유체역학 신장 골반 주입은 신장에서 단백질의 비 바이러스 성 표현에 대 한

Lauren E. Woodard; Richard C. Welch; Felisha M. Williams; Wentian Luo; Jizhong Cheng; Matthew H. Wilson

doi:10.3791/56324

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방법 논문

유체역학 신장 골반 주입은 신장에서 단백질의 비 바이러스 성 표현에 대 한

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DOI:

10.3791/56324

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2018년 1월 8일

Lauren E. Woodard¹^,²^,³ , Richard C. Welch² , Felisha M. Williams² , Wentian Luo² , Jizhong Cheng³ , Matthew H. Wilson¹^,²^,³

¹Department of Veterans Affairs, Tennessee Valley Healthcare System, ²Departments of Medicine and Pharmacology, Vanderbilt University Medical Center, ³Department of Medicine, Baylor University College of Medicine

이 논문에서

요약

이 프로토콜에는 신장에 특히 transgene 식 생산 하 신 골반을 통해 마우스 신장에 플라스 미드 DNA를 주입 하는 방법을 설명 합니다.

초록

유체역학 주입 transfect 다양 한 조직 플라스 미드 DNA와 다른 물질을 지역, 고압 환경을 만듭니다. 유체역학 꼬리 정 맥 주입, 예를 들어 간 페 될 수 있는 잘 설립 방법입니다. 이 원고는 신장 관련 유전자 발현에 대 한 플라스 미드 DNA와 직접 마우스 신장의 주입에 의해 유체역학 원리의 응용을 프로그램을 설명합니다. 쥐 취 고 신장 신장 골반에 직접 플라스 미드 DNA를 포함 하는 솔루션의 빠른 주입 다음 측면 절 개 하 여 노출 됩니다. 바늘은 10 초에 대 한 장소에 보관 하 고 절 개 사이트 봉합. 다음 날, 라이브 동물 영상, 서쪽 오 점 또는 immunohistochemistry 유전자 발현 분석 결과를 사용할 수 있습니다 또는 관심사의 단백질의 검출에 사용 되는 선택의 transgene에 적합 한 다른 분석 실험. 유전자 발현을 연장 하기 위해 게시 방법은 transgene 면역 반응을 억제 하 중재 하는 transposon transgene 통합과 cyclophosphamide 치료를 포함 합니다.

서론

유체역학 꼬리 정 맥 주입 기술은 마우스 간¹^,²유전자 발현의 높은 수준을 달성 하기 위해 일반적으로 사용 되는 되고있다. 신장은 또한 훨씬 더 낮은 수준, 약 100 적은³에서이 기술에 의해 페. 여기에 설명 된 유체역학 신장 골반 사출 간⁴^,^{5 이전 설립 되었습니다 동일한 유체역학 원리를 사용 하 여 물리적 수단을 통해 장기 식의 특이성을 제어 하는 간단한 방법 제공},⁶, 근육 및 다른 기관⁷^,⁸. 이 메서드는 압력을 사용 하 여 셀 vivo에서 동물에 transfects와 동시에 신속 하 게 기관에 손상을 유발 셀에 액체 포함 DNA를 강제로 속도 해결⁹. 인슐린 주사기에 의해 단일 주사 함께 측면 절 개¹⁰ 통해 신장 시각화 확고 외과 기술을 사용 하 여, 우리는 다양 한 종류의 신장 세....