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방법 논문

레이저 도플러: 췌 장 섬 Microvascular Vasomotion에 Vivo에서 측정 하기 위한 도구

7.7K 조회수

DOI:

10.3791/56028

2018년 3월 8일

이 논문에서

요약

췌 장 섬 microvascular vasomotion 섬 혈액 분포를 조절 하 고 섬 β 세포의 생리 기능을 유지 합니다. 이 프로토콜은 췌 장 섬 microvascular vasomotion에 vivo에서 의 기능 상태를 확인 하 고 췌 장 섬 미세 췌 장 관련 질병에의 기여를 평가 하는 레이저 도플러 모니터를 사용 하 여 설명 합니다.

초록

미세 혈관의 기능 상태, microvascular vasomotion 산소와 영양분의 공급과 이산화탄소와 폐기물의 제거에 대 한 중요 하다. Microvascular vasomotion의 장애는 미세 혈관 관련 질병의 발달에 있는 중요 한 단계를 수 있습니다. 또한, 매우 vascularized 췌 장 섬 내 분 비 기능을 지원 하기 위해 적응입니다. 이 점에서 그것은 췌 장 섬 microvascular vasomotion의 기능 상태 췌 장 섬 기능에 영향을 수 있습니다 추론 가능한 보인다. 췌 장 섬 microvascular vasomotion의 기능 상태의 병 적인 변화를 분석 기여를 결정 하는 가능한 전략 있을 수 있습니다 그 췌 장 섬 미세 혈관 관련된 질환, 당뇨병 mellitus, 같은 게 췌 장 염, . 따라서,이 프로토콜은 췌 장 섬 microvascular vasomotion의 기능 상태를 확인 하 고 설정 매개 변수 (평균 혈액 관류, 진폭, 주파수, 및 상대를 포함 하는 레이저 도플러 혈액 흐름 모니터를 사용 하 여 설명 합니다. 췌 장 섬 microvascular vasomotion의 속도) microcirculatory 기능 상태의 평가 위해. Streptozotocin 유도 당뇨 마우스 모델에서 췌 장 섬 microvascular vasomotion의 장애인된 기능 상태를 관찰합니다. 결론적으로, 췌 장 섬 microvascular vasomotion에 vivo에서 평가 하기 위한이 방법은 췌 장 섬 질병에 관련 된 메커니즘을 계시 할지도 모른다.

서론

미세 혈관의 기능 상태를 매개로 microvascular vasomotion 납품 및 산소, 영양분, 호르몬의 교환에 대 한 책임 및 대사 제품, 이산화 탄소, 세포 폐기물 등의 제거에 중요 한 1. microvascular vasomotion 또한 혈액 흐름 분포 및 따라서 로컬 microcirculatory 혈압과 염증, 부 종에 많은 질병을 일으킬 수 있는 응답을 영향을 미치는 조직 관류를 조절. 따라서, microvascular vasomotion 장기2,3,4, 조직 및 구성 세포의 생리 기능을 유지 하기 위해 매우 중요 하다. Microvascular vasomotion의 장애는 미세 혈관 관련 질병5의 개발에 중요 한 단계 중 하나를 수 있습니다.

레이저 도플러 관측 및 미세 혈관 연구6의 분야에서 정량화 처음 개발 되었다. 이 기술은 다른 기술 방식 (예: 레이저 반점7, 경 피....

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프로토콜

모든 동물 실험은 모든 관련 지침, 규정 및 규제 기관에 따라 실행 했다. 지도 및 승인의는 연구소의 미세 동물 윤리 위원회 (IMAEC)에 베이징 조합 의학 대학 (PUMC) 현재 프로토콜 입증 되 고 수행 되었다.

1입니다. 동물

  1. 실험을 시작 하기 전에 12-h 빛 어두운 주기의 아래 케이지, 제어 온도 (24 ± 1 ℃)와 습도 (55 ± 5%), 3 개의 BALB/c 마우스를 유지. 일반 식품 및 물 쥐를 수 있습니다.
  2. 임의로 나눌 쥐 비 당뇨병 제어 그룹 및 당뇨병 그룹. 정확 하 게 각 개별 마우스 무게 고 각 마우스의 몸 질량을 사용 하 여 주입 볼륨을 계산.
  3. Streptozotocin (STZ) 주입 하기 전에 4 h에 대 한 마우스를 빨리 하 고 실험 주 1에 정상적으로 정기적으로 물을 제공 합니다.
  4. PH 4.3에서 0.1 M 나트륨 구 연산 염 버퍼를 준비 합니다. Microcentrifuge 1.5 mL 튜브에는 솔루션의 1 mL를 넣고 microcentrifuge 튜브 빛에 노출을 피하기 위해 알루미늄 호 일에 포장.
  5. 나트륨 구 연산 염 버퍼 (pH 4.3) 사용 하기 전에 5 mg/mL의 최종 작업 집중에에서 STZ 해산.
  6. ....

