Method Article

반자동 경도 Microcomputed Tomography 기반 정량적 구조 분석 누드 쥐 척추 골절 골다공증 관련 모델의

DOI:

10.3791/55928

⸱

September 28th, 2017

 ,  ,  ,  ,  , 
1Skeletal Biotech Laboratory, Hebrew University-Hadassah Faculty of Dental Medicine, 2Department of Surgery, Cedars-Sinai Medical Center, 3Board of Governors Regenerative Medicine Institute, Cedars-Sinai Medical Center, 4Biomedical Imaging Research Institute, Cedars-Sinai Medical Center, 5Department of Orthopedics, Cedars-Sinai Medical Center

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 프로토콜의 목표 경도 평가 vivo에 는 반자동된 microcomputed 단층 기반 정량적 구조 분석을 사용 하 여 될 수 있는 누드 쥐 척추 압축 골다공증 관련 골절 모델을 생성 하는 것입니다.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

골다공증 관련 척추 압축 골절 (OVCFs)는 세계 인구 나가로 보급 증가 함께 일반적이 고 임상 unmet 필요. 동물 OVCF 모델 변환 조직 엔지니어링 전략의 전 임상 개발에 필수적입니다. 다양 한 모델은 현재 존재 하는 동안 단일 누드 쥐에서 여러 높은 재현성 척추 결함을 유도 하는 최적화 된 방법을이 프로토콜에 설명 합니다. 소설 경도 반자동된 microcomputed 단층 촬영 (µCT)-척추 결함의 정량적 구조 분석을 기반으로 또한 선발. 간단히, 쥐 여러 시간 포인트 수술에 몇 군데 있었다. 1 일 검사 표준 위치로 방향도 고 관심의 표준 볼륨 정의 되었다. 각 쥐의 후속 µCT 스캔 했다 동일한 볼륨의 다음 새로운 뼈 형성에 대 한 평가 분석 그래서 하루 1 스캔을 자동으로 등록 됩니다. 이 다재 다능 한 접근 어디 경도 영상 기반 분석 정확한 3 차원 반자동된 정렬에서 혜택을 수 있는 다른 모델의 다양 한 적응 될 수 있다. 함께 찍은,이 프로토콜에서는 골다공증 및 뼈 연구를 위한 쉽게 정량 하 고 쉽게 재현 가능한 시스템을 설명 합니다. 제안 된 프로토콜은 4 개월 누드 ovariectomized 쥐 및 생성, 이미지, 조직 크기와 장비에 따라 두 개의 척추 결함 분석을 2.7 그리고 4 h 사이 골다공증을 유발 합니다.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

200 백만 이상의 사람들이 전세계 골다공증1에서 고통. 기본 병 적인 감소 뼈 미네랄 밀도 (BMD)에 하 고 변경 된 뼈 마이크로아키텍처 뼈 취약성 및, 따라서, 골절2의 상대 위험 증가. 골다공증은 너무 유행 하 고는 WHO가 정의 그것은 중요 한 공중 위생 관심사는 건강에 해로운. 또한, 세계의 인구는 예상 대로 나이에, 골다공증 되 더 일반적으로 예상 된다.

골다공증성 척추 압축 골절은 가장 일반적인 취약성 골절, 미국에서 1 년 이상 750000 추정. 그들은 많은 중요 한 병 적 상태와 관련 된 9 배 높은 사망률 평가3입니다. 임상 시험에서 현재 사용할 수 외과 개입, vertebroplasty, kyphoplasty, 등 가짜 치료4,5,이 환자에 게 통증 관리만 사용할 수를 떠나 보다 더 더 효과적인 것을 발견 했다. 현재 OVCF 치료 제한 때문에, 장애6,,78을 복제할 수는 동물 모델을 개발 하는 것이 필수적입니다. 현재 치료 방법의 조사와 임상 연습으로 번역할 것 이다 새로운 치료법의 개발에 수 같은 동물 모델을 용이 하 게. 골다공증 유발 되 고 ovariectomy1,,910,11, 와 함께에서 낮은 칼슘 식단 (LCD)의 관리를 통해 모델 동물에서 입은 12 , 13 , 14 , 15. 추가 모델 OVCFs와 관련 된 뼈 손실, 척추 뼈 결함 골다공증성 immunocompetent 쥐 16,17,,1819에 설치 되었다 20,,2122,,2324. 이 작품에서 모델 골다공증 immunocompromised 쥐의 척추 결함 모델 제공 됩니다. 이 새로운 모델은 다양 한 소스와 OVCFs 같은 어려운 골절의 복구에 대 한 종에서 파생 된 줄기 세포 관련 세포 기반 요법 평가 하 사용할 수 있습니다.

