여기에서는 자포동물(cnidarian anthozoan) 모델인 Starlet Sea Anemone Nematostella vectensis에서 재생을 유도하고 모니터링하는 방법을 보여줍니다. 형태학적 병기 결정 시스템을 사용하여 재생을 절단하고 분류하는 방법을 보여주며, 이 시스템을 사용하여 폴립 구조 재생에서 자가포식에 대한 요구 사항을 밝힙니다.
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방법 논문
여기에서는 자포동물(cnidarian anthozoan) 모델인 Starlet Sea Anemone Nematostella vectensis에서 재생을 유도하고 모니터링하는 방법을 보여줍니다. 형태학적 병기 결정 시스템을 사용하여 재생을 절단하고 분류하는 방법을 보여주며, 이 시스템을 사용하여 폴립 구조 재생에서 자가포식에 대한 요구 사항을 밝힙니다.
자포 동물, 특히 히드라가 손상되거나 절단 구조 및 참으로 틀림없이 250 개 이상의 년 전 Trembley의 작품을 통해 현대 생물학의 질문을 출시 이러한 연구를 다시 생성하는 것으로 첫 번째 동물했다. 현재 재생의 연구는 스폰지에서 포유 동물을 통해 같은 히드라, planaria 및 Urodeles 등 모두 "고전적인"재생 생물을 이용하여 부활뿐만 아니라, 후생 동물의 범위에 걸쳐 종의 확대 스펙트럼을 볼 수있다. 생물학적 현상과 같은 고유의 관심 외에도, 재생이 종의 다양한 작동 방식을 이해하는 재생 과정이 일반적인 기능 및 / 또는 종 또는 상황에 특정 세포 및 분자 메커니즘을 공유하는지 여부에 대한 정보를 통보하는 것입니다. 작은 별의 말미는 Nematostella의 vectensis는 재생을위한 신흥 모델 생물이다. 히드라처럼, Nematostella하지만 t에서, 고대 문, 자포 동물의 구성원 인그는 클래스 산호충 강, 진화 적으로 더 기초 인 히드로 충에 자매 계통 군. Nematostella에서 재생의 따라서 측면을 비교하고 히드라 등 자포 동물의 것과 대조 흥미로운 일이 될 것이다. 이 글에서, 우리는 이등분 관찰하고 physa 호출되는 Nematostella 성인의 반구 끝의 재생을 분류하는 방법을 제시한다. physa 자연스럽게 무성 생식의 수단으로 분열을 거쳐, 자연 분열 또는 physa 수동 절단 중 하나는 복잡한 형태학의 재 성장과 개혁을 트리거합니다. 여기서 우리는 Nematostella 재생 준비 시스템합니다 (NRSS)에 다음의 간단한 형태 학적 변화를 성문화했다. 우리는 클로로퀸의 효과, 리소좀 기능 블록의 자식 작용의 억제제를 테스트 할 NRSS를 사용합니다. 결과는 자식 작용이 억제 될 때 용종 구조, 특히 장간막의 재생이 비정상이라고 나타낸다.
하나의 히드라의 재생의 관찰 실험 과학 1, 2 등 생물학의 출현에 정액 사건이었다. 재생은 생물학에 매우 폭 넓은 매력의 현상 유지와 비슷하게 사람을 누워. 인간의 재생에 한계를 이해하고 극복하기 위해 발달 생물 학자, 의사, 의학자 및 조직 엔지니어를위한 잠재력은 더 본질적으로 재미보다 재생 생물학을합니다.
이제, 이러한 게놈 시퀀싱 및 이득 및 기능 도구의 손실과 같은 새로운 기술의 사용으로, 필드가 떨어져 재생 메커니즘을 애타게 태세 궁극적으로 재생하는 방법을 다양한 종 이해할 수있는 동안 다른 사람은 할 수 없습니다. 분자 세포 및 형태 학적 반응에 공통성의 정도는 밝혀지지 남아 있지만 지금까지 그것을 다시 생성 할 수 있습니다 동물 중 기본 응답이 있었다 imagi있는 것보다 더 유사하다는 것을 나타납니다NED 만 10 년 전 3.
특히 자포 동물은 형태 학적 다양성의 폭 넓은 스펙트럼 속에서 거의 모든 신체 부위의 재생에서 손쉬운 있습니다. 고독한 신선한 물 용종에서 히드라는 포르투갈 사람-O-전쟁과 같은 복잡한 식민지 siphonophores에, 거대한 산호초를 구축 작은 해양 폴립과 함께, 재생을위한 메커니즘 이외에,....
