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방법 논문

척수 손상 후 압력 궤 양의 마우스 모델

9.5K 조회수

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DOI:

10.3791/58188

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2019년 3월 9일

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이 논문에서

요약

여기, 척수 상해 (SCI)의 마우스 모델에서 임상으로 관련 된 피부 압력 궤 양 (고름)을 유도 하는 간단한 방법을 설명 합니다. 이 모델 화면에 전 임상 연구에서 다른 치료제에 대 한 치유 고름 SCI 환자에 대 한 사용할 수 있습니다.

초록

압력 궤 양 (고름) 일반적인 외상 성 척수 상해 (SCI)의 합병증을 쇠 약하게 하 고 뼈 굴지 주변 부드러운 조직에 발생 하는 경향이 있다. 그러나 거기,, 약간 알려진 SCI 제어 실험 설정에서 동물 모델의 맥락에서 피부 상처 치유에 미치는 영향에 대해. 본이 연구에서는 완전 한 과학의 맥락에서 고름의 간단한, 비-침략 적, 재현할 수 및 임상 관련 마우스 모델 제공 됩니다. 성인 남성 생쥐 (Balb/c, 10 주 오래 된) 면도 있었고 depilated. 후 탈모 (24 시간), 쥐 완전 한 척수 transection (T9 T10 척추) 뒤 laminectomy 대상이 됐다. 직후, 쥐의 뒷면에 피부 배 해제 되었고 12 h, 따라서 다음 일 동안 한 PU로 발전 하는 허 혈 성 영역을 만들기 위한 장소에 개최의 자기 디스크 두 개 사이 끼여. 부상된 영역 조직 부 종 및 상피 실종 3 일 후 자석 응용 프로그램 시연. 고름이 저절로 개발 하 고 치유. 그러나 치유는,, SCI 쥐에 느린 비해 상처의 영향은 반대로 수준 아래 만들 때 비 SCI 마우스를 제어, 치유에 차이가 SCI 및 제어 비 SCI 쥐 과학의 수준 이상의 상처를 만들 때 사이 보였다 이 모델은 피부 PU 개발 및 문화, 또한 이러한 상처를 치유 하는 것을 도울 수 있는 치료 접근을 테스트로 후 치유의 역학을 공부 하는 잠재적으로 유용한 도구입니다.

서론

압력 궤 양 (고름)은 충격적인 과학1의 주요 2 차 합병증. 고름은 피부 또는 보통 몸 무게가 집중 환자가 앉아 또는 거짓말1뼈 굴지에 발생 하는 기본 조직에 지역화 된 부상. 피부, 지방, 그리고 근육 지역화 된 허 혈, 조직, 기계적 손상, 염증과 괴 사2,3의 개발에 이르게이 일정 한 압력에 노출 됩니다.

고름의 개발 압력 및 전단, 기간, 피부 수 분 및 온도, 부상 장 수, 및 일반 피부 위생 로드의 크기를 포함 하 여 여러 로컬 요인에 의해 영향을 받습니다. 거기 요인이 또한 조직의 역할 일반 건강 상태, 뼈 근육 조직 형태와 강도4, 환자의 나이, 혈액, 성별, 및 결혼 상태, 교육, 등 심지어 사회 경제적 요인 등 그리고 소득4,5.

고름의 치료와 예방 SCI 환자에 중요 한도 전에 남아 있다. SCI 환자 60-85%, 약한 흉터 조직 및 보....

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프로토콜

모든 동물 처리 및 수술 절차는 Rutgers 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 하는 프로토콜에 따라 수행 했다. 마우스는 표준 식단 및 ad libitum 물 먹이 했다.

1. 수술 및 비 수술 장비의 준비

  1. 압력솥에 수술 및 비 수술 악기 소독.
  2. 70% 에탄올과 외과 운영 테이블을 청소 하 고 37 ° c가 열 패드를 따뜻한
  3. 운영 테이블에 난방 패드를 놓고 불 임 수술 커튼으로 커버 합니다.
    참고: 모든 생존 절차에 "No Touch" 기술은 여기 불 임을 유지 하기 위해 사용 됩니다.

