맞춤형 선구자로 수정하고, 구아니딘 그룹의 기능화

요약

대응하는 전구체의 사용에 기초하여 알킬화 구아니딘의 합성을위한 프로토콜이 제시된다.

초록

구아니딘 그룹은 의약 화학에서 가장 중요한 pharmacophoric 그룹 중 하나입니다. 구아니딘기를 운반 유일한 아미노산은 아르기닌이다. 이 문서에서, 펩티드 리간드의 구아니딘 기의 개질을위한 쉬운 방법은 RGD 인테그린 - 결합 리간드의 예와 함께 제공된다. 또한, 최근 이러한 리간드의 구아니딘 기의 고유 변경합니다 (αv 및 α5 아형 사이 예) 서브 타입의 선택적인 조절을 가능하게하는 것이 입증되었다. 또한, 구아니딘기를 통해 작용하는 이전의 미지의 전략 증명하고, 합성 방법은 본 문서에 검토된다. 여기에 기술 된 변형 (N의 _ω) 및 알킬화 아세틸 구아니딘기를 말단에 포함한다. 합성, 맞춤형 전구체 분자는 다음 미리 전송하는 직교 탈 아민과의 반응을 실시하는, 합성개질 구아니딘 그룹. 알킬화 구아니딘의 합성에 대해, 전구체는 N에 기초하여, N '- 디 - BOC-1 H 피라 졸 -1- 카르 복스 아미 딘은 실화 화합물, 선택 N -Boc- S의 대응 실화 유도체되는 전구체를 합성하기 위해 사용된다 - 단일 및 두 단계 반응에서 얻을 수 methylisothiourea.

서론

자연 리간드에서 가장 풍부한 pharmacophoric 그룹 중 여러 상호 작용 ^{1, 2에} 참여하고있다 구아니딘 그룹이다. 예를 들어, 수소 결합 상호 작용의 가능성이 4 배의 수소 공여체로서 작용하며 염다리 또는 양이온 - π 상호 작용과 같은 정전 상호 작용에 관여한다. 의약 화학에서, 이러한 그룹들은 구아니딘 모방 체 ^{(5, 6)로} 자주 있지만, 약물과 약물 후보 ^(4)에서 발견된다. 구아니딘 유사체의 개발을위한 이유는 유비쿼터스, 양전하 구아니딘 그룹의 제거뿐만 아니라 리간드의 친 유성의 조정이다. 펩티드 리간드에서 유일한 구아니딘 기 함유 아미노산 따라서 종종 펩티드 리간드의 생리 활성 영역에서 발견되는 아르기닌이다.

매우 홍보아르기닌 - 함유 리간드 패밀리 ominent 예는 RGD 결합 인테그린의 아과이다. 일반적으로, 인테그린은 모든 고등 생물에서 중요한 기능을 구비하고, 세포 부착 수용체의 클래스입니다. 이들 기능 중 일부는 세포 부착, 이동, 및 세포 생존을 포함한다. 따....

프로토콜

주 : 모든 시약 및 용매는 상업적 공급자로부터 수득하고, 추가 정제없이 사용 하였다.

주의 : 사용하기 전에 모든 관련 물질 안전 보건 자료 (MSDS)를 참조하십시오. 화학 합성 (예를 들어, 흄 후드, 보호 안경, 장갑, 실험실 코트, 전체 길이 바지와 폐쇄 발가락 신발)를 수행 할 때 모든 적절한 안전 장비를 사용하십시오.

Guanidinylation 전구체의 합성 (1)

1. 알킬화 종
   1. 메틸화 종
      1. 건조 10ml에 (PPH _3, 3.8 밀리몰, 1.2 eq.)를 N, N '1.0 g 녹이고 디-BOC-1에서 H 피라 졸 -1- 카르 복스 아미 딘 (3.2 밀리몰, 1 당량.) 및 트리 페닐 포스 핀 1.0 g 실온 (RT)에서의 고무 격막을 사용하여 불활성 분위기에서 50 mL의 둥근 바닥 플라스크에 테트라 히드로 푸란 (THF). 주사기 (4.8 밀리몰, 1.5 당량.) 및 L을 사용하여 건조 메탄올 194 μL를 추가그 외 RT에서 교반 하였다.
      2. 별도로, 작은 유리 병에서 건조 ....

