장 부분 방해의 마우스 모델

요약

창 자 방해는 심한 복 부 통증, 메스꺼움, 구 토, 그리고 대변의 통과 방지 하면 내장의 부분적 또는 완전 한 막힘. 쥐에서 장 부분 obsructions를 만들기 위한이 절차는 병 적인 세포 성장 및 소장에서 죽음을 기본 메커니즘을 공부에서 신뢰할 수 있는.

초록

장 장애물, 방해 하거나 차단 연동 운동, 복 부 유착 및 tumorous 종양을 포함 하 여 가장 위장 (GI) 질환에 의해 발생할 수 있습니다. 그러나, 개장 하는 메커니즘 휴대에, 참여 하 고, 창 자 방해는 제대로 이해. 창 자 방해의 여러 동물 모델 개발 되었습니다, 하지만 마우스 모델은 가장 비용/시간 효과적인. 마우스 모델 장 부분 방해 (PO)를 올바르게 수행 하지 경우 높은 사망률의 수술 주입을 사용 합니다. 또한, 쥐가 수술을 받고 적절 한 봉쇄는 사용 되지 않습니다 또는 제대로 배치 하는 경우 비 대를 개발 하기 위해 실패. 여기, 우리는 매우 낮은 사망률과 안정적이 고 재현 장 장애물 포 수술에 대 한 상세한 프로토콜을 설명 합니다. 이 프로토콜을 부분적으로 차단 하는 작은 창 자에서 소화 운동 회장을 둘러싸는 수술 배치 실리콘 반지를 이용 한다. 부분 막힘 소장 소화 운동의 중단으로 인해 열려진 될 게. 내장의 팽창 반지 점차적으로 죽음을 일으키는 원인이 될 때까지 2 주 동안 개발의 구두에 부드러운 근육 비 대를 유도 합니다. 수술 포 마우스 모델 hypertrophic 장 조직 평활 근 세포 (SMC), 중간 셀의 Cajal (ICC), PDGFRα⁺를 포함 하 여 장 셀의 병 적인 변화를 공부 하는 데 유용의 비보에 모델 제공 및 신경 장 방해의 발달 동안에 세포입니다.

서론

창 자 방해는 소형 또는 대형 내장 내장¹통과 음식을 소화, 유체 및 가스 방지에서 부분적 또는 완전 한 막힘. 방해, 때문 방해 좁히는 루멘²장 벽 두껍게 될을 유도 합니다. 장 방해의 결과로 복 부 접착 조직 형성을 일으키는 원인이 되는 복 부 또는 골반 수술 또는 염증 성 장 질환 (크 론 병), 계실 염, 탈 장, volvulus, 준한, GI 무질서에서 발생할 수 있습니다. intussusception, 변 비, 지저분한 impaction, 의사 방해, 암 및 종양^3,,45. 이러한 경우 장 장애물은 종종 내장⁶tunica muscularis의 비 대도 이어질.

루멘의 포 장 팽창, 유도 및 기능 연동^7,,89,10....

프로토콜

다음 프로토콜 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC) 네바다 대학 리노 (UNR) 동물 자원에 의해 승인 되었습니다 고 연구 동물의 사용에 관한 모든 기관 윤리 지침을 준수.

1입니다. 동물입니다.

1. 성숙 (4-6 주 이전) C57BL/6 쥐 20-30 g. 집 UNR 동물 자원에서 중앙된 동물 시설에 실험실 쥐의 식민지 사이 무게를 얻을.

2. 부분 방해 수술

참고: 수술 수술에 전념 한 방에 수행 됩니다. 모든 수술 기구는 수술 전에 압력가 마로 소독. 수술 실에서 모든 직원에 의해 불 임 수술 가운과 장갑을 항상 착용 되어야 한다.

1. 수술 마우스에 대 한 준비
   1. 산소의 공급을 보장 하기 위해 마 취 전달 시스템을 확인 하 고 isoflurane 절차에 대 한 적절 한입니다. 공급 산소를 켭니다. 가스 유량 계 및 유도 챔버에서 동물 500-1000 mL/분 장소에 그것을 조정 켜고 상단 인감.
   2. 5%, isoflurane 기화 기를 켜고 휴식 될 때까지 동물을 모니터링. 코 콘 마 취 전달 시스템을 전환.
   3. 산소, 어떤 잔류 가스의 유도 챔버....

