쥐 심근허혈/재관류 수술 중 폐색 합자의 올바른 배치는 일반적으로 심근 창백의 육안 관찰에 의해 확인됩니다. 본 명세서에서는 관찰된 심근 창백함을 보충하기 위해 허혈 및 재관류를 심전도로 확인하는 방법이 수컷 C57Bl/6 마우스에서 입증되었습니다.
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쥐 심근허혈/재관류 수술 중 폐색 합자의 올바른 배치는 일반적으로 심근 창백의 육안 관찰에 의해 확인됩니다. 본 명세서에서는 관찰된 심근 창백함을 보충하기 위해 허혈 및 재관류를 심전도로 확인하는 방법이 수컷 C57Bl/6 마우스에서 입증되었습니다.
전 세계적으로 사망 원인 1위인 심근 리모델링 및 심부전 연구를 위해 많은 동물 모델이 확립되었습니다. 인간의 경우 관상동맥에 병리학적 폐색이 형성되며 폐쇄된 동맥의 재관류는 위험에 처한 심근의 생존력을 유지하는 데 필수적인 것으로 간주됩니다. 심근 회복에 필수적이지만, 허혈성 심근의 재관류는 그 자체로 조직 손상을 일으킵니다. 허혈/재관류 손상의 생리학적 반응과 치유는 만성 폐색 손상과 다릅니다. 심근 허혈/재관류 손상은 심근 경색 연구를 위한 임상적으로 관련된 모델로 인식되고 있습니다. 이러한 이유로 허혈/재관류의 병렬 동물 모델은 심근 손상에 관한 지식 기반을 발전시키는 데 필수적입니다. 일반적으로 좌측 전방 하강(LAD) 관상동맥 폐색 후 마우스 심장의 허혈은 폐색(결찰) 아래 심근의 가시적인 창백함에 의해 확인됩니다. 그러나 이는 서로 다른 심근 부위에 창백함을 유발할 수 있는 여러 주요 동맥이 있기 때문에 정확하거나 일관된 결찰 배치를 확인하는 주관적인 방법일 뿐입니다. 관찰된 심근 창백함을 보완하기 위해 올바른 결찰 배치와 그에 따른 허혈 및 재관류를 평가하기 위해 심전도 변화를 기록하는 방법은 마우스 모델에서 일관된 경색 크기를 산출하는 데 도움이 될 것입니다. 결과적으로 이것은 사용되는 마우스의 수를 줄이는 데 도움이 될 것입니다. 또한 심전도 변화는 수술 후 시간 의존적 방식으로 비침습적으로 계속 기록될 수 있습니다. 이 기사에서는 심근 허혈과 재관류를 실시간으로 심전도로 확인하는 방법을 보여줍니다.
심장 질환은 사망 전 세계적으로 1, 2의 주요 원인 남아있다. 뿐만 아니라,이 공통 심근 손상 부위 심근 경색 4 전신 3 심장에서 혈액을 펌핑 할 책임이 좌심실 (LV) 가장 근육 챔버이다. 좌심실 조직 죽음은 종종 수축기 심부전 발생합니다. 심장 질환의 동물 모델은 의치 심혈관 연구의 발전을위한 필수적이다. 마우스의 C57BL / 6 변형으로 인해 자신의 빠른 번식 시간, 저렴한 비용으로 동물 모델에 대한 인기가 선택되어 유전자 변형 완화했다. 심장 질환에 대한 연구를위한 대부분 외과 뮤린 모델은 왼쪽 관상 동맥 LAD 분기의 폐색을 포함한다. 젊은이는 왼쪽 둔각 한계 5,6라고도합니다. 젊은이는 좌심실 전방 및 안테 - 측면 벽에 혈액을 공급한다. LAD 폐색 연구는 때때로, 전방 경색을 유도 INT 확장을 목표로하고 있습니다하부 및 측면 벽 영역 (7) 오.
심근 경색의 연구에 자주 사용되는 두 모델은 만성 폐색 심근 경색과 심근 허혈 / 재관류 손상을 포함한다. 만성 폐색은 수술 주위 봉합 영구적으로 LAD 통해 혈액의 흐름을 차단하여 작성됩니다. 허혈 / 재관류 손상은 단지 일시적으로 일반적으로 30 ~ 60 분, 허혈성 기간을 같은 방법으로 많이 생성된다. 일과성 허혈을 달성하기 위해, 재관류 기간 뒤에 심장의 외막 표면에 LAD에 평행하게 배치되는 LAD 주위 흡장 봉합 관계 작은 PE-10 튜브, 호스 및 흡장 봉합사를 제거하고, 혈액이고 다시 동맥 통해 심근 내로 유동시켰다. 허혈 / 재관류 수술 인해 PROM 포함 인간 경색의 치료 평행 재관류 손상의 특성으로 임상 적으로 관련된 것으로 간주 한PT 관상 혈관 성형술 및 스텐트 삽입술 동맥, 관상 동맥 우회술. 일반적으로 이러한 수술하는 동안 마우스 마음에 LV의 허혈은 심근 벽의 볼 창백에 의해 확인된다. 그러나, 단순히 일정한 모니터링 조건으로 심전도 (ECG) 패드에서 수술을 수행하여, 볼 변화시켜 마우스 심근 허혈 및 재관류를 확인한 상기 ECG 파형을 관찰 할 수있다.