뼈 이미징 골절 및 뼈 질병의 평가의 중요 한 부분 이다. 고급 이미징 방법 뼈 구조 변경 및 재생 전략25의 정확한 평가 위해 개발 되었다. 그 중 µCT 이미징 고해상도 3D 이미지를 제공 하는 비-침략 적, 쉬운--사용, 그리고 저렴 한 방법으로 떠오르고 있다. 고해상도 3D 마이크로아키텍처26 다음 양적 분석 수 있는 뼈 제공 µCT 이미징 골다공증 환자 평가에 다른 modalities에 몇몇 이점이 있다. 후자는 다음 사용할 수 있습니다 제안 된 치료의 치료 효과 비교. 실제로, µCT 이미징 vivo에서 척추 결함 재생1,,1627모니터링에 대 한 황금 표준입니다. 그러나, 몇 가지 간행물28,29,,3031 고용 사용자 종속성, 보간 편견, 및 µCT의 정밀도 오류를 최소화 하기 위해 자동화 등록 도구 이미징 기반 분석입니다. 최근에, 우리는이 프로토콜32 에 설명 된 대로, 표준화 된 뼈에서 뼈 재생의 분석을 개선 하기 위해 등록 절차를 사용 하는 첫번째 했다.

여기 설명 하는 방법을 OVCFs에 대 한 새로운 세포 치료의 효과 연구 하는 데 사용 될 수, 방해 받지 않는 호스트에 의해 T 세포 응답을 xenogeneic 또는 수용자 세포를 거부할 수 있습니다. 골다공증은 젊은 쥐 ovariectomy (OVX) 통해과 LCD의 4 개월에에서 유도 된다. OVX 쥐, LCD와 결합의 젊은 나이 있었습니다, 돌이킬 수 없는 뼈 손실을 선도 하 여 폐 경 후 골다공증을 흉내 낸 낮은 피크 뼈 질량에 도달. 이 사실은, LCD 중 리 모델링을 모델링 하는 뼈에서 쥐 전환 나이의 3 달 주변에 상 추33, 위에 골다공증을 유지의 가능성을 증가에 의해 분할 설명 될 수 있다 시간입니다. 젊은 동물을 사용 하 여 게이 모델 보다 비용 효과적인, 그들은 적은 비용으로. 그럼에도 불구 하 고, 그것은 본질적으로 하지 노화 동물의 생물 학적 변화에 대 한 회계에 의해 제한 됩니다.

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Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

모든 동물 실험 승인 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC) 삼목 시 나이 의료 센터 (프로토콜 # 3609)의 프로토콜에서 수행 했다. 마 취는 모든 이미징 및 수술 절차에 대 한 관리 되었다. 모든 동물 승인된 IACUC 프로토콜에 따라 보관 되어 있었다.