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결과

Microvascular vasomotion 측정 레이저 도플러 기기 반도체 레이저 다이오드를 장착 사진 그림 1A에 표시 됩니다. 그림 1B사용자 인터페이스 소프트웨어를 제공. 위에서 언급 한 방법을 사용 하 여, 췌 장 섬 microvascular vasomotion의 hemodynamic 매개 변수는 비 당뇨병 제어 및 당뇨병 쥐에 대 한 발견 했다. 다양 한 기술, 레이저 도플러 flowmetry를 포함 하 여 반영 및 흩어져 빛, 적외선 분광학, 그리고 때문에 처음 정의 되었다 microvascular vasomotion 공부 하 사용 되었습니다 이미징 기술. 표 1 연구 그룹 및 당뇨병과 관련 된 질병에 미세 혈관의 역할을 결정 하기 위해 레이저 도플러 기술을 사용 하는 게시 된 기사를 요약.

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토론

Microvascular 역 기능 (예: 당뇨병, 급성 췌 장 염, 주변 microvascular 질병, )을 포함 하는 경우, 일부 질병 감소 혈액 흐름 이어질. 혈액의 흐름에 변화, 이외 중요 한 지표, microvascular vasomotion 같은 미세 혈관의 기능 상태를 반영 하는 있다. 특정 표시기, microvascular vasomotion, microvascular 침대에 microvascular 톤의 진동으로 일반적으로 정의 됩니다. 현재 프로토콜 모니터링 시스템 microvascular 혈액 관류 직접 시각화 및 microvascular vasomotion의 기능 상태의 정량 분석에 대 한 수 있습니다. 우리의 microcirculatory 평가 접근을 선택적으로 대상된 조직 및 장기에 혈액 관류에서 동적인 변화를 식별 하 여 적용할 수 있습니다. 보고서 레이저 도플러 당뇨병에 microvascular 혈액 관류의 역할을 사용 하 여에 대 한 다른 그룹에 의해 출판 및 그 .......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

이 작품은 베이징 조합 의학 대학 청소년 기금 및 중앙 대학 (보조금 번호 3332015200)에 대 한 근본적인 연구 기금에서 교부 금에 의해 지원 되었다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
MoorVMS-LDF2Moor InstrumentsGI80PeriFlux 5000 (Perimed Inc.)은 데이터를 수집하는 대체 장치로 사용할 수 있습니다
MoorVMS-PC 소프트웨어Moor InstrumentsGI80-1MoorVMS-LDF2
교정 스탠드소프트웨어 Moor InstrumentsGI-cal교정 도구
교정 베이스Moor InstrumentsGI-cal교정 도구
캘리브레이션 플럭스 표준Moor InstrumentsGI-cal캘리브레이션 도구
One Touch UltraEasy 혈당계Johnson and Johnson#1955685고혈당 확인
One Touch UltraEasy 스트립Johnson and Johnson#1297006고혈당 확인
스트렙토조토신Sigma-AldrichS0130시트르산나트륨 완충액(pH 4.3)에 용해
펜토바르비탈 나트륨시그마-알드리치P3761작동 농도 3 %
탄올Sinopharm Inc.200121작업 농도 75 %
설탕Amresco335작업 농도 10 %
의료 거즈China Health Materials Co.S-7112외과
용 무딘 코 집게Shang Hai Surgical Instruments Inc.N-551외과
수술 테이프3M Company3664CU외과
거즈 스폰지Fu Kang Sen Medical Device CO.BB5447외과
메스Yu Lin Surgical Instruments Inc.175C외과
피부 가위Carent255-17외과
봉합Ning Bo Surgical Instruments Inc.3325-77수술용
주사기 및 25-G바늘MISAWA Inc.3731-2011스케일 : 1 ml
. 에용 사

참고문헌

  1. Aalkjaer, C., Nilsson, H. Vasomotion: cellular background for the oscillator and for the synchronization of smooth muscle cells. Br J Pharmacol. 144 (5), 605-616 (2005).
  2. Serne, E. H., de Jongh, R. T., Eringa, E. C., IJzerman, R. G., Stehouwer, C. D.

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재인쇄 및 허가

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