이 비디오는 쥐의 정맥 삽입 수술 후 근육 내막 증식증의 발달을 연구하는 모델을 보여줍니다.
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이 논문에서
요약
초록
우회술은 관상동맥질환에 대한 확립된 치료법입니다. 이식편 개통은 계속해서 복재 정맥 이식편의 아킬레스건입니다. 우회 이식 실패에 대한 연구 모델은 이식편 개통 손실 중 병리생물학적, 병태생리학적 과정을 더 잘 이해하는 데 필수적입니다. 돼지나 양과 같은 대형 동물 모형은 인간의 해부학적 구조와 비슷하지만 특별한 시설과 장비가 필요합니다. 이 비디오는 정맥 이식편 개통 손실을 조사하기 위한 쥐 정맥 삽입 모델에 대해 설명합니다. 쥐는 저렴하고 다루기 쉽습니다. 마우스 모델과 비교했을 때, 편리한 크기의 쥐는 더 나은 조작성을 허용하고 보다 다양한 분석을 위해 충분한 양의 물질을 얻을 수 있습니다. 간단히 말해서, 기증자 쥐의 하복부 정맥을 적출하여 대퇴 동맥의 분절을 대체하는 데 사용합니다. 문합은 단일 스티치를 통해 수행되며 피브린 접착제로 밀봉됩니다. 이식편 개통은 이중 초음파 검사를 사용하여 비침습적으로 모니터링할 수 있습니다. 이식편 개통 손실의 주요 원인인 근육 증식증은 시간이 지남에 따라 점진적으로 발생하며 조직학적 단면에서 계산할 수 있습니다.
서론
관상 동맥 질환과 그 합병증은 전세계 사망의 주요 원인 중입니다. 현재 치료 전략을 재 확립 혈류에 어느 좁아진 혈관을 확장시키고 또는 바이 패스를 작성하여 초점. 정맥자가 이식을 이용하여 관상 동맥 우회술 (CABG) 먼저 1968 년에 설명하고, 수년에 걸쳐 정제하고있다. 외에도 왼쪽 전방의 재관류는 관상 동맥을 내림차순에서, 복재 정맥 도관은 가장 일반적으로 1을 사용합니다. 그러나, 이식 개통은 복재 정맥 이식 (SVG)의 약점 남아있다. 한 해 수술 후 이식 개통은 십년 2,3 후 61 %로 떨어지고, 85 %이다. SVG 개통 손실의 병태 생리 학적 기전과 원인을 공개하는 것은 그러므로 중요한 작업입니다.
이 동영상은 정맥 이식편 손실을 조사하기 위해 쥐의 정맥 개재 모델을 보여줍니다. 이 방법의 전반적인 목표는 기본 병인 학적 탐구한다및 질병의 진행 동안 -physiological 과정은 약물이나 치료 옵션 테스트에 적합한 모델을 개발한다. 동맥 시스템으로 표면 상복부 정맥 이식함으로써,이 모델은 밀접하게 관상 동맥 우회술의 임상을 모방. 외과 외상, 허혈, 벽 스트레스는 병적 인 혈관 변화의 중요한 트리거하고 설명하는 모델을 모방하고 있습니다.
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프로토콜
동물 실험 동물의 원리, 실험 동물 자원 연구소에 의해 제조 및 국립 보건원 (National Institutes of Health)에 의해 출판에 대한 가이드를 준수 인도적인 치료를 받았다. 모든 동물 프로토콜은 책임있는 지방 자치 단체 ( "AMT 사의 대 아퍼 싶게 Verbraucherschutz, Hansestadt (보건 및 소비자 보호를위한 사무실) 함부르크")에 의해 승인되었다.
1. 동물 관리
- 실험 동물 연구소에서 300-350g 무게 루이스 쥐 (LEW / CRL) 쥐와 ROSA / 루시 페라 - LEW 형질 전환 쥐를 얻습니다.
- 통풍 캐비닛에 기존의 조건에서 쥐를 유지하고 그들에게 표준 쥐 차우와 멸균 임의 량의 물을 공급.
- 기증자와받는 사람과 syngenic LEW / CRL 쥐와 ROSA / 루시 페라 - LEW 형질 전환 쥐를 사용하여 이식 이식을 수행합니다.
기증자 쥐 2. 준비
- 입회를 사용하여이온 챔버는 이소 플루 란 (2.5-3 %)와 쥐를 마취시키다합니다.
- 그 뒷면에있는 쥐를 놓고 입과 코를 커버하는 안면 마스크로 마취를 유지한다. 뒷다리 다리를 곤란과 반....
