신생아 Capsaicin 치료에 의해 유도 된 아 토 피 성 피부염의 쥐 모델에 포 름 알 데히드의 노출의 효과

요약

여기 신생아 capsaicin 치료 쥐 및 아 토 피 성 피부염에 포름알데히드 흡입의 효과 조사 하기 위해 증발된 포름알데히드의 노출에 아 토 피 성 피부염을 유발 하는 방법을 설명 합니다.

초록

아 토 피 성 피부염 만성 습 진 pruritic 돌아가는 하 고 선진국에서 특히 세계 통용 한다. 유전과 환경 요인 사이의 복잡 한 상호 작용으로 아 토 피 성 피부염의 병 태 생리학에 중요 한 역할을 알려져 있습니다. 그러나, 우리는 여전히이 질환의 pathogenesis의 상세한 그림을 부족합니다. 따라서, elucidating 아 토 피 성 피부염의 진행에 대 한 적절 한 동물 모델을 개발 하는 중요성의 이다. 또한, 질병의 이해를 확장 하는 아 토 피 성 피부염에 공기 오염 물질 같은 환경 요인의 영향을 조사 합니다. 여기, 우리가 쥐 신생아 capsaicin 치료와 아 토 피 성 피부염 및 유아 및 청소년 아 토 피 성 피부염의 개발에 대 한 효과 나타내기 위해 쥐 포 름 알 데히드의 일정 농도의 노출에 대 한 프로토콜을 유도 하는 방법 설명 기간입니다. 이러한 프로토콜 성공적으로 여러 실험에 적용 되 고 다른 물질에 사용할 수 있습니다.

서론

아 토 피 성 피부염 (광고) 진행에 포름알데히드 (FA) 흡입의 효과가 우리 광고 유도 대 한 프로토콜을 설치 하 고 FA의 만성 노출에 대 한 기존의 순환 챔버 개발.

광고는 유전과 환경 트리거^1,2사이 복잡 한 상호 작용에 기인 하는 만성 염증 성 피부 질병입니다. 적절 한 동물 모델은 전 임상 상태에서 광고를 공부 해야 합니다. 이 때 가장 중요 한 환경 요인의 영향 아래 광고의 pathogenesis elucidating. 또한, 더 나은 광고 진행에 환경 트리거 효과 조사, 개별 환경 요소를 분리 하 여 노출의 정도 계량 필수적 이다.

우리는 신생아 capsaicin 처리에 의해 유도 하는 광고의 새로운 쥐 모델을 증명 하고있다. 이 광고 모델³ epicutaneous 아니라, 유전자 조작 광고 모델, 광고⁴의 자발적인 마우스 모델에 의해 유도 된 광고 모델 같은 다른 광고 모델을 통해 몇 가지 장점이 있다. 첫째,이 모델은 유아 광고에 해당 광고의 다른 자연 스러운 마우스 모델 보다 이전 NC/Nga 마우스 같은 3 주의 나이에 광고와 같은 증상을 개발 합니다. 경우에 따라 유전자 조작 광고 모델과 달리 광고 모델의 증상 가시고 고 20 주 기간 동안 자발적으로 재발. 또한, 모델에서 광고 같은 증상의 유도 과정 더 유도 과정의 관점에서 알레르기 접촉 피부염과 유사한 epicutaneous 민감성 모델 보다 쉽습니다.

우리는 유아 및 청소년 시기에 광고의 개발에 FA 흡입의 효과 공부 하는 아크릴 유리 챔버와 기존의 의료 산소 레 귤 레이 터⁵ 를 사용 하 여 동물 모델에 FA 노출에 대 한 새로운 프로토콜을 도입 했습니다. 레 귤 레이 터는 동물의 가스 흐름 율을 조정 하 여 일정 농도 솔루션 농도에 노출 수 있었습니다. 이전 연구는 동물 모델에 FA의 노출의 여러 가지 방법으로 보고 있다. Xu 그 외 는 FA에 솔루션 직접 피부⁶에 적용 된 노출 메서드를 설명 합니다. 또 다른 최근 연구는 FA 가스 노출 모델 4912⁷전문된 휘발성 용 매 생성기를 사용 하 여 프로토콜을 해결. 이전 연구의 방법에 비해, 새로운 방법을 더 쉽게 장착 하 고 FA 이외에 다른 솔루션에 적용할 수 있습니다.