쥐의 심장이 네 챔버 구조를 포함 여러면에서 인간의 마음과 유사하지만, 마음도 차이가 있습니다. 성인 인간의 반면 분 (BPM) 당 700 비트입니다 ~ 60 ~ 100 BPM의 8,9 - 하나의 분명한 차이점은 성인 쥐의 평균 휴식 심박수는 600입니다. 또한, 마우스의 재분극 파도, J T는, 종종 탈분극의 QRS 복합체 (10)를 식별 할 명확한 ST 분절 어렵게으로 병합합니다. electrocardiographicall 과정을 복잡y는 그것이 T 파 인간에서 허혈 및 심근 경색 부상의 진단 마커로 사용되는 ST 분절의 상승이다, 심근 허혈을 확인, 임상 내가 nfarction 또는 STEMI yocardial ST 전자 levation의 m라고도합니다. 인간과 쥐의 파형의 주요 차이점 중 하나는 S 파가 바로 음의 T 파에 직접 전송하는 J 파 일 다음이다. 급성 심근 허혈 마우스에서 S 파의 진폭이 감소하고 동안 직접 비정상적인 J 파와 역 T 파 (11)에 의해 이어진다. T 개의 파 쥐 (11)의 재분극의 상당 부분을 표현하지 않는 것 같습니다. 인간의 차이 대 용어와 마우스에도 불구하고, 쥐의 심근 허혈 및 재관류의 ECG 확인은 여전히 가능하고 비교적 간단하다. 파형 해석을 단순화하기 위하여, 상기 SJT의 세그먼트는 ST-61000-4-3 구분이라NT를 여기에.
2013 년에 출판 STEMI 가이드 라인 .This은 동맥 때까지 환자의 관상 동맥 폐쇄의 식별에서 시간 프레임 미만 90 분이어야한다 재개되는 것을 의미 미만 90 분 (12)의 환자 도어 - 투 - 풍선 시간을 권장합니다. 박동 심장은 끊임없이 작동하기 때문에, 높은 산화 대사와 산소 소비 3의 높은 수준을 가지고있다. 이 제공하기 위해, 모세 혈관의 네트워크는 각각의 심근 3 사용할 수 있습니다. 그것은 단지 그 산소와 영양 공급을 방출하기 심장 몇 비트를합니다. 90 분 창에서 인간의 허혈성 심장 지역은 심장이 산소가 풍부한 혈액의 가치가 뛰는 5,400 사이 9,000 수신 차단 된 것입니다. 같은 90 분 창에서 마우스는 54,000 63,000에 심장 박동있을 것입니다. 뮤린 허혈 / 재관류 손상에 대한 실험 시간 포인트 (30)와 60 분 사이에 일반적이다.
개발의 중요성쥐 모델에서 심근 허혈 및 재관류를 확인하는 추가 방법을 보내고은 심근 허혈 / 재관류 연구에서 데이터의 일관성과 재현성에 깊은 의미를 가지고있다. 시각적으로 조직 색상의 변화에 대한 마음을 관찰하는 현재의 관행은 독립형 진단으로 적합하지 않습니다. 또한, 튜브의 제거와 봉합 후 재관류은 보장되지 않습니다. 동맥이 더 이상 해제 연결되어 있지만, 동맥이 절차를 수행하는 동안 지속적인 피해가 없을 수 있습니다 및 재관류 불가능 될 수 있습니다. 오히려 심근 및 rubor의 창백함 (붉은 색)의 관찰에 의존하기보다는 재관류를 확인 심전도 변화의 기록을 갖는 것이 유익 할 것이다. 허혈 / 재관류 손상의 마커를 표시하지 않는 하트는 빠르게 신고 할 수 있고, 진행하는 방법에 대한 결정은 연구자들에 의해 제조 될 수있다.
마지막으로, ECG의 기록을 확립하는 일에 걸쳐베이스 라인에서 변경허혈 및 재관류 기간 전자는 연구자가 초기 수술 후 심장을 계속 모니터링 할 수 있습니다. 수술이 완료 될 때 조사자는 현재 즉시 마음의 시력을 잃게됩니다. ECG는 수술 후 일 심근 시간에 발생하는 변화에 대한 통찰력을 얻을 수있는 간단한 방법입니다. 수술이 늦게 개발 Q-파도가 계속 표시 또는 조직의 죽음을 악화 밝힐 수 후 ECG는 시점에서 기록했다. 그러나, 효과적으로 기준 ECG 비교를 위해 사용할 수 있어야합니다, 신규 또는 악화 심전도 마커 게이지합니다.