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결과
쥐의 정맥 개재 모델은 myointima 증식 및 혈관 이식 실패의 개발을 연구하기에 적합합니다. 동물 수술에서 잘 회복하고 우수한 신체 조건 포스트 동작을 보여줍니다. 그림 1은 키 수술 단계를 보여줍니다. 원격 교육의 inguinalis을 따라 피부를 절개 한 후, 상복부 표면 정맥과 대퇴 동맥 (그림 1A)를 식별된다. 이 초기 이식 실패 및 개통 손실을 초래할 수있는 이식의 수확은 이식 (그림 1B)를 손상시키지 않고, 신중하게 수행해야합니다. 받는 동물 (도 1C)에 그래프트 위치 후에 봉합 스티치가도 1d에 도시 된 순서로 수행된다. 완성 된 정맥 개재 이식은 창백 (그림 1E)를 표시하고 빨간색이되고 재관류 (그림 1 층) 후 맥동을 표시해야합니다.
성공.......
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토론
이 동영상은 정맥 이식편 손실을 조사 및 기본 병리학 적 과정의 탐사 및 새로운 약물이나 치료 옵션의 테스트를 위해 허용하는 쥐의 정맥 개재 모델을 보여줍니다.
마취는 수술 절차의 중요한 측면이다. 이것은 특히 장시간 작업 중에, 안전하고 쉬운 방법으로 연속 inhalative 마취 시스템은 좋습니다. 이 동작은 이상 1 시간 소요 트레이닝 단계 동안 매우 중요 할 수있다.
수술에 관하여, 수확 주입 17 일 동안 정맥 이식편을 손상하지 중요하다. 용기의 외막을 파지하여 정맥 이식편에 대한 손상을 방지하고 후속 혈전 형성 및 이식 실패를 피할 수있다. 이식편 개통 정맥 이식편 또는 dista 혈류 관찰을 통해 맥동 그래프트 구조 정맥 직후 결정될 수있다리터 동맥뿐만 아니라 이중 초음파 검사를 통해.
절차의 또 다른 중요한 측면은 정맥 이식편의 과도한 팽창.......
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
저자는 그녀의 기술 지원을 크리스티안 Pahrmann 감사합니다. 본 연구는 독일 재단 FUER Herzforschung에 의해 투자되었다 (F / 14분의 28). DW는 심장 및 폐 이식을위한 국제 사회에서의 여행 수상에 의해 지원되었다. TD는 그렇지-크로네-는 Fresenius 재단 (2012_EKES.04)에서 그렇지 크로네 우수 장학금을 받았다. SS는 독일 연구 협회로부터 연구비를받은 (DFG, DE2133 / 2-1, TD 및 SCHR992 / 3 일, SCHR992 / 4-1, SS).
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재료
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|---|---|---|---|
| Rat LEW/Crl | Charles River | 재고 번호 004 | |
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| hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr : B506 | Isoflurane |
| 미세 수술 클램프 | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine - 4mm |
| 클램프 애플리케이터 | Fine Science Tools | 18056-14 | |
| 제모 크림 | Rufin 화장품 | 27618 | |
| 포비돈-요오드 | 베타딘 Purdue Pharma | NDC : 67618-152 | |
| 10-0 Ethilon 봉합사 | Ethicon | 2814G | |
| 5-0 prolene 봉합사 | Ethicon | EH7229H | |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
| Heparin | Rotexmedica | PZN : 3862340 | 25.000 IE / ml |
| Xylocain 1 % | 아스트라제네카 | PZN: 1137907 | 리도카인 |
| EVICEL | J& J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE | 피브린 접착제 |
| NaCl 0.9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
| Vevo 770 고해상도 in vivo 마이크로 이미징 시스템 | VisualSonics | 듀플렉스 초음파 검사 | |
| Ecogel 100 초음파 젤 | Eco-med | 30GB | |
| D-Luciferin 반딧불이, 칼륨 염 | Biosynth | L-8220 | |
| PBS pH 7.4 | Gibco | 10010023 | |
| Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | 생물 발광 이미징 | |
| Weigerts 철 hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | 트리크롬 염색 |
| Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | Trichrome 염색 |
| Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | 트리크롬 염색 |
| Ponceau S 용액 | Serva 전기영 | 33427 | 삼색 염색 |
| 아조플록신 | Waldeck | 1B-103 | 트리크롬 염색 |
| 몰리브다토인산 수화물 | Merck | 1.00532.0100 | 트리크롬 염색 |
| 오렌지 G | Waldeck | 1B-221 | 트리크롬 염색 |
| 라이트 그린 SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| 빙하 아세트산 | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| 37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
| 파라핀 | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| 에탄올 절대 | Th. Geyer | 2246 | |
| 에탄올 96% | Th. Geyer | 2295 | |
| 에탄올 70% | Th. Geyer | 2270 | |
| 슬라이드 랙 | Ted Pella | 21057 | |
| 염색 접시 | Ted Pella | 21075 | |
| Bepanthen Eye and Nose 연고 | Bayer | 1578675 | Eye 연고 |
참고문헌
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- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary arte....
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