프로토콜

여기에서 설명한 모든 방법을 승인 국제 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 한국 대학 대학의 약. 생 후 6 주, 경험 enthansasia를 유발 하 고 수집할 수 있습니다 피부와 쥐의 혈 청 등 다양 한 샘플.

1. 신생아 Capsaicin 치료에 의해 광고의 유도

1. 준비 5 mg/mL capsaicin 솔루션, 1 mL 트윈 80의 그리고 100% 에탄올 15 mL 원뿔 튜브에의 1 mL에 capsaicin의 50 밀리 그램을 추가.
2. 원뿔 튜브에 정상적인 염 분의 8 mL를 추가합니다. 분리 된 레이어가 없는 볼 수 있습니다 때까지 튜브를 적극적으로 악수
3. 중간 및 신생아 Sprague-Dawley 쥐의 목에의 뒷면에 피하 조직에 주입 capsaicin 솔루션 (10 µ L/g).
   1. 제공 (중요) 출생 후 48 h 12 h 사이 capsaicin.
      참고: 주사 몇 일 지연 되는 경우 피부염 개발 하지 것입니다 또는 그것은 몇 주 동안에만 지속 됩니다. 주사는 너무 일찍, 호흡 곤란 심한 통증으로 인해 발생할 수 있습니다.
   2. Capsaicin 주입으로 인해 호흡기 체포에서 신생아 쥐를 방지 하기 위해 신생아 호흡을 격려 하거나 호흡 된다 정상. capsaicin 유발 통증 수 이후 때까지 산소 챔버에는 신생아를 유지의 가슴을 밀어 호흡 억제, 전신 마 취를 추가 가능 하 게 호흡 어려움을 악화 수 있습니다. 따라서, 경험 하지 사용 해야 anesthesics 쥐의 생존을 증가.

2. 소 양 증 및 피부염 광고의 쥐 모델에서의 평가

1. 자발적인 긁 동작을 계산 하 여 소 양 증의 측정
   1. 준비 플라스틱 챔버 (20 cm x 30 cm x 20 cm) 전체 범위에 대 한 수 있도록 거울 장착 보기 및 호흡을 쥐 수 있도록 구멍.
   2. 설정 하 고 제대로 미러와 쥐의 전면 보기를 동시에 기록 하는 디지털 비디오 카메라를 조정.
   3. 플라스틱에 장소 쥐 챔버와 오프닝에서 방지 하기 위해 무거운 개체와 챔버의 천장 커버.
   4. 1 시간에 대 한 쥐의 자발적인 행동을 기록, 비디오 클립을 재생 하 고 긁는 행동의 수를 계산.
2. 득점 시스템을 사용 하 여 피부 장애의 평가
   1. 유도 실에서 쥐를 놓습니다.
   2. 2 L/min에 산소 유량 계 설정 유량과 마 취에 대 한 3 %isoflurane 기화 기 조정.
   3. 범위와 귀와 쥐의 다른 부분에 피부염의 심각도 식별.
   4. 0.25 c m ²와 다음 표 1에 의해 피부 장애의 심각도로 피부 장애의 정도 대 한 단위 크기 정의: 심각도 인덱스; 정도의 범위와 심각도 곱하여 피부염 점수 (피부염에 점수를 보고 < 강력한 클래스 "xfig" = > 그림 1B).

