피부 마이크로 이식 세대를위한 새로운 세분화 방법 후 조직 특성

Summary

새로운 프로토콜에있어서 인간의 조직들을 분해하고, 콜라겐 스폰지와 함께, 피부 병변의 치료에 사용할 준비 인간 생체 복합체를 야기 미세자가 이식편을 만들 설명. 또한,이 시스템은 기계적 세분화 한 후 다른 시간에 마이크로 이식편의 세포 생존율을 유지.

Abstract

몇 가지의 새로운 방법은 급성 및 만성 피부 병변 한 단계 치료를 제공하기 위해 수술 중자가 세포 현탁액을 수득 생명 공학 분야에서 개발되어왔다. 또한, 외상, 당뇨병, 감염증 및 기타 원인으로 인한 만성하지만 급성 상처 관리 도전 남아있다. 이 연구에서 우리는 하나 환자의 피부 조직과 임상 응용 프로그램에서자가 마이크로 이식을 만들 수있는 새로운 방법을 설명합니다. 또한, 피부, 디 epidermized 진피 (DED) 및 다기관 및 / 또는 다중 조직 공여자로부터 유래 된 진피의 피부 조직의 시험 관내 생물학적 특성화 또한 수행 하였다. 모든 조직은 우리가 가능한 마이크로 이식편을 수득 할 수 있도록, 새로운 프로토콜 세분화 하였다. 특히,이 혁신적인 프로토콜 피부 환부에 도포 될 준비자가 이식 및 마이크로 콜라겐 스폰지로 이루어지는 바이오 복합체를 만들 수 있음을보고 하였다. clini다리 병변자가 생체 복합체 학적 애플리케이션은 재 epitalization 처리 및 병변의 부드러움 모두 향상을 보여주는보고되었다. 또한, 우리의 체외 모델은이 시스템을 기계적 세분화 한 후 세포 생존 능력은 문화의 최대 7 일의 시간 동안 유지되는 것으로 나타났다. 또한 세분화로부터 얻은 세포의 풀이 높은 재생 잠재력, 조직 재생 및 복구 과정에서 중요한 역할을 발휘하는 중간 엽 줄기 세포를 포함한 여러 세포 유형으로 구성되어, 유동 세포 계측법 분석으로 관찰 하였다. 마지막으로, 우리는 한천 요리를 배양 할 때이 절차는 마이크로 이식의 불임을 유지 체외에서 보여 주었다. 요약하면, 우리는 의사가 가능한 멸균 일반적인 생물학적 scaffo으로 단독으로 또는 조합하여 적용 할 수있는 마이크로 - 도관을 사용하여 하나의 준비 단계에서 획득하는 새로운 재생 방식은 유망한 수단이 될 수 있다는 결론LDS.

Introduction

지난 몇 년 동안, 몇몇 새로운 방법은 급성 및 만성 피부 병변 원스텝 치료를 제공하기 위해 수술 중자가 세포 현탁액을 수득 생명 공학 분야에서 개발되어왔다. 또한, 외상, 당뇨병, 감염증 및 기타 원인으로 인한 급성하지만 주로 만성 상처 관리 도전 남아있다. 만성 상처 의료 시스템 전 세계적으로 ¹ 막대한 재정 부담의 원인이 심각한 글로벌 건강 문제가 될 것을 장착 증거가있다.

피부 병변의 치료 성공률을 높이기 위해 (셀룰러 인핸스 포함) 광범위한 조작이없는 무균 상태의 유지는 즉시의 손상된 영역에 도포 될 수있다 세포 현탁액을 생성하기 위해 필수적인 환자함으로써 이러한 세포 공장으로 클린 룸에서 더 이상 처리를 피하는. 성작은 피부 생검, 연삭, 원심 분리 등의 분리 방법 (예를 들어, 효소 또는 기계)로부터 arting 자주 성장 배지에서 배양 될 수있는 세포 현탁액을 얻기 위해 사용된다. 이들 모든 방법은 일반적으로 셀 구조를 강조하고, 세포 생존율의 감소를 초래 실행 시간이 필요하다. 또 다른 중요한 양태는 손상된 부분을 복구하는, 예를 들어, 임상의에 의해 사용될 준비자가 세포 현탁액을 수득한다. 또한, 잘자가 ​​조직 이식은 결국 유도와 전도....

