살 모 넬 라 종 /Shigella 종 설사에 기인 하는 일반적인 병원 체. 여기, 우리는 살 모 넬 라 종의 심사에 대 한 높은 처리 플랫폼을설명/Shigella 종 실시간 PCR를 사용 하 여 결합 가이드 문화.
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이 논문에서
요약
초록
급성 위장염의 지저분한 구두 전송 시간, 특히 때 감염 발생 합니다 음식과 물을 처리 하는 사람들은 살 모 넬 라 종/Shigella 종에 의해 살 모 넬 라 종/Shigella 종의 검출을 위한 표준 방법은 직접 문화 이지만 노동 집약 및 시간이 걸리는. 여기, 우리가 살 모 넬 라 종/Shigella 종 검사, 실시간 중 합 효소 연쇄 반응 (PCR) 가이드 문화를 함께 사용 하 여에 대 한 높은 처리 플랫폼을 설명 합니다. 두 가지 주요 단계가 있습니다: 실시간 PCR와 인도 문화. 우리 방법의 각 단계를 설명 하는 첫 번째 단계 (실시간 PCR)에 대 한: 컬렉션, 사전 농축, DNA 추출 및 실시간 PCR. 실시간 PCR 결과 긍정적인 경우 (가이드 문화) 2 단계 수행 됩니다: 선택적 문화, 생 화 확 적인 식별 및 serological 특성화. 우리는 또한 그것에서 생성 하는 대표적인 결과를 보여 줍니다. 여기에 설명 된 프로토콜의 살 모 넬 라 종, 특정, 민감한 빠르고 높은 처리량 검열을 위한 가치 있는 플랫폼 될 것 이라고 /Shigella 종
서론
설사 아직도 높은 발생률과 일반적인 건강 문제는 세계적으로1,2율입니다. 일부 환자 (예: 느슨한과 물 변, 화장실에가 서 긴급), 주에 대 한 다양 한 증상을 보여 사망률은 상대적으로 낮은 사회 경제적 영향 매우 높은3,4하 게 하는. 더 심각 하 게, 일부 환자도 치료5경우 과민성 대 장 증후군을 개발할 수 있습니다. 박테리아, 바이러스 및 설사6을 일으킬 수 있는 기생충의 다양 한 종류가 있다입니다. 살 모 넬 라 종 /Shigella 종 급성 위장염7,,89,,1011의 전송에 대 한 가장 흔한 박테리아 중입니다. 따라서, 많은 군 법률이 나 규정 일반 살 모 넬 라....
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프로토콜
프로토콜은 주 국제 여행 의료 센터의 인간 연구 윤리 위원회에 의해 설정 하는 지침을 따릅니다. 실험 기간 동안 표준 살 균 작업을 사용 하십시오.
1. 문화 미디어 구성 및 준비
- 영양 국물 준비: 분해 1% 펩, 0.3% 쇠고기 추출 물, 염화 나트륨 0.5%, H2O 포도 당 0.1%, pH 7.5와 오토 클레이 브를 조정 15 분 동안 121 ° C에 그것.
- Selenite Cystine 매체 준비: 분해 펩 0.5%, 0.4% 유 당, 1% 나2HCO3, 0.4% 나트륨 수소 selenite, 0.001% H2O, L-시스 틴 7.0에 pH를 조정 하 고 5 분 동안 끓여.
- 준비 된 Xylose Lysine, Deoxycholate 천 (XLD) 배지: 디졸브 0.3% 효 모 추출 물, 0.5 %L-리 신, 0.375 %xylose, 유 당 0.75%, 0.75% 자당, 염화 나트륨 0.5%, 0.008% 페 놀 레드, 0.68% 나트륨 thiosulfate, 0.08% 염화 제 2 철 구 연산 염, 0.25% 나트륨 deoxycholate, H2O, 한 천 1.5% 고 pH 7.4에 ....
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결과
살 모 넬 라 종의 심사에 대 한 프로토콜 적용 된 음식과 물을 처리 하는 사람에서 항문 대변에서Shigella 종 샘플 /.
실시간 PCR 단계에서A, 그림 5같이 있었다 16 진수 채널 혼합된 샘플은 살 모 넬 라 종에 대 한 긍정적인 의미에서 성공적인 증폭 다음 추가 실시간 PCR은 긍정적인 것을 만든 개별 샘플에 실시 됐다. 그림 5B같이 샘플 2 긍정 했다. 따라서, 샘플 2 살 모 넬 라 종의 인도 문화에 대 한 선정 그림 5C, 팸 채널 혼.......
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토론
살 모 넬 라 종부터 /Shigella 종 종종 음식 중독 및 급성 위장염28,29 의 지저분한 구두 전송 관련 된 고 일상적인 방법은 노동 집약적인 또는 소모 7, 우리는 살 모 넬 라 종에 대 한 높은 처리 플랫폼을설명/Shigella 종 심사, 실시간 PCR를 사용 하 여 결합 가이드 문화.
이 플랫폼의 기능을 최대화 하기 위해 고려해 야 할 몇 가지 단계가 있습니다. 첫 번째 영양소 국물 (단계 2.2)에서 샘플의 사전 농축 단계입니다. 비록 아무 사전 농축 단계 명백한 증상, 설사, 등, 그 환자에서 수집 된 대변 샘플에 필요한 일반적인 6 h 사전 농축 단계 여전히 필요 항문 면봉 샘플, 사전 고용 동안 수집 하는 때 그 사람들은 주로 건강 또.......
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공개 사항
저자는 공개 없다.
감사의 글
이 작품은 과학 및 기술 프로그램의 주 하이, 중국 (보조금 번호 20171009E030064), 과학 및 기술 프로그램의 광 동, 중국 (보조금 번호 2015A020211004)는 과학 및 기술 프로그램의 일반 관리에 의해 지원 되었다 질 감독, 검사 및 검역 (보조금 번호 2016IK302, 2017IK224) 중화 인민 공화국의의.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 트리스 | 시그마 | 10708976001 | |
| EDTA | 시그마 | 798681 | |
| NP40 | 시그마 | 11332473001 | |
| ddH2O | Takara | 9012 | |
| PrimeSTAR HS (Premix) | Takara | R040Q | |
| 영양 육수 | LandBridge | CM106 | |
| 영양소 아가르 | LandBridge | CM107 | |
| 셀레나이트 시스틴 매체 | LandBridge | CM225 | |
| XLD | LandBridge | CM219 | |
| MAC | LandBridge | CM908 | |
| Salmonella 발색 한천 | CHROMagar | SA130 | |
| Salmonella 진단 혈청 | Tianrun | SAL60 | |
| Shigella 진단 혈청 | Tianrun | SHI54 | |
| 항문 면봉(수집 튜브 플러스) | Huachenyang | ||
| 슬라이드 | Mingsheng | 7102 | |
| 마이크로 루프 | Weierkang | W511 | |
| 인큐베이터 | Jinghong | DNP-9082 | |
| 오토클레이브 | AUL SS-325 | ||
| 건식 수조 | Jinghong | KB-20 | |