참고:이 프로토콜의 실험 설계는 그림 1에 표시 됩니다. 그들의 난소를 수술로 제거 하 고 그들을 먹 여 0.01% 칼슘과 0.77% 인산으로 구성 된 LCD와 6 주 된 쥐를 구입. LCD의 4 개월의 기간 후에 네 번째 및 다섯 번째 요 추 척추 기관 (L4-L5) 중요 한 크기 척추 결함 드릴. 수술, 다음 주 1와 주 2, 4, 8, 및 12 결함 설립 후에 쥐를 이미지. 하루 1 스캔에 결함 여백, 표준 위치로 방향을 찾아서 관심 (목소리 야)의 원통형 볼륨을 정의 합니다. 자동으로 해당 주 1 스캔에 대해 정의 된 표준 위치에 각 쥐의 후속 µCT 검사 (즉, 2, 4, 8, 및 12 주)을 등록 합니다. 하루에 1 미리 목소리 야 등록된 검사에 적용. 볼륨 골밀도 및 명백한 조밀도 내가의 평가.

1. 골다공증의 유도

  1. 0.01% 칼슘과 0.77% 인산으로 구성 된 LCD의 4 개월 6 주 오래 된 athymic ovariectomized 쥐 입었다.
  2. 스위치 다시 정상적인 다이어트.
    참고: 이러한 쥐 것 이다 라고도 " 골다공증성 쥐 "이.

2. 척추 결함 모델

참고: 타이밍은 동물 마다 40-50 분.