12주 세 남성 C57BL / 6 마우스 -이 프로토콜은, 준비를 획득, 8을 사용하여 마우스 심장의 허혈 및 재관류를 확인하기 위해 심전도를 해석하는 방법을 보여줍니다.
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동물에서 수행 모든 수술 절차는 관리 및 사용 실험 동물 (13) 또는 기타 적절한 윤리 지침에 대한 가이드에 따라 수행되어야한다. 프로토콜은 진행하기 전에 해당 기관에서 동물 복지위원회의 승인을 받아야한다.
1. ECG 준비
참고 : 시작하기 전에, 장갑, 안경 깨끗한 실험실 코트 또는 일회용 가운을 포함한 개인 보호 장비를 돈.
2. ECG 취득
3. 수술 절차 및 녹화 ECG
ECG를 사용하여 재관류 4. 확인
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정상 쥐의 ECG가 전기 이벤트 P, Q, R, S, J와 T. P에 대한 알파벳 마커로 그림 2에 표시되어 초기 심방 탈분극입니다. QRS는 심실을 통해 탈분극의 물결입니다. J 조기 재분극이며, T는 복구 (11)로 알려진 이종 재분극을 나타냅니다. 많은 실험실은 ST 분절 10,15-17과 SJT 세그먼트를 참조하는 대신 J 파 명칭을 사용하지 않도록주의해야한다. 여기에, 결과 및 분석은 대표 (40) 쥐의 실험 관찰을 기반으로합니다. 대부분의 마우스는 수술 과정에 걸쳐 유사한 파형 진행을 나타냈다. 유사한 파형을 나타내지 않았다 마우스를 추가 분석을 위해 신고하고 비 경색 동물을 고려 하였다. 유사 파형 결과는 종 외. (15)에 의해보고되었다.
쥐...
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심근 허혈 및 재관류를 확인하기위한 추가 방법은 흡장 합자의 정확한 위치를 보장으로 ECG 변화를 사용. 합자 위치의 정확도는 동물들 사이에서 데이터의 변동성을 줄이는 것이 중요합니다. 마우스 마음에 LAD 시각화하기 어려운 동맥이다. 따라서, 심전도 변화를 시각적 창백를 보충하면 합자 및 결과 조직 손상의 정확한 위치를 확인하는 데 도움이됩니다.
심전도 패드 심장의 비 침습적보기를 제공하기 때문에, 다수의 심전도는 연구 기간 동안 얻어 질 수있다. 이 중 및 수술 후 발생하는 심근 변화의 더 나은 이해를 제공 할 수 있습니다. 수술 후의 비교를 위해 사용하는 기준 ECG를 획득하는 것이 중요하다. 나중에 조직 죽음과도 심실 동맥류는 전기 생리 신호와 ECG 구성 변경의 처짐에 의해 관찰 할 수있다. 이 통찰력을 제공 할 수있다심부전의 진행에.
심 초음파 시스템을 이용하여 ECG 측정의 이점은 전 또는 허혈 / 재관류 수술 ...
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저자는 공개할 것이 없습니다.
이 연구는 미국 국립보건원(R15HL129140) 재향군인회 연구개발국(Veterans Affairs Office of Research and Development)의 생물의학 실험실 연구 개발 서비스(Biomedical Laboratory Research and Development Service)의 Merit Review 상(BX002332 및 BX000640상)과 Institutional Research and Improvement 계정의 기금으로 지원되었습니다. 이 프로젝트는 미국 국립보건원(National Institutes of Health)의 보조금 C06RR0306551 부분적으로 지원됩니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Vevo 1100 | Fujifilm Visual Sonics | 초음파 심전도 기계 | |
| 마우스 핸들링 플레이트 | Fujifilm Visual Sonics | 가열 ECG 플레이트 | |
| Signa-Gel | 고전도성 다중 | ||
| 전극 젤 | 파커 | 15-25 | 목적 전해질 |
| Transpore 의료 테이프 | 3M | 1527-0 | |
| PI-Spray II | 제약 혁신 | NDC 36-2013-25 | ECG 플레이트 |
| C57Bl6 마우스 | The Jackson Laboratory | 000664 | Male, 8-12 wk |
| IsoThesia-Isoflurane | Henry Schein | NDC 1169-0500-1 | |
| Excel | Microsoft | ||
| Systane 야간 윤활제 눈 연고 | Alcon | 65050935 | |
| 7-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | 640.O32 | |
| 5-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | K809. O32 | |
| 수술용 가위 | ROBOZ | RS-5881 | |
| 펜치 | 파인 사이언스 도구 | 11052-10 | |
| Gauze | Bio Nuclear Diagnostics Inc | DIS-022B | |
| 바늘 홀더 | 파인 사이언스 도구 | 12565-14 | |
| Buprenex CIII | Patterson Veterinary | 0-891-9756 | 부프레노르핀 하이드로클로라이드 진통제 |
| Betadine | Purdue 제품 | 67618-150-08 | |
| Nair | 교회 및 Dwight Co. | NRSL-22339-05 |
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