결과

사이 클릭 펩티드 전구체의 선형 펩티드 합성 환화 및 직교 DDE 탈 보호 하였다. 침전 후, 화합물의 순도는 HPLC-MS (도 1)로 분석 하였다. 반응의 진행을 모니터하기 위해, HPLC 분석은 2 시간의 반응 시간 (도 2) 한 후에 수행되었다.

구아니딘 그룹에 큰 잔류를 들어, 2 시간의 반응 시간은 종종 충분하지 않습니다. 이 경우, 반응을 계속하고, LC-MS로 모니터. 반응 최종 탈 보호 한 후, 화합물 (저 mg의 범위에서 통상적 수율) 반 - HPLC 기기를 사용하여 정제 하였다. 최종 화합물은 순도 (도 3 참조)를 평가하기 위해 HPLC-MS로 분석 하였다.

토론

guanidinylation 용 전구체 ((N 나) V) C (OrnD (m 니어) Gf를), 고상 펩티드 합성 (SPPS) 표준 FMOC 프로토콜에 의해 합성되는 직교 탈 환상 펩티드 유도체이다. Ornithin 펩티드 골격의 고리 화 한 후 DMF 히드라진으로 탈 보호 될 수있는 직교 보호 된 유도체 (FMOC-Orn이며 (DDE) -OH)를 사용 하였다. 펩티드 전구체 화합물의 석출에 의해 그 이후의 동결 건조에 의해 정제한다.

guanidinylation위한 알킬화 전구체, 미츠 노부 조건하에 알킬화 반응을 통해 N '디-BOC-1 H 피라 졸 -1- 카르 복스 아미 딘 (PPH ₃ 시판 물질 N부터 한 단계 반응에서 좋은 수율로 얻을 수있다 , DIAD, THF) ¹⁹

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
N,N′ -Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine, 98%	시그마 알드리치	434167  ALDRICH
Triphenylphosphine, 99%	Sigma Aldrich	T84409  SIGMA-ALDRICH
테트라하이드로푸란, >99.5%	Carl Roth	4745
테트라하이드로푸란 무수, 99.8%	Carl Roth	5182
메탄올 무수, 99.8%	Sigma Aldrich	322415  SIGMA-ALDRICH
디이소프로필 아조디카르복실레이트, 98%	Sigma Aldrich	225541  ALDRICH
Dichlormethan, 합성용, 99.5%	Carl Roth	8424
플래시 크로마토그래피용 실리카 겔	Sigma Aldrich	60738  SIGMA-ALDRICH
n-Pentane, 99%	Carl Roth	8720
n-Hexane, 99%	Carl Roth	CP47
에칠아세테이트, 99.5%	Carl Roth	7338
아미노헥산올, 95%	Sigma Aldrich	A56353  ALDRICH
em>S-Methylisothiourea 헤미설페이트, 98%	Sigma Aldrich	M84445 ALDRICH
Di-tert-butyl dicarbonate, 99%	Sigma Aldrich	205249  ALDRICH
em>N,N-Dimethylformamid, 99.8%	Carl Roth	A529
N,N-Diisopropylethylamin, 99.5%	Carl Roth	2474
아세트산 무수물, 99%	Carl Roth	4483
Chlortrityl 수지	Carbolution	CC11006
Fmoc-Gly-OH, 98%	Carbolution
피페리딘, 99%	시그마 알드리치	104094  SIGMA-ALDRICH
Fmoc-Orn(Dde)-OH	Iris-Biotech	FAA1502
HATU, 99%	Carbolution	CC01011
HOAt, 99%	Carbolution	CC01004
Fmoc-Val-OH	Carbolution	CC05028
2-Nitrobenzenesulfonyl chloride, 97%	Sigma Aldrich	N11507  ALDRICH
2,4,6-Collidine, 99%	Sigma Aldrich	27690  SIGMA-ALDRICH
메르캅토에탄올, 99%	시그마 알드리치	M6250  ALDRICH
Diazabicycloundecen, 98%	Sigma Aldrich	139009  ALDRICH
Fmoc-D-Phe-OH, 98%	시그마 Aldrich	47378  ALDRICH
Fmoc-Asp(OtBu)-OH, 98%	Carbolution	CC05008
Hexafluoroisopropanol	Carbolution	CC03056
Diphenylphosphoryl azide, 97%	Sigma Aldrich	178756  ALDRICH
TFA, 99.9%	Carl Roth	P088
트리이소프로필실란, 98%	Sigma Aldrich	233781  ALDRICH
아세토니트릴, HPLC 등급	Carl Roth	HN44

<<CC05014