마우스에 가로 대동맥 수축 유도를 폐쇄 가슴 모델

요약

여기, 선물이 측면 thoracotomy 통해 가로 대동맥 수축 (TAC)의 프로토콜. 이 기술은 압력 과부하 및 마우스 활용 표준 전술 실험실 설정에서에서 심장 마비를 시뮬레이션을 최소 침 습, 닫힌 가슴 수술입니다.

초록

심장 비 대 및 심장 마비에 대 한 연구는 자주 압력 과부하 마우스 모델 전술에 의해 유도 된 기반으로 합니다. 부분 thoracotomy 가로 대동맥 아치 시각화를 수행 하는 표준 절차입니다. 그러나, 오픈 가슴 모델에서 thoracotomy로 인 한 수술 외상 변경 호흡 생리학 갈비뼈를 해 부하 고 가슴 폐쇄 후 첨부 되지 않은 왼쪽. 이 방지 하려면 측면 thoracotomy 통해 최소 침 습, 닫힌 가슴 접근을 설립 했습니다. 여기 우리는 접근 대동맥 아치 2^nd 있는 공간을 통해 가슴 구멍을 입력 하지 않고 마우스에서 복구할 수 보다 적게 외상 성 부상으로 떠나. 우리는 동등한 생존 률 오픈 가슴 전술 절차에 대 한 표준 실험실 설정을 사용 하 여이 작업을 수행 합니다. 닫힌된 가슴 접근 방식으로 인해 생리 적 호흡 패턴을 유지, 떨어져 쥐 보여주는 빠른 복구 혜택을 덜 침략 적 기술을 나타납니다 빠른 치유 과정을 촉진 하 고 외상 후 면역 응답을 감소 시킬 것으로 보인다.

서론

마우스 모델 종종 인간의 질병¹을 모방 하는 데 사용 됩니다. 가로 대동맥 수축 (TAC) 압력 과부하를 유도 하는 데 사용 하 고 왼쪽 심 실 비 대². 오픈 가슴 전술 모델 쥐에서 Rockman 외. 에 의해 확인 되었다 ³ 고 수술 DeAlmeida 그 외 여러분 에 의해 자세히 설명 되어 ⁴. 가로 대동맥의 Banding은 복 부 대동맥 수축에 비해 더 유리한 순환의 더 큰 부분이 후자의 절차²의 부정적인 효과 보완할 수 있기 때문에.

가로 대동맥의 밴딩 오름차순 대동맥 및 brachiocephalic 동맥에서 동맥 압력이 증가에 이르게 되지만 장기의 충분 한 관류 (즉 왼쪽된 일반적인 경 동맥, 왼쪽된 하 말 초 혈관을 통해 동맥, 그리고 하강 대동맥)입니다. 증가 심장 afterload 및 상승 된 심장 벽 긴장을이 끈다. 벽 스트레스 때문에 섬유 두껍게⁵이후에 감소합니다. 심장 hemodynamics 만성 변화 maladaptat....

프로토콜

이 프로토콜은 동물 실험 LANUV Recklinghausen (#84-02.04.2016.A374)에 대 한 윤리 위원회에 의해 승인 되었다. 성인 쥐에이 절차는 수행 하는 일반적으로, > 나이의 10 주. 그러나, 그것이 젊은 동물 뿐만 아니라에이 수술을 수행할 수 있습니다. 수술 도구를 사용 하기 전에 소독 해야 하 고 무 균 조건 하에서 수행 되어야 하는 모든 단계.

1입니다. 마 취와 삽 관 법의 유도

1. Intraperitoneally 통증 완화에 대 한 buprenorphine 0.1 µ g/g 몸 무게를 주사. 수술 후 앞으로 3 일에 대 한 buprenorphine 0.1 mg/kg 매 8 h의 복 주사를 반복 합니다.
2. 유도, 1 L/min의 산소 흐름 isoflurane의 3.0 Vol %로 설정 하는 기화 기에 연결 되어 있는 마 취 유도 상자에 마우스를 놓습니다.
3. 촉각 자극을 유도 하 여 깊은 마 취 법을 확인 합니다.
   참고: 증가 Vol %isoflurane 최대 5%, 마 취 유도 실패 하거나 마 취 법은 충분히 깊은 되지 않습니다.
4. 반사 부재를 보장 하기 위해 마우스의 꼬리에 꼬 집 음. 반사의 완전 한 부재의 경우 최적의 송풍기 설치에 대 한....