3. 동물에 가스 FA의 노출

1. 흡입 챔버의 준비
   1. 아크릴 유리 상자 준비 (55 cm x 40 cm x 35 cm) 반대편에 2 개의 출구는.
   2. 주의입니다. FA 가스의 순환, 입구 보다 출구를 배치 하 고 콘센트의 크기는 입구의 그것 보다 더 큰 게.
   3. 주의입니다. 내부 가스 농도 콘센트의 또 다른 측면에서의 측정에 대 한 폐쇄가 될 수 있는 3 개의 작은 구절 드릴.
   4. 연결 튜브를 두 콘센트입니다. 순환 후드 나 가스의 방출에 대 한 건물 외부 콘센트 튜브를 놓고 의료 산소 레 귤 레이 터에 다른 콘센트 튜브를 연결.
   5. 아크릴 유리 상자 안에 기존의 쥐 감 금 소를 배치.
   6. 5 주 (2 시간/일 및 5 일/주)에 대 한 출생 후 1 주일에서 쥐를 케이지에 넣어.
   7. 아크릴 유리 상자 가스 누설을 방지 하기 위해 가능한 한 단단히 밀봉.
      참고: 꽉 씰링에 대 한 챔버 뚜껑 고무를 포함 해야 합니다. 집착 영화 꽉 밀봉 챔버 포장 적용.
2. 의료 산소 레 귤 레이 터를 사용 하 여 기체 FA의 세대
   1. 물 1 L에 FA의 5 g을 분해.
   2. 가습기 병 의료 산소 레 귤 레이 터의 0.5 %FA 솔루션을 넣어.
   3. 레 귤 레이 터에 입구 관을 연결한 후는 레 귤 레이 터 설정 하 고 5 L/분에 흐름 속도 설정
   4. 솔루션 농도 및 약 실에 있는 가스의 농도 결정 하기 위해 유량 조정.

결과

나이의 7 주에서 capsaicin 치료 광고 쥐 모델의 광고 같은 피부 염증 그림 1A에 제공 됩니다. Capsaicin 치료 광고 쥐 모델의 강력한 긁 동작 비디오 1에 표시 됩니다. 신생아 capsaicin 치료 elicited 피부염 악화 긁힘 행동 쥐의 나이, 3 주 및 광고와 같은 증상이 몇 주 (그림 1B, C)에 대 한 유지. 정도 덜 심각한, 하지만 일부 쥐의 초기 광고 같은 증상 (그림 1D)의 후 나이 16 주에 재발 피부염에서 고통. 또한, 혈 청 IgE 수준, 광고 심각도⁸에 대 한 생물 학적 마커 인 capsaicin 치료 광고 쥐 모델 (그림 1E...

토론

쥐에서 광고 같은 증상의 유도 대 한 여기에 설명 된 프로토콜 광고 이상 공부에 대 한 적응 고 약물 검사에 대 한 심사 도구로 사용 될 수 있습니다. Capsaicin 치료 쥐 기체 FA의 노출에 대 한 악기는 다양 한 동물 모델에 다양 한 가스에 노출의 효과 평가 하기 위해 적용할 수 있습니다.

신생아 capsaicin 치료 광고 모델 다른 아 토 피는 DNCB 치료 모델⁹ 및 epicutaneous 민감성 모델⁴, 모델 보다는 더 간단한 절차에 의존 하며 NC/Nga 마우스⁴보다 더 저렴 한 가격 이다. 광고 모델의 광고 같은 증상의 발현은 일치 합니다. 또한, 일부의 경우,이 프로토콜³어떤 추가 치료 없이 영향을 받는 쥐에 자발적인 재발 광고 같은 피부 병 변 elicits. 과량 capsaicin 주입...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
의료용 산소 조절기	Yuyao Jiahua 의료		제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
튜브			제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
아크릴 챔버	Taejin Acryl
	플라스틱 챔버	Taejin 아크릴	제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
파라 포름 알데히드, 분말	Sigma	158127	제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
. Wrap filme	Uniwrap		제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
Capsaicin	Sigma	M2028	제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
Tween 80	Sigma	P4780	제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다
디지털 비디오 카메라	Sony	HDR-CX380y	않습니다. 결과에 영향을 미침
Isoflurane	JW 제약		제조업체는 결과에 영향을 미치지 않습니다