Protocol

윤리 문 : 프로토콜의 임상 응용 프로그램이 환자의 피부자가 조직의 사용을 필요로하기 때문에, 시험 관내에서의 특성은 수확, 처리에 국가 규정의 지침에 따라 에밀리아 로마 냐 지역 스킨 은행에서 동종 피부 조직에 임상 적으로 사용되기 전에 수행 된 및 이식을위한 조직 (2013 CNT)를 배포.

임상 응용 프로그램 1. 바이오 복합 건물

주 :이 프로토콜은 임상 Rigeneracons (조직 장애 물질) 및 Rigenera 머신 (티슈 교란 시스템) (도 1A)의 사용에 기초한다. 조직 장애 물질은 약 50 미크론의 컷오프 육각형 블레이드 및 필터링 세포의 세포 외 기질 성분에 의해 제공되는 격자를 사용하여 조직의 작은 조각을 방해 할 인체 조직의 생물 의학적 장애 물질이다.

1. BI를 통해 환자의 skinsamples를 수집opsy 펀치 (도 1b) 및 미세자가 이식 ^6,7,9을 얻기 위해 각각의 조각에 대한 생리 식염수 1 ㎖를 첨가들을 분해 (또는 단계 2.1 참조).
2. 콜라겐 스폰지에 마이크로 이식 1 ㎖를 놓습니다 (그림 1C)

Results

이 예비 연구에서, 제 목표 사용할 준비 바이오 복합체를 제조하는 콜라겐과 같은 생물학적 지원과 함께 인간자가 미세 이식의 능력을 조사 하였다. 이러한 바이오 복합체는 환자에 이식했다 자동차 사고 (도 2A)에 의한 다리 병변 30 일 (도 2b) 후 조직 복구와 관련된 완전한 재 상피화 관찰되었다. 또한, 임상 후속 임상 응용에 평행. 5개월 (도 2C) 후에 손상된 영역 좋은 감촉과 유연성을 보여 관내 연구는 또한 피부 조직으로 다른 피부 조직의 세포 생존율을 평가하기 위해 수행했다 , DED 및 진피 전에이 시스템에 의해 세분화 한 후. 특히, 각각의 조직 유형의 계정에 서로 다른 두께를 가지고, 여덟 임계피부 조직, 진피 DED위한 단일 단계로 처리 될 수있는 네.......

Discussion

이 예비 연구. 이미 마이크로 이식 임플란트 ^(9)의 효과 ^(10)를 최적화하는 다른 임상 적 적용에보고 된이 프로토콜에 의해 얻어진 마이크로 이식은 콜라겐 스폰지와 결합 될 수 있다는 것을 보여 주었다 특히, 본 연구는 생체의 용량을보고 -complexes, 임상 응용 프로그램에서 30 일 후에 다리 병변의 상처 치유를 보조하기 위해, 마이크로 이식 및 콜라겐 스폰지로 구성. 또한, 체외 결과는 즉시 기계 세분화 후 24 시간과 문화의 7 일 후 모두 상당한 세포 생존 능력을 유지, 세 가지 다른 피부 조직을 해리하는이 프로토콜의 효과에 대한 증거를 제공합니다.

균질화 이런 종류의 후 세포 생존 능력의 유지 보수는 광범위한 조작을 방지 단 하나의 단계 멸균자가 미세 이식에서 얻을 수 있습니다. 이 증거는 일치한다다른 최근의 서류와 함께하는 체외에서이 프로.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Rigenera 기계	인간 뇌파	79210R
Rigeneracons	인간 뇌파	79450S
MTT	Roche Diagnostic GmbH	11465007001
RPMI 매체	PBI International	733-2292
DMEM 매체	PBI International	F 0415
항생제	생물학 산업 PBI	03-038-1
FACS 분석을 위한 항체	경우 eBiosciences	코드 12-1469; CD34-APC의 경우 코드 17-0349
컬럼비아 한천	BioMerieux Company	43041
Condress®	Abiogen Pharma		콜라겐 스폰지는 바이오 복합체
DMSO 에 사용됩니다.	Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL
NaCl 솔루션	Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany
Xylene	카를로 에르바