  1. 압력솥 모두 수술 전에 수술 도구.
  2. 여러 수술의 경우 모든 수술 도구를 소독.
    1. 도구를 세척 하 고 배치할 sonicator 욕조에 5 분 넣어 뜨거운 비드 소독 기 세트 20 미 허용에 대 한 250 ° c에서 5 분에 대 한 진정 도구에 대 한
  3. 뽑기 마 취.
    1. 장소 유도 실에서 골다공증성 쥐를 마 취 기계 중앙 청소 시스템에 첨부. 100% 산소에 5 %isoflurane 사용 하 여 마 취를 유발 하 고 2-3 %isoflurane 원뿔을 통해 유지. 눈에 마 취에서 건조를 방지 하기 위해 수 의사 연 고를 사용.
    2. 는 발가락 꼬집어 자극 마 취의 적절 한 평면을 보장 하기 위해 적용 됩니다. 응답을 언급 하는 경우 프로시저 시작.
  4. 마 취 쥐 지 recumbency 난방 패드 (37 ° C)에 놓고 자기 fixator 철회 시스템 ( 그림 2A)를 사용 하 여 팔 다리를 스트레칭.
    참고:가 열 패드의 온도 저체온증, 예방에 대 한 중요 한 마 취 쥐의 체온을 조절할 수 없기 때문.
  5. 쉐이브 전기 면도기를 사용 하 여 복 부 지역. 70% 에탄올 뒤 0.5% 요오드 기반 살 균과 액체 gluconate와 면봉.
  6. 수술 절차를 시작 하기 전에 carprofen (5 mg/kg 체중 (BW), 피하 (SQ))와 쥐를 주입.
  7. 살 균 메스를 사용 하 여 피부를 잘라. 칼 프로세스 아래 1 ㎝ 절 개를 시작 하 고 중간 선 (~ 5-8 cm) ( 그림 2B) 극복.
  8. 수술가 위는 교육을 통해 aponeurosis의 절 개를 사용 하 여 복 부 구멍 ( 그림 2C)에 액세스 하는 알바.
  9. 브래킷으로 ( 그림 2D)를 사용 하 여 복 부 구멍 노출.
  10. 편향 복 부 대동맥과 왼쪽된 신장 ( 그림 2E) 노출 하는 쥐의 오른쪽에 내장. 그것을 폭로 하기 전에 허리 척추를 만져 탈수를 피하기 위해를 사용 하 여 메 마른 젖된 gauzes 멸 균 생리 식 염 수와 내부 장기를 포장.
  11. 층에서 요 추 척추 기관 L4-5의 앞쪽 측면을 노출 하 고 주변 결합 조직 및 근육에서 그들을 격리 사용 thermocautery ( 그림 2F -G).
    참고: Thermocautery는 해 부 동안 출혈 제어 하에 사용 해야 합니다.
  12. L4 척추에서 혈액과 잔여 조직을 제거 하는 멸 균 면봉 멸 균 식 염 수로 포화를 사용 합니다. 살 균 판형 드릴 가시 (지름 ~ 2 mm)를 사용 하 여 척추 체의 노출된 앞쪽 측면의 중앙에 5 m m-깊은 뼈 결함 드릴 (그림 2 H-나).
    참고:만 복 부 피 질과 기본 배수 뼈; 드릴스루 최소한의 압력 등 피 질을 드릴을 하지 마십시오. 참고 골다공증 쥐의 척추는 매우 허약 하다. 면봉을 사용 하 여 결함을 청소 하 고 있는 경우, 출혈을 멈추게 하는 압력을 적용 하.
  13. 쥐 ( 그림 2J) 당 2 결함의 총 만들 L5 척추 골에 반복 단계 2.11.
  14. 복 강 내장 돌아갑니다.
  15. Vicryl 합성 흡수 성 수술 용 봉합을 사용 하 여 (3-0 vicryl 미색 27 " SH 테이퍼) aponeurosis ( 그림 2 K) 봉합에 연속 패턴.
  16. 간단한 중단된 패턴 ( 그림 2 L)에 4-0 monofilament 나일론 비 흡수 봉합 사를 사용 하 여 피부를 닫습니다.
  17. 피부 봉합의 위에 그리고 피부의 완전 한 폐쇄 되도록 그들 사이 국 소 피부 접착제의 적용 100 µ L.
  18. 따뜻한 (37 ℃) lactated 벨 쥐 주입 ' 저체온증과 탈수를 방지 하기 위해 s 솔루션 (1CC/100 g BW, SQ).
  19. 필요에 따라 수술 및 수술 후 통증에 대 한 모든 8-12 h 이전 buprenorphine (0.5 mg/kg BW, SQ)와 쥐를 주입.
  20. 두지 마십시오 동물 무인 sternal recumbency를 유지 하기 위해 충분 한 의식 회복 될 때까지. 또한, 그것은 완전히 복구 될 때까지 다른 동물의 회사를 수술 겪은 동물을 반환 하지 않습니다.
  21. 동물 난방 패드에 회복 후 돌아가기 그것의 감 금.
    참고: 집 쥐 개별적으로 (즉, 별도 새 장에)는 봉합의 쥐 쥐 절단을 방지 하 여 상처.
  22. 차 우 쥐 음식에 도달 수 있도록 몇 일 수술에 대 한 새 장 바닥에 페 트리 접시에 물에 담가 놓습니다.
  23. Carprofen (5 mg/kg BW, SQ) 통증 모든 24 h에 대 한 수술 24 시간 후 필요에 따라 관리.
  24. 동물 2% 미만 동안 피부 봉합을 제거 isoflurane 마 취 10-14 일 후 작업.

3. MicroCT 스캔

참고: 타이밍은 동물 마다 30 ~ 40 분.

  1. 수술 다음 날에는 마 취 기계 중앙 청소 시스템에 연결 된 유도 실에서 골다공증성 쥐 장소. 100% 산소에 5 %isoflurane 사용 하 여 마 취를 유도 하 고 2-3 %isoflurane 원뿔을 통해 유지.
  2. 쥐 vivo에서 µCT 스캐너를 사용 하 여 검색 합니다. 뼈 재생의 경도 분석에 대 한 검사를 반복.
    참고: 모든 동물 (즉, x-선 에너지, 매체, 강도, 복 셀 크기와 이미지 해상도 스캔)에 동일한 설정을 사용 하 여 검색을 확인 한 simila에r 방향입니다. 예: x 선 에너지, 55 kVP; 전류, 145 µ A; 복 셀 크기, 35 µ m; 증가, 115 µ m; 그리고 통합 시간, 200 ms; 와 함께 PBS에서 샘플. Bouxtein 외. 참조 추가 설명 및 설치류 µCT 뼈 미세의 평가 대 한 검색에 관련 된 고려 사항에 대 한 34. 이상적으로, 가능한 높은 스캔 해상도 사용 모든 검사; 그러나, 높은 해상도 스캔 긴 수집 시간을 요구, 큰 데이터 세트를 생성 고 동물 더 이온화 방사선을 노출. 후자는 원치 않는 효과 줄된 골절 치유를 포함 하 여 발생할 수 있습니다. 따라서, 추가적인 데이터 및 검색 시간 사이의 거래와 신중 하 게 고려해 야.