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온도, 영양과 빛 / 어둠의 사이클에 대한 동물의 1. 컨디셔닝
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절단 된 physa에서 재생하는 동안 형태 학적 이벤트의 진행은 각 NRSS 단계에서 physa의 대표적인 전망을 포함 그림 1A에 표시됩니다. 전형적인 physa 컷 사이트는 성인 (화살촉)에 표시됩니다. 그림 1A의 사진은 완전히 형성 용종을 통해 갓 잘라 physa에서 구강 및 신체 구조의 점진적 재생을 보여줍니다. 도 1b는 각각 4 단계 및 5 단계에서의 내부 격벽의 장간막의 구성을 표시 하였다. 4 단계에서 일부 장간막은 "주름"을 부족하지만, 대부분은 주름을 개발해야 5 단계로 자격을합니다. 그림 1D는 집게 (그림 1E)를 제거 할 수 있습니다 점액의 막에 싸여 physa을 보여줍니다. (가 부당 동물 트랩 않는) 재생 통상 무해은 멤브레인 physa를 기록하고 방해 할 수 .......
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상처 치유 및 재생의 모델로 Nematostella의 사용은 점점 더 인기를 끌고있다. 따라서,이 할당과 비교 될 수 효과적인 세포 및 분자 분석 전에 특정 프로토콜의 형태 패턴을 가시화 할 수있는 것이 중요하다. 삶의 포스트 플랜 울라 단계에서, 거의 모든 위치에서 절단 누락 된 구조를 개혁 할 수있는, 재생 "유연성"의 높은 수준을 Nematostella. 따라서, 여러 연구자들은 다른 연령대에, 재생 절단으로 인한 또는 폴립의 다른 지역에서 부상을 조사하고 7-18 크기했다.
여기에 설명 된 준비 시스템은 생식 조직을 부족 해부학 전체 청소년 용종에 성인의 반구 끝에서 절단 physa의 형태 학적으로 균일 한 섹션의 변화를, (이 재생 청소년들이 성적 m가 될 때 우리는 아직 결정하지 않은 다음ature). 이 접근법은 최대 근처 복잡 하나 조직 간단한 퇴화로부터 재생을 조사한다. 최소 그룹 크기가 잠.......
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저자는 공개할 것이 없습니다.
이 작품은 GHT에 뉴욕 줄기 세포 과학 (NYSTEM C028107) 그랜트에 의해 지원되었다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Nematostella vectensis, 성인 | 해양 생물학 연구소 (MBL) | 비영리 공급업체 | |
| 유리 배양 접시, 250 mL | Carolina 생물학적 공급 | 741004 | 250 mL |
| 유리 배양 접시, 1,500 mL | Carolina 생물학적 공급 | 741006 | 1,500 mL |
| 폴리에틸렌 전사 피펫, 5 mL | USA 사이언티픽 | 1022-2500 | 좁은 구멍, 눈금이 매겨진 |
| 폴리에틸렌 전사 피펫, 테이퍼형 | Samco | 202-205 | 넓은 구멍을 만들기 위해 팁 1인치를 잘라냅니다 |
| 일회용 메스 | 깃털 안전 면도기 Co. Ltd | 번호 10 | 블레이드는 곡선이어야 합니다 |
| .#5 Dumont 파인 포인트 핀셋 | Roboz | RS5045 | 대체 공급업체 사용 가능 |
| Pyrex Petri 접시, 직경 100mm | Corning | 3160 | 다른 유리 페트리 플레이트를 대체할 수 있습니다 |
| . 멸균 6-웰 플레이트 | Corning Falcon | 다른 제조사의 353046 또는 유사한 | |
| 균 12-웰 플레이트 | Nunc | 다른 제조업체의 150628 또는 유사 | |
| 멸균 24웰 플레이트 | Cellstar, Greiner bio-one | 662-160 | 또는 다른 제조업체의 |
| 유사 염수 새우 hathery 키트 | San Francisco Bay; drsfostersmith.com | CD-154005 | 소금물 새우 재배 옵션 |
| 식료품점에서 | 파이렉스 베이킹 접시 | 소금물 새우 | |
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| 폴리프로필렌 Carboy Carolina | Biological Supply | 716391 | ASW @ 12 ppt 비커의 작업 재고 |
| , 졸업, 4,000 mL | PhytoTechnology Laboratories | B199 | 36 ppt ASW를 12 ppt로 희석하기 위해 |
| 실체현미경 및 광원 | 다양한 | 연속 1 - 40X 배율 |
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