결과

성공적인 전술 압력 과부하 및 왼쪽된 심 실 비 대의 유도 보장합니다. 압력 과부하의 ad hoc 유효성 검사는 그림 2와 같이 도플러 흐름 속도 측정을 사용 하 여 얻을 수 있습니다. 수술 전 혈액 흐름 속도 두 경 동맥에서, 전술 인해 증강된 혈액 속도 좌 심 실 그리고 대동맥에 높은 압력으로 인해 오른쪽 경 동맥에 포스트 stenotic 감쇠 혈액 흐름 속도에서 발생 하는 동안은 왼쪽 경 동맥.

전술과 그 결과 비 대의 효능 하루 3, 6, 21 일 수술 후에 남성 마우스 C57BL/6J 심장 무게/몸 무게 비율 (HW/BW; mg/g)의 계산에 의해 확인 되었다. HW/BW 비율 전술 쥐 수술 후 6 일 비 줄무늬 쥐에 비해 크게 증가 (4.78 ± 0.18 대7.66±1.43 mg/g,.......

토론

전술 때문에 고혈압의 급속 한 발병 대동맥 협 착 증 또는 고혈압으로 인 한 임상 관련 비에서 다릅니다. 그럼에도 불구 하 고, 심장 마비를 유발 하는 작은 동물 모델의 사용에는 많은 이점이 있다 고 많은 조사¹¹선택 따라서. 이 닫힌된 가슴 모델 쥐⁴가로 대동맥 수축 유도 하는 수술 방법의 기존 모델을 향상 시킵니다.

가장 중요 한 단계는 대동맥 아치 아래 통로 이다. 대동맥 주위 너무 꽉 봉합 신장 등 중요 장기에 혈액 흐름의 치명적인 감소를 발생할 수 있습니다. 하 겐 Poiseuille의 법률, 흐름은 주로 반지름에 의존 합니다. 따라서, 일부 체중에 맞게 스페이서 우리의 프로토콜에서 사용 되었다. 이 절차는 더 보편적으로 적용 가능한, 개별 실험 설정에 따라 매우 젊 거 나 오래 된 쥐에 관한 특히이 모델을 만든다.

수술 외상 자체 면역.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
압력량 카테터	Millar Instruments, 미국	SPR-839
마우스 인공호흡기	Harvard Appliances GmbH, 독일	Minivent - TYPE 845
마우스 인공호흡기	Harvard Apparatus GmbH, 독일	삽관 캐뉼라 OD 1.2mm 73-2844
기화기	Drä과 Y-연결; ger 의학 AG&CO. KG, 독일	19.3 이소플루란-기화기(최신 버전은 카탈로그 번호에서 사용할 수 있습니다  D-877-2010)
현미경	Leica Microsystems, 독일	MZ 7.5
광원	Schott AG, 독일	KL 1500 LCD
6-0 Prolene	Ethicon, 미국	폴리프로필렌 봉합사 BV-1 9.3 mm 3/8c	수술용 봉합
Seraflex	Serag Wiessner, 독일	USP 5/0 슈바르츠;   IC108000	수축을 위한 봉합사
동종 제어 수술대	Harvard Apparatus GmbH, 독일	Typ 872/3 HT with 삼각대 스탠드 및 동종 컨트롤러 Type 874; 73-4233
유연한 직장 프로브	Harvard Apparatus GmbH, 독일	1.6 mm OD; 55-7021
도플러 신호 시각화 기기	Indus Instruments, 미국	20MHz 펄스 도플러 모듈이 있는 도플러 신호 처리 워크스테이션(DSWP)
Arruga Intracapsular Forceps	Altomed, 영국	A5400
도플러 프로브	Indus Instruments, 미국	20MHz 튜빙 장착 프로브
Jaffe Lid Retractor	Altomed, UK	A3513

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