2. 동물과 T9 T10 척추 Laminectomy 수행의 준비

  1. 성인 (Balb/c) 10 주 된 남성 생쥐를 조달. 5 %isoflurane 시작 하는 흡입기를 사용 하 여 각 동물 마 취를 유발 하 고 절차의 나머지 부분에 대 한 진정을 유지 하기 위해 2-3% 감소.
  2. 꼬리/발 유도 핀치 nociception 자극에 응답을 도출 하 여 완전 한 마 취를 확인 합니다.
  3. (꼬리에 머리) 등을 통해 전기 깎기로 머리를 면도 하 고 나머지를 제거....

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결과

이 프로토콜 만듭니다 있는 PU의 완전 한 과학 짧게 설정에서 ( 그림 1에 나와 있는), 모든 마우스 또는 완전 한 과학 없이 용납 아주 잘, 전체 12 h (그림 1 c, 1, 1 층, 1 시간에 대 한 그들의 원래 위치에 남아 있던 자석 ). 모든 마우스는 정상 조직 (그림 1e, 1 g, 1i)의 다리에 의해 분리 된 두 개의 원형 상처를 개발 했다. 초기 부상 응답 마우스 SCI (그림 1e) 없이 또는 SCI와 SCI 사이트 (그림 1i) 이상 SCI 사이트 (그림 1 g) 아래에서 유사 했다.

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토론

이 연구에서 프로토콜 상처 치유에 과학의 영향을 평가 하는 고름의 새로운 실험 모델을 설명 합니다. 고름이 피부 등 피부 배, 위 또는 아래 과학 사이트 설정에 두 12 mm 직경 디스크 자석의 12 h 응용을 통해 유도 했다. 데이터 과학 피부 상처 치유 생쥐에서 감속을 보여준다. 중요 한 것은, 이러한 관찰 했다 특별히 피부 상처는 SCI의 신경 분포 수준 아래 SCI 수준 위에 만든 상처로 고 따라서 innervated 남아, 비 SCI 쥐에 비해 그들의 치유 패턴에 크게 영향을 받는 했다.

여기에 설명 된 PU 프로토콜 약한 자석 (1000 가우스) 구분 없이 자석1512 h 12 h 자석 응용 프로그램의 세 가지 사이클에 적용 된 마우스에 사용 되는 이전에 게시 방법을 기반으로 합니다. 처음에, 우리는 하나, 자석 응용 프로그램의 2, 그리고 3 개의 12 h 주기를 사용 하 여 비교. 반복된 응용 프로그램을 사용 하 여 불리는.......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

이 작품은 척수 연구 (CSCR15IRG010), 미국 국방부 (SC160029), 그리고 예일 부의 수술 타다 연구 보조금 프로그램에 뉴저지 위원회에 의해 부분적으로 지원 되었다. 우리가 감사 숀 오 플 레 리를 W.M. 켁 센터 공동 신경 과학, 기술 지원에 대 한 럿 거 스에서 합니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
자석Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, COCD14C3800 G 자기력
마우스 표준 다이어트PMI Nutrition International, Brentwood, MO표준 식품 펠릿
이소플루란HENRY SCHEIN 동물 건강 SKU 029405
ImageJNIH, Bethesda, MD이미지 분석 소프트웨어
BETADINE 외과용 스크럽HENRY SCHEIN 동물 건강 
안과 연고 HENRY SCHEIN 동물 건강 SKU 008897
NAIR-헤어 리무버 로션Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ
ELOXIJECT (meloxicam) 주사HENRY SCHEIN 동물 건강 SKU 0497555 mg/mL, 10 mL
세파졸린 나트륨HENRY SCHEIN 동물 건강 SKU 0548461 g, 10 mL 병
Buprenorphine-SR ZooPharm, Windsor, CO-
-0.9% 염화나트륨 주입 USPBRAUN, Irvine, CAS8004-5384
10% 중성 완충 포르말린 VWR, Radnor, PA16004-130
BALB/C 남성 마우스Charles River Lab., Wilmington, MA28
멸균 면 팁 애플리케이터Puritan, Guilford, MESKU#: 25-806
Michel Suture ClipsFine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA12040-01
Surgical Suture, U.S.P.헨리 샤인 동물 건강 Tel.: 101-2636

참고문헌

  1. Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
  2. Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in....

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