생선 기름 보충제의 지질 프로필의 신속한 평가를위한 강력한 도구로 NMR 분광학

요약

여기서, 고해상도 ¹ H, ¹³ C 핵 자기 공명 (NMR) 분광법은 캡슐화 어유 보충제의 정성 및 정량 분석을위한 신속하고 신뢰할 수있는 도구로서 사용되었다.

초록

서쪽 다이어트 때문에 생선 기름 보충제의 섭취가 이러한 필수 영양소의 섭취를 증가하는 것이 좋습니다, n은 -3 지방산에 좋지 않습니다. 이 연구의 목적은 고해상도 ¹ H NMR 및 두 개의 다른기구를 이용하여 ¹³ C NMR 스펙트럼을 사용하여 캡슐화 어유 보충제의 정성 및 정량 분석을 설명한다; 500 MHz와 850 MHz의 악기. 양자 모두 ⁽¹ H)와 탄소 (C ¹³⁾ NMR 스펙트럼 어유 보충제의 주요 성분의 정량에 이용 될 수있다. 어유 보충제의 지질 정량 관련 1D 스펙트럼에서 해당 NMR 신호의 통합을 통해 달성된다. ¹ H, ¹³ C NMR에 의해 얻어진 결과는 두 핵 두 기기 사이의 해상도와 감도의 차이에도 불구하고, 서로 잘 일치한다. ¹ H NMR 쿠폰스펙트럼 1 시간 10 분간 지속에서 ^{13 개} C NMR 분석 달리 1 분 미만에 기록 될 수있는 SA보다 신속한 분석은, ¹³ C NMR 비교. ¹³ C NMR 스펙트럼은, 그러나, 더 유익하다. 그것은 개인 지방산의 더 많은 양이 많은 데이터를 제공 할 수 있고, 글리세린 골격에 지방산의 위치 분포를 결정하기 위해 사용될 수있다. 두 핵은 정제 또는 분리 단계의 필요없이 하나의 실험에 정량적 인 정보를 제공 할 수 있습니다. 자기장의 세기가 거의 인해 ¹³ C NMR에 대하여 그 하부 해상도로 ¹ H의 NMR 스펙트럼에 영향을 미치는, 그러나, 더 낮은 비용 NMR 장비 효율적 식품 산업 및 품질 관리 연구소에 의한 표준 방식으로 적용될 수있다.

서론

다이어트 N -3 지방산의 섭취는 심장 질환 ^{1, 2, 3, 4} 및 염증 질환, 당뇨병 ^(5)와 같은 여러 조건에 대해 유익한 것으로 입증되었다. 서양 다이어트를 n -3 지방산 가난한 간주되며, 따라서 생선 기름 보충제의 소비가 N을 개선하는 것이 좋습니다 10-6 / N -3 소비자의 영양 ¹ 균형. 생선 오일 보충 소비 최근의 증가에도 불구하고, 질문이 일부 제품의 안전성, 신뢰성 및 품질에 대해 남아있다. 생선 기름 보충제의 신속하고 정확한 성분 분석이 제대로이 상용 제품의 품질을 평가하고 소비자의 안전을 보장하기 위해 필수적이다.

생선 오일 보충의 평가를위한 가장 일반적인 방법S는 가스 크로마토 그래피 (GC) 및 적외선 분광법 (IR)이다. 이들은 매우 민감한 방법이지만, 그들은 몇 가지 단점 ^6에서 고통 받고 있습니다. GC 분석....

프로토콜

1. NMR 샘플 제조

참고 :주의, 사용하기 전에 모든 관련 물질 안전 보건 자료 (MSDS)를 참조하시기 바랍니다. 샘플 제조에 사용되는 중수 소화 클로로포름 _{(CDCl3 중)의} 독성이다. 흄 후드 및 개인 보호 장비의 사용을 포함 샘플 준비를 수행 할 때 모든 적절한 안전 관행을 사용하십시오 (보안경, 장갑, 실험실 코트, 전체 길이 바지, 신발 - 발가락을 휴관).

