외 인 항 원 비 유전 표면 장식 Avidin 비타민 b 복합체 시스템을 통해 진 균 bovis BCG 백신에의 표현

Ting-Yu Angela Liao; Alice Lau; Joseph Sunil; Vesa Hytönen; Zakaria Hmama

doi:10.3791/56421

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방법 논문

외 인 항 원 비 유전 표면 장식 Avidin 비타민 b 복합체 시스템을 통해 진 균 bovis BCG 백신에의 표현

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DOI:

10.3791/56421

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2018년 1월 31일

Ting-Yu Angela Liao¹ , Alice Lau¹ , Joseph Sunil¹ , Vesa Hytönen² , Zakaria Hmama¹

¹Division of Infectious Diseases, Department of Medicine and Vancouver Costal Health Research Institute, University of British Columbia, ²Institute of Biomedical Technology, University of Tampere

이 논문에서

요약

세균성 표면에 급속 한 항 원 디스플레이 대 한 새로운 기술, 표면 biotinylation 단위체 avidin와 퓨전에 관심사의 단백질에 노출에 의해 다음을 포함 하 제공 됩니다. 선택 된 항으로 BCG를 성공적으로 로드 표면 장식 전통적인 유전 접근을 대체할 수 있는 제안 그것의 immunogenicity를 향상 시킵니다.

초록

결핵 (TB)는 심각한 전염 성 병과 사용 가능한 백신 M. bovis 균 메 게 랭 (BCG)는 안전 하 고 효과적인 어린이 심한 결핵 수 막 염과 결핵 전파의 일부 형태에 대 한 보호 하지만 보호 하기 위해 실패 폐 결핵에 대 한 질병의 가장 일반적인 형태입니다. 현재 BCG를 개선 하기 위해 유망 전략 immunodominant M. 결핵 (Mtb)를암호화 하는 유전자와 그것의 전이 의존-특정 항 원 또는 항 원 자극 하는 것이 공동 요소를 인코딩 하는 유전자와 보완성 셀을 제시. 이러한 접근을 주요 한계는 낮은 효율, 낮은 안정성, 그리고 불확 실한 식 벡터의 안전 수준을 포함합니다. 이 연구에서 우리는 백신 개선, BCG 보완성의 해당 유전자를 인코딩 하는 플라스 미드와 변환 보다는 박테리아의 표면에 대 한 관심의 외 인 단백질로 구성 된 다른 접근 방법 제시. 첫째, 관심사의 단백질은 표현 융합 표준 대장균 에서 단위체 avidin 식 시스템 biotinylated BCG의 표면을 장식 하는 데 사용 하는 고. 동물 실험 꾸며져 대리 ovalbumin 항 BCG 표면을 사용 하 여 수정 된 박테리아는 완벽 하 게 면역성 및 특정 T 세포 응답을 유도 할 수 보여줍니다. 모두, 여기에 강력 하 게 제시 하는 데이터 외 인 핵 산 보완성의 힘 드는 전통적인 접근 방식을 대체 현재 BCG 백신을 재편에 대 한 소설과 효율적인 방법을 지원 합니다.

서론

대체 현재 결핵 백신 BCG, 유전자 소개 하도 단백질 보조 시스템, 바이러스 벡터화 기술, 감쇠 라이브 M.tb 긴장, 및 유전자 변형된 BCG 긴장을 포함 한 다양 한 전략 제안 -감염¹ 또는 Mtb동안 충분히 표현 되지 않는다 BCG 항 원 표현-특정 항 BCG²에 존재 하지. 그러나 유전 공학,, 안전, 시간이 많이 걸리는 프로세스 및 식 벡터⁴^,⁵의 낮은 효율의 불확 실한 수준을 포함 하는 많은 방 벽을 직면 한다. BCG를 개선에 관해서는 대체 접근 불확 실한 유전 교대에 대 한 필요 없이 immunogenicity를 개선 하기 위해 필요 합니다.

이 연구에서 biotin과 잘 알려진 높은 선호도 avidin 상호 작용을 기반으로 하는 BCG 세포 표면에 대 한 관심의 재조합 단백질의 디스플레이 대 한 새로운 전략을 소개 합니다. 이 접근 방식은 biotinylated BCG, 그것의 우수한 안전 하면서 효능의 최대한 향상을 달성 하기 위해 BCG의 광범위 한 조작을 용이 하 게 표면에 재조합 avidin 융해 ....