측면 만성 두개골 창 준비 활성화 생체 마우스의 말초 중간 대뇌 동맥 폐색에 따라 관측

요약

말단 중간 대뇌 동맥 분기 (MCAO)의 수술 폐색 실험 뇌졸중 연구에서 자주 사용하는 모델입니다. 이 논문은 마우스에서 생체 내에 길이 현미경을위한 기회를 제공하는 측의 두개 창에 삽입, 결합 영구 MCAO의 기본적인 기술을 설명한다.

초록

초점 대뇌 허혈 (즉, 허혈성 뇌졸중)은 신경 기능의 심각한 손실을 결과적으로 모터 및인지 장애의 호스트로 이어지는 주요 뇌 손상의 원인이 될 수 있습니다. 스트로크 ¹ 전 세계적으로 장기 장애와 사망의 주요 원인 중 하나입니다으로 높은 유병률은, 심각한 건강 부담을 포즈. 신경 기능의 회복은, 대부분의 경우, 단지 부분이다. 지금까지 치료 옵션은 매우 인해 혈전 용해 ^2,3의 좁은 시간 창에 특히 제한됩니다. 뇌졸중에서 회복을 가속화하는 방법을 결정하는 주요 의료 목표 남아있다; 그러나, 이는 복구 프로세스에 충분한 기계적 통계에 의해 방해되어왔다. 실험 행정 연구원은 자주 국소 뇌허혈의 설치류 모델을 사용한다. 급성기를 넘어, 뇌졸중 연구는 점점 뇌허혈 다음 서브 급성 및 만성 단계에 초점을 맞추고 있습니다. 대부분의 행정 연구원이 적용 영구 또는 트란마우스 또는 쥐의 MCA의 지어서 transient 폐색. 환자에서 MCA 폐색의 허혈성 뇌졸중 ^(4)의 가장 흔한 원인들이다. 필라멘트 모델을 사용하여, MCA 폐색의 근위 외에 원위 MCA 폐색 수술 실험 스트로크 연구 ^5에서 가장 자주 사용되는 모델은 아마도. MCA 분기합니다 (lenticulo - 선조체 동맥의 분지에) 원위의 폐색은 일반적으로 선조체 여분 주로 신피질에 영향을 미친다. 혈관 폐색은 영구적 또는 일시적 일 수있다. 장기적인 결과에 대해 병소 용적과 매우 낮은 사망률의 재현성이 모델의 주요 이점이다. 여기, 우리는 시상 동에 만성 두개골 창 (CW) 준비 측면을 수행하고, 이후에 어떻게 개두술 방법을 사용하여 창 아래에 말단 행정을 유도 외과 적 방법을 보여줍니다. 이러한 접근법을 통해 허혈성 급성 및 만성 변화 순차 촬상 적용될 수있다, 공 초점 레이저 스캐닝 및 이광자 현미경 생체 내에 에피 - 조명.

서론

뇌졸중은 전 세계적으로 장기 장애 및 사망의 주요 원인 중 하나이며¹ 관상 동맥 심장 질환에 이어 두 번째입니다. 또한 뇌졸중은 장기 장애의 주요 원인이며, 이는 뇌졸중이 엄청난 사회경제적 영향을 미친다는 점을 강조한다^6-8. 급성 치료를 넘어 뇌졸중 후 회복을 가속화하고 향상시키기 위한 새로운 접근법과 메커니즘을 연구하는 것이 여전히 주요 의학적 목표이다⁷.

지난 수십 년 동안 뇌졸중 실험 연구의 데이터는 허혈에 의해 유발되는 복잡한 병태생리학적 연쇄 반응을 이해하는 데 크게 기여했습니다^9,10. 발치 독성(Excitotoxicity), 세포사멸(apoptosis), 경색 주위 탈분극(peri-infarct depolarization) 및 염증(inflammation)은 국소 뇌허혈 후 세포 사멸의 가장 관련성이 높은 매개체로 확인되었습니다. 또한, 뇌허혈의 동물 모델을 사용하여 중요한 개념, 진단 방식 및 치료 접근법이 개발되고 검증되었습니다(예: "반음" 및 혈전용해술)¹¹.

비침습적 영상 기법(예: 자기공명영상(MRI), 컴퓨터 단층 촬영 또는 레이저 스페....