4. 척추 분리

참고: 타이밍은 샘플 당 20-30 분.

  1. 그림 3A에서 같이 관심의 척추를 등고선-I. 인접 척추에 속하는 부분을 제외 하는 동안 척추의 모든 부분을 포함 하도록 확인 하십시오.
    1. 클릭 " µCT 평가 프로그램 " 하 고 메뉴에서 샘플을 선택 합니다.
    2. 마우스를 사용 하 여 각 슬라이스에 컨투어.
    3. 사용 된 " Z " 다음 슬라이스로 이동 바.
  2. Contoured 척추를 별도 파일로 저장 ( 그림 3J -K)를 클릭 하 여 " 파일 " → " 저장 GOBJ " 조각 2.

5. 경도 양적 평가 대 한 정의 목소리 야의

참고: 다음 단계 (참조 척추) 수술 후 1 일에서 또는 후속 시간 포인트 (스캔 인지에 따라 달라 집니다 척추를 대상).

  1. 참조 척추.
    참고: 타이밍 샘플 당 20-30 분입니다.
    1. Z-회전, 결함의 센터에서 XY 슬라이스를 사용 하 여 여백의 각도 측정 ( 그림 4A -B).
      1. Z 평면에는 척추 결함이 대부분 명확 하 고 화면 캡처는 척추 골의 영역으로 이동.
      2. 프레 젠 테이 션 소프트웨어에서 결함에 맞는 사각형 모양의 개체를 준비.
      3. 그런 결함 얼굴 위쪽 척추의 이미지를 회전 및 결함 여백은 사각형의 양쪽에 병렬.
      4. 회전의 각도 측정 (이미지를 마우스 오른쪽 단추로 클릭 → " 형식 그림 " → " 크기 ").
      5. 측정된 각도 사용 하 여 ( 그림 4C) 척추를 회전.
        1. 새로운 DECterm 창을 열고 (" 세션 관리자 " → " 응용 프로그램 " → " DECterm ").
        2. 실행 " ipl ":
        3. Ipl > turn3d
        4. -입력 [in] >
        5. -출력 [out] >
        6. -turnaxis_angles [0.000 90.000 90.000] > 90 90 0
        7. -turnangle [0.000] > 측정된 각도
        8. -img_interpol_option [1] >
    2. X-회전, 결함의 센터에서 YZ-슬라이스를 사용 하 여 여백의 각도 측정 ( 그림 4D -E). 측정된 각도 사용 하 여 ( 그림 4 층) 척추를 회전.
      1. 클릭 " YZ "에 " uCT 평가 프로그램 " 및 반복 단계 5.1.1.1-5.1.1.5.2.
      2. Ipl > isq
      3. -[에] aim_name >
      4. -isq_filename [default_file_name] > 삽입 ISQ 파일 디렉터리 (예: " DK0: [MICROCT. 데이터입니다. GAZIT입니다. MAXIM.80.DAY1]Z2102970입니다. ISQ ")
      5. -pos [0 0 0] >
      6. -희미 한 [-1-1-1] >
    3. ZX 평면 XY-평면을 변경 하 여 회전 된 척추를 플립.
      1. 새로운 DECterm 창을 열고 (" 세션 관리자 " → " 응용 프로그램 " → " DECterm ").
      2. 실행 " ipl ":
      3. Ipl > 플립
      4. -입력 [in] > 밖으로
      5. -입력 [out] > out2
      6. -new_xydir [yz] > zx
    4. 정의 목소리 야.
      1. 무승부는 원형에서 원형 윤곽 아이콘을 선택 하 여 결함의 센터에서 분할 영역을 사용 하 여 결함의 컨투어 " uCT 평가 프로그램 " ( 그림 6A). 등고선을 결함 ( 그림 6B)에서 모든 조각에 그것을 붙여 복사.
        참고: 모든 결함은 동일한 절차를 사용 하 여 생성 된, 이후 분석 조각 하 고, 그 후, 모든 샘플에 대 한 전체 볼륨 (TV)의 동일한 수.
  2. 대상 척추.
    참고: 타이밍 샘플 당 10-20 분입니다. 대상 및 이미지 분석 소프트웨어의 메인 윈도우를 참조 척추의
    1. 부하는 DICOM 파일.
      참고: 회색 음영 값 변화를 피하기 위해, 같은 정의 출력 데이터 형식 로드 메뉴에 원래 DICOM 파일로.
    2. 레지스터 참조에 척추입니다.
      1. 발사는 " 3 차원 복 등록 " 모듈 입력으로 참조 척추는 " 베이스 볼륨 " 고로 대상 척추는 " 일치 볼륨. " 클릭 " 등록 " 척추 등록 ( 그림 5).
    3. 는 등록 된 파일을 사용 하 여 동일한 데이터 형식 및 µCT 환경에 가져올 저장.
    4. 는 목소리 야 적용 됩니다. 클릭 하 여 등록된 대상 척추를 참조 척추에 대해 정의 된
      1. 적용은 목소리 야 " uCT 평가 프로그램 " → " 파일 " → " 부하 GOBJ " 이전에 만든 GOBJ를 선택 하 고. 목소리 야와 결함 동심 되는지 확인 하십시오.

