향상된 순도와 다양성에 차 미세 아교 세포의 신속하고 세련된 CD11b를 자기 절연

Souvarish Sarkar; Emir Malovic; Brandon Plante; Gary Zenitsky; Huajun Jin; Vellareddy Anantharam; Arthi Kanthasamy; Anumantha G. Kanthasamy

doi:10.3791/55364

방법 논문

향상된 순도와 다양성에 차 미세 아교 세포의 신속하고 세련된 CD11b를 자기 절연

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DOI:

10.3791/55364

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2017년 4월 13일

Souvarish Sarkar^*¹ , Emir Malovic^*¹ , Brandon Plante¹ , Gary Zenitsky¹ , Huajun Jin¹ , Vellareddy Anantharam¹ , Arthi Kanthasamy¹ , Anumantha G. Kanthasamy¹

¹Biomedical Sciences & Iowa Center for Advanced Neurotoxicology, Iowa State University

^* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

여기, 우리는 시험 관내 실험에 대한 출생 마우스 새끼에서 미세 아교 세포를 분리하는 프로토콜 (1 일)을 제시한다. 단리 방법이 즉석에서 모두 높은 수율 및 순도, 소교 생물학의 해명을 목적으로 다양한 실험을 허용 다른 방법에 비해 상당한 이점을 생성한다.

초록

미세 아교 세포는 중추 신경계에 욕설 차 응답자이다; 그러나, 많은 신경 염증을 조절하는 역할에 대한 알 수없는 남아있다. 미세 아교 세포는 염증 스트레스를 측량에서 대 식세포 유사한 기능을 중배엽 세포이다. 고전 (M1 형) 및 대체 (M2 형) 대 식세포의 활성화는 더 나은 이러한 표현형은 파킨슨 병, 알츠하이머, 헌팅턴의 질병과 같은 신경 염증성 조건이 기본 상호 작용을 이해하기위한 노력의 일환으로 미세 아교 세포로 확장되었습니다. 시험관 실험에서 생체 환경에 확장 될 수있다 신속하고 신뢰할 수있는 결과는 차 미세 아교 세포를 제공 활용. 이것은 도전했다 최적 순도 적당한 수율을 달성하면서 미세 아교 세포를 단리 생체 실험을 통해 명백한 장점 않는다. 현재 사용중인 일반적인 방법 중 하나는 낮은 복구, 낮은 순도, 또는 두 가지 모두에서 고통 받고 있습니다. 여기서, 우리는 민주시간의 절반의 양으로 높은 세포 복구 및 순도 향상을 달성 열없는 CD11b를 자기 분리 방법의 구체화를 onstrate. 우리는 신경 염증과 신경 퇴행을 연구의 목적으로 차 미세 아교 분리의 매우 유용한 모델로이 최적화 방법을 제안한다.

서론

미세 아교 세포는 C-KIT + / CD45- 차별화 중배엽 기원 MYB 독립적 상주 식세포, 난황 ^{^1,} ^2의 혈액 섬 전구 세포를 erythromyeloid이다. 배아 미세 아교 세포는 중추 신경계 (CNS)을 식민되면, 그들은 분지 형태 ^3에 아메바에서 전환. 그들의 역동적 인 파급 효과가 잠재적 인 모욕 ⁴ 건강한 뇌 실질을 조사하고 있기 때문 성인 미세 아교 세포는 감시자로 분류됩니다. 미세 아교 세포는 중추 신경계의 세포 인구의 약 10 %에 기여하지만, 서로의 사이에 타일에 대한 그들의 능력은 실질 ^{^4,} ^5의 최대 스캐닝을 보장합니다. 이러한 α-synuclein의 ^{^6,} ^7, 아밀로이드 ^β-8, P 등의 위험 - 관련 분자 패턴 (DAMPS)예컨대 리포 폴리 사카 라이드 (LPS) ^(9)와 같은 at....