프로토콜

윤리 선언문 : 동물 과목을 포함하는 실험은 적용 가능한 Landesamt FUER 아퍼 싶게 Soziales, 베를린, 독일 (G0298 / 13) 및 도착 도착 기준에 명시된 지침과 규정에 따라 수행되었다. 12 주령의 수컷 C57BL / 6J 마우스에 대한 연구, 10을 사용 하였다.

1. 측면 만성 두개골 창 준비

1. 케타민 (90 ㎎ / ㎏)과 자일 라진 (/ kg 10 mg)의 피하 주사로 마취를 수행합니다. 통증 자극에 적절한 진정 작용에 대한 시험.
2. 70 % 에탄올로 수술 도구와 수술 부위를 소독.
3. 설치류 면도기를 사용하여 눈에 목 두피 머리를 제거합니다.
4. 정위 프레임에 머리를 고정합니다.
5. 탈수를 방지하기 위해 두 눈에 dexpanthenol 눈 연고를 사용합니다.
6. 모든 머리카락을 제거하고 74.1 %의 에탄올의 3 층과 10 % 2 프로프라놀롤로 소독 할 수있는 외과 영역을 청소합니다.
7. 중간 선을 수행합니다메스를 사용하여 눈 목 절개.
8. 4 텐팅 (tenting) 봉합으로 피부 플랩에 걸쳐.
9. 시간적 근육이 시작되는 지점에 메스를 긁어하여 왼쪽 반구에 조심스럽게 골막을 ....

결과

타임 라인 대표적인 결과는도 2 및도 3에 도시되어있다. 우수한 시상 동 (도 2 B, C, D) 숙련 된 의사에 의해 수행되는 매우 낮은 사망률과 질병률 레이트 결과 작은 두개 창 폭과 뇌 창 제제. 10 동물 모두 생존, 모든 만성 CW도 이십팔일 수술 후 고품질의 화상을 위해 사용될 수있다. 상처 감염 또는 다른 합병증 문제는 없었다.

때문에 휘발성 마취 만 작은 뇌 손상, 약 10 짧은 노출 - (15) 원위 MCAO 후 분, 가열 복구 케이지로 전송, 모든 동물은 자유롭게 복구 케이지 이동하고, 한배 새끼와 상호 작용, 깨어 있었다. 일반적으로, 말단 MCAO 모델의 치사율은 5 % 이하이며, 주로 혈관 I의 결과로서 발생njury 및 MCAO 수술시 이후의 출.......

토론

스트로크 ¹ 전 세계적으로 장기 장애와 사망의 주요 원인 중 하나입니다. 급성 치료, 가속 및 뇌졸중 후 회복을 향상시키기 위해 새로운 접근 방식과 메커니즘을 조사 외에도 주요 의료 목표 ⁷ 남아있다. 실험 행정 연구원은 자주 국소 뇌허혈의 설치류 모델을 사용한다. 사실, 일시적 또는 영구적 유도 MCAO 모델은 환자 ⁴ 국소 뇌허혈의 가장 흔한 유형 중 하나를 모방. MCA 폐색의 근위 외에 원위 MCAO 수술 폐색 필라멘트 모델 실험 스트로크 연구 ^5,19에서 가장 자주 사용되는 모델은 아마도. 여기서는 영구 원위 MCAO의 기본 기술은 마우스에서 생체 내에 길이 현미경을위한 기회를 제공하고, 횡 CW와 함께 설명한다. 장기 연구 결과에 대하여 특히 병변 부피의 재현성뿐만 아니라 매우 낮은 사망률 아칸소이 쥐 모델의 주요 장점을 전자. 이 피질 뇌졸중 모델에서, 스트로크 영역 경색 주변 영역에서 혈관 만성 CW를 통해 가시화 될 수있다. 다중 표.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
양안 수술 현미경	Zeiss	Stemi 2000 C
현미경 용 광원	Zeiss	CL 6000 LED
직장 프로브가있는 가열 패드	FST	21061-10
정위 프레임	Kopf	모델 930
이소 플루란 용 Anaethesia 시스템	Draeger
Isoflurane	Abott
Dumont 펜치 #5	FST	11251-10
Dumont 펜치 #7	FST	11271-30
바이폴라 펜치	에르베	20195-501
바이폴라 펜치	에르베                                                          20195-022
마이크로드릴	FST                                                          18000-17년
바늘 홀더	FST	12010-14
5-0 실크 봉합	Feuerstein, Suprama
7-0 실크 봉합	Feuerstein, Suprama
8-0 실크 봉합사	Feuerstein, Suprama
수의학 회복 챔버	Peco Services	V1200

사 사