6. MicroCT 분석

참고: 타이밍은 샘플 당 10-20 분.

  1. 보내기 µCT 평가 프로그램 ( 그림 6)를 사용 하 여 평가 대 한 목소리 야.
    참고: 모든 내가 분석할 때 동일한 매개 변수를 사용 하 여 있는지 확인 합니다. 임계값 생략 하는 최소한의 손실 뼈의 배경 잡음을 충분히 높게 설정 되어 있는지 확인 합니다. 방사선 불 투과성 소재를 사용 하는 경우 다양 한 전략 뼈 형성 분석에 사용 될 수 있습니다. 소재 및 뼈 조직 밀도 차이 경우는 소재 35 , 36 개 세그먼트 수 있습니다. 그렇지 않으면, 조사 실험 그룹 사이 뼈 형성에 차이 평가 질적 수.

7. 안락사

  1. PPlace 골다공증성 쥐 유도 실에서 마 취 기계에 연결. 100% 산소를 사용 하 여 5 %isoflurane 마 취 유도.
  2. 코 콘을 통해 마 취를 유지 하 고 안락사를 수행 incising 양자 매 37 생산 하 흉으로.

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 프로토콜을 사용 하 여, 하나 이미지 수와 n의 재생성을 계량 다른 시간 지점에서 8 모델된 골다공증성 척추 결함을 =. 등록 절차에 의해 얻은 해부학 경기 모든 시간 지점에서 동일한 목소리 야의 분석에 대 한 수 있습니다. 이 원래 결함의 여백은 더 이상 인식할 수 있는 경우에 정확한 경도 3D histomorphometric 분석 결과. 우리는 뼈 재생 (그림 7)의 경도 평가 대 한 예를 들어 5 시간 포인트 (1 일, 2 주, 4 주, 주 8, 및 12 주)을 사용. 재생 ( 그림 7A에서 그림)로 3D 영상과 2D 횡단면의 질적 평가 뼈 수량 (BVD) 및 품질 (광고) (그림 7B)의 양적 비교 하 여 평가할 수 있습니다. 새로 형성된 된 뼈에 대 한 다음과 같은 형태학 인덱스를 확인할 수 있습니다...