결과

부분 방해 (PO) 수술 ileocecal 괄약근 가까운 회장 주위 실리콘 링을 삽입 하 여 1 개월 된 생쥐에서 유도 했다. 이 반지는 회장에 부분적인 방해를 만들었습니다. 가짜 작업 (그래서) 나 이/성별에 반지 없이 수행 했다 쥐와이 쥐가 어떤 증상 포 쥐에서 찾아낸 그들과 유사한를 표시 하지 않았습니다. 마우스는 신속 하 게 몇 시간 포 수술에서 회복. 그들은 명백한 행동 변화 또는 약점 첫 주 내에서 보여주지만, 후 첫 번째 주, 그들은 점차적으로 포의 흔적을 표시 하기 시작 했다: 부풀어 복 부와 더 적은 더 작은 배설물 펠 릿의 생산. 포 쥐 8과 13 일 포스트 포 수술 등 제어 마우스 함께 희생 되었다. 소장 부분적으로 가득 고 8 일 포스트 포 수술에서 불어와 완전히 가득 이었고 그래서 (그림 1A) 마우스를 제어에 비해 13 일 포스트가 수술에 불어. 8과 13 일 포스트 포 수술 쥐의 결에 찌 끼.......

토론

우리는 지속적으로 그리고 reproducibly 장 포 수술을 받는 쥐 장 평활 근 비 대를 인간의 창 자 방해를 모방 개발 시연. 장 방해 수술 마우스⁷, 쥐¹⁰, 기니 돼지¹¹, 개 고양이¹² 와¹³를 포함 하 여 다른 동물에 대 한 개발 되었습니다. 마우스 모델 장 방해의 시간, 비용, 크기, 및 다른 더 큰 동물 모델에 비해 phenotypic 장점이 있다. 쥐 또는 쥐에 비의 개발 10-14 일¹⁰, 기니 돼지, 개 및 고양이^11,,1213에 2-4 주에 비해 걸립니다. 구매 하 고 마우스는 또한 다른.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
외과 용 드레이프	의료 및 수의학 용품	SMS40	40 " X100 야드
언더 패드, econ, 프로 플러스	의료 및 수의학 용품	MSC281224	17x24 "
아이리스 가위	Braintree scientific, Inc	SC-i-130
아이리스 가위	Vantage	V95-304
Dumont 전자 및 보석 핀셋	Dumont	98-180-3
꼰 흡수성 봉합사	Covidien polysorb	SL-5687G	5-0, polyglactin
나일론 비흡수성 모노 필라멘트	AD 수술	S-N618R13	6-0, 나일론
외과 용 칼날	Dynarex		No.15
바늘 홀더	Jacobson 미세 혈관	36-1342TC	8.5 인치
메스 손잡이	Flinn scientific	AB1049
미세 수술 용 가위	WPI	503305
바셀린 안과 연고	Puralube VET		3.5g
Fluriso (이소 플루란	Vetone	V1 502017	250 ml
스테리 스트립 강화 피부 클로저	3M	R1547
수술용 장갑	Medline	MSG2270
귀 루프 얼굴 마스크	안전 지대	RS700
Avant 거즈 부직포 스폰지	Caring	PRM25444
Surgical cup	Admiral  craft OYC-2	725-A42	2.5 oz
Swabstick	ChloraPrep	260103	2% w/v 클로르헥시딘  글루코네이트(CHG) 및 70% v/v 이소프로필 알코올(IPA)
면 팁 어플리케이터	Puritan	806-WC
부프레노르핀	동물원 제약	BZ8069317	1mg/ml
겐타마이신 황산염	Vetone	G-6336-04	100mg/ml
속효성 젤 크림 제거제	Veet	8111002
주사기	AHS	AH01T2516	1ml(바늘 포함)
실리콘 링	VWR	60985-720	길이 6mm, 외경 4mm, 내경 3.5 mm
C57BL/6 마우스	잭슨 연구소		4-6 주