드래그 동작은 앞다리의 감각 피질에 초점 허혈 손상에 따라 표시 및 손상 (4)의 긍정적 인 지표가 증명하고있다. 앞다리의 감각 피질에 ET-1의 인트라 대뇌 피질의 주사는 허혈성 병변 (도 8a, B)를 유도하기 위해 사용되었다. 잠재적 사용 기능 회복을 평가하기 위해 발 드래그 동작이 이상 십사일 후 부상 연장 여부를이 연구는 조사 하였다. 마우스는 이전에 예비 수술 시점에 대한 ET-1 주사, 및 일 1, 3, 7, 14, 21 및 28 일 후 부상에 날 실린더 시험에서 시험 하였다. 각각의 시점에서, 발 터치와 발, 드래그의 수는 모두 영향을받는 영향을받지 발에 대한 정량화 하였다. 발 접촉의 수에 양방향 반복 측정 분산 분석은 상당한 주요 시간의 효과 [F (6,108) = 3.59, P = 0.0028]과 대상 [F (18,108) = 2.38, P = 0.0032]하지만 치료의 효과 없음을 밝혀(표 1). 반면,.......
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토론
다음은 실린더 시험에서 발 드래그 동작을 정량화 할 때 요점 설정 : I)의 수 정량 기준을 설정하기 위해 뇌 손상 전에 각 발에 대한 총 발 접촉 대 발을-드래그; ⅱ) 허혈 손상 다음 각 발에 대한 총 발 접촉 대 발-, 드래그의 수를 정량화; 및 ⅲ) 발 드래그하고 마우스의 몸통의 측면 회전시 실린더 벽을 따라 발의 측면 움직임을 구별.
발 드래그은 앞다리의 감각 피질에 손상 후 나타나는 새로운 동작입니다. 발 - 드래그 동작의 외관 그러므로 앞다리 감각 피질 손상된 포지티브 지표로 사용될 수있다. 대표적인 결과가 보여 그 작은 ET-1 경색 약 2-4 볼륨 MM 3 발 드래그 동작의 앞다리의 감각 피질 결과에 지역화. 이 ASYM 앞다리 대조적이다ET-1 허혈성 대뇌 피질의 손상 4-6 다음 전체 터치에 비해 영향을받는 발 접촉의 비율에 일관성 적자를 감지하는 데 실패 metry 분석. 발 - 드래그 동작 분석 따라서 앞다리의 감.......
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공개 사항
저자는 더 경쟁 재정적 이해 관계가 없습니다.
감사의 글
우리는 사진 및 비디오 그래피와 기술적 전문 지식과 지원 씨 존 크로 웰 씨 테리 Upshall 감사합니다. 이 작품은 뇌졸중 복구 촉매 보조금 건강 연구의 캐나다 연구소와 뉴 펀들 랜드의 연구 및 개발 공사와 심장과 캐나다 캐나다 파트너십의 스트로크 재단 JLV에 보조금을 운영에 의해 지원되었다. RBR은 키스 그리피스 기념 심장 및 뇌졸중 재단 대학원 장학금받는 사람이었다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 플렉시 유리 실린더 | 높이 17.5cm, 외경 9.5cm, 내경 8.8cm, 벽 두께 0.35cm(또는 3.5mm) | ||
| 보기 테이블 | 54x56x66.5cm(너비 x 길이 x 높이), 테이블 상단은 51x51cm 플렉시 유리 시트입니다. | ||
| 미러 | 34x58 cm 미러 | ||
| 비디오 카메라 | Sony | DCR-SR42 | 온보드 스토리지, SD 기능, 40x 광학 줌 |
| 컴퓨터 | 포함 Dell | Optiplex 760 | 프로세서: Intel, 3.0 GHz, 메모리 4.00GB (RAM) |
| 컴퓨터 모니터 | Samsung | S22C350H | |
| Excel (Microsoft Office Professional Plus) | Microsoft | v14.0.7106.5003 | |
| VLC 미디어 플레이어 | 비디오 LAN | v2.1.2 | 재생 속도 변조 및 비디오 지원 미디어 플레이어 |
| 외장 하드 드라이브 | Western Digital | WDBAAU0020HBK-01 | 2TB |
참고문헌
- Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury. Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).
- Kolb, B., et al.
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재인쇄 및 허가