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Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

골다공증은 척추 압축 골절은 척추와 척추 체의 붕괴에서 그 결과에 로드가 증가 의해 발생의 가장 널리 퍼진 원인. 그러나, 그것은 실질적으로 진정한 비슷한 척추 붕괴를 복제 하는 설치류에서 상해를 생성할 수입니다. 대신, 연구원은 OVCFs16,17,18,19,20,,2124 를 모방 하기 위해 척추 신체 중앙에 원통형 무효 만들 , 38 , 39. 결함 크기 측면에서 문학에 아니 일관성이 있기...

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 연구에 대 한 재생 의학 (CIRM) (TR2 01780) 캘리포니아 연구소에서 교부 금에 의해 지원 되었다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

연구에 대 한 재생 의학 (CIRM) (TR2 01780) 캘리포니아 연구소에서 교부 금에 의해 지원 되었다.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
IsofluraneMWI Animal Health, Pasadena, CA501017
BetadineSolutionMWI Animal Health, Pasadena, CA4677
클로르헥시딘 글루코네이트 2% 스크럽MWI Animal Health, Pasadena, CA510083
이소프로필 알코올 70%-quartMWI Animal Health, Pasadena, CA501044
CarprofenMWI Animal Health, Pasadena, CA26357
부프레노르핀 0.3 mg/mLMWI Animal Health, Pasadena, CA56163
Ovariectomized Athymic nude ratsHarlan Laboratories, Indianapolis, INHsd:RH-Foxn1 rnu
저칼슘 식품Newco Distributors, Inc., CA1814948 (5AV8 AIN-93M w/저칼슘)
인산염 완충 식염수Life Technologies Corporation
DermabondJ AND J ETHICONDHVM12
마취기Patterson ScientificTEC 3EX
슬라이드 탑 인덕션 챔버Patterson Scientific78917833
ProStation 가열식 워크스테이션Patterson Scientific78914731
외과용 드레이프HALYARD HEALTH INC89101
자기 고정 장치 수축 시스템Fine Science Tools, Inc., CA18200-50
해부 가위, 10cm, 곡선, SSWorld Precision Instruments, FL14394
홍채 가위, 11.5cm, 45 ° 앵글, 톱니모양, 샤프/샤프World Precision Instruments, FL503225
집게, no. 5World Precision Instruments, FL555048FT
마이크로 모기 지혈 집게World Precision Instruments, FL503360
멸균 면 거즈Medtronic, MINNEAPOLIS, MN9024
흡수 창 - 장착/멸균파인 사이언스 도구, CA18105-01
주사기, 1 mLTERUMO TERUMO MEDSS-01T
바늘, 25 게이지BD MED SYS 주입 시스템 305127
층류 후드BakerSterilGARD e3-Class II Type II Biosafety Cabinet
Thermal Cautery UnitWorld Precision Instruments, FL501292
Micro-Drill OmniDrill115/230VWorld Precision Instruments, FL503598
마이크로 드릴용 트레핀, 직경 2mm정밀 과학 도구, CA18004-20
3-0 Vicryl 염색되지 않은 27" SH 테이퍼J AND J ETHICON1663G
4-0 에틸론 블랙 18" PC3 기존 절단J AND J ETHICON1954G
Conebeam in vivo microCT (vivaCT 40)Scanco MedicalvivaCT 40
SCANCO Medical microCT 시스템 소프트웨어 제품군Scanco MedicalvivaCT 40
Analyze softwareBiomedical Imaging, Mayo Clinic, Rochester, MNAnalyze 12이미지 분석 소프트웨어
Veterenery Eye 연고
14190250

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wang, M. L., Massie, J., Perry, A., Garfin, S. R., Kim, C. W. A rat osteoporotic spine model for the evaluation of bioresorbable bone cements. Spine J. 7 (4), 466-474 (2007).
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