1. ¹ H, ^{13 개} C 샘플의 제조
   1. 주사기를 사용하여 캡슐로부터식이 어유 120 μL (~ 110 mg)을 추출하고, 4 mL 유리 바이알에 배치. 생선 기름의 무게를 기록한다.
   2. 샘플 용해
      1. ¹ H, ^{13 개} C의 화학적 이동에 대한 기준으로서 사용되는 테트라 메틸 실란 (TMS) 0.01 %를 함유하는 _CDCl3 중 500 μL 생선 기름 약 120 μL 녹인다.
         참고 : TMS가 사용하는 것입니다화학 시프트 만 교정 (스텝 번호 2.2.1.2.7 및 2.2.2.2.7 참조) D, 목적하지 부량 (단계 번호 2.2.1.3 및 2.2.2.3 참조)....

결과

¹ H, ¹³ C NMR 스펙트럼은 두 NMR 장비를 이용하여 시판 어유 보충제 회수하고; 850 MHz와 500 MHz의 분석 장치. 이러한 스펙트럼은 이러한 도코 사 헥사 엔 산 (DHA) 및 에이코 사 펜타 엔 산 (EPA), 예컨대 N과 같은 N -1 아실 체인 및 영양 중요한 지표뿐만 아니라 다른 화합물 생선 기름 성분의 정량에 이용 될 수 -6 / N 비 -3. 정량 심지어 내부 표준을 사용하지 않고 수행 될 수 있지만, 정량적 인 결과를 상대 몰 백분율로 표현되어야한다. 데이터의 절대 값 (밀리그램 / g)로 표현 될 필요가있을 때, 내부 표준이 필요하다. NMR에 의해 얻어진 결과는 t에 따라, 0.3 % 내지 ¹³ C NMR 분석을 위해 2 %, 0.5 % 내지 ¹ H NMR 분석을 2.5 % 범위의 상대 표준 편차 (RSD)를.......

토론

문제 해결에 대한 수정 및 전략

스펙트럼 품질. NMR의 신호에 따라서 NMR 스펙트럼 해상도의 선폭은 자기장의 균일 성을 최적화하는 처리 인 shimming에 크게 의존한다. 일상적인 분석을 위해, 1 차원 shimming 적절한 차원이고 shimming는 그것을 정기적 NMR 요원에 의해 수행되는 것을 고려할 필요는 없다. O (90:10) ₂ D : 그렇지 않은 경우, 3 차원 shimming는 H ₂ O 0.6 mL를 함유하는 샘플을 사용하여 분석 전에 수행되어야한다. A는보다 빠르고 shimming 달성하기 위해, 샘플은이 자석 구멍에 배치되기 전에 경사 깊이 게이지를 사용하여 무선 주파수 (RF) 코일의 여기 / 검출 영역의 중심으로 할 필요가있다. shimming에 영향을 미치는 또 다른 요인은 10 ~ 20 Hz의 회전 속도로 샘플을 회전합니다. 이 스핀 속도로 샘플을 회전하는 반경 방향 쐐기 향상.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
Avance III 850 NMR 기기	Bruker
Avance III 500 NMR 기기	Bruker
TCI 5mm 프로브	Bruker		헬륨 냉각 역 (양성자 디텍트) NMR 프로브 3 개의 독립 채널 (1< / sup>H, 13< / sup>C, 15< / sup>N)
BBO 신동 5mm 프로브	Bruker		질소 냉각 관찰 (X-핵 검출) 프로브, 두 개의 채널을 특징으로합니다. 하나는 1H 및 19F 검출을 위한 것이고 다른 하나는 X-핵(15N에서 31P)를 커버
너 터빈	Bruker		NMR 스피너는 고분자 재료로 만들어지며 NMR 튜브를 제자리에 단단히 고정하기 위한 고무 O-링이 있습니다
Topspin 3.5	Bruker
중수소화 클로로포름	Sigma-Aldrich	865-49-6	99.8 원자 % D, 0.03 TMS
2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol	Sigma-Aldrich	를 포함합니다. 128-37-0	순도 >99%
생선 기름 샘플
NMR 튜브	New Era	NE-RG5-7	5mm OD 루틴 " R” 시리즈 NMR 샘플 튜브
BSMS	Bruker		Bruker 시스템 관리 시스템; 제어 시스템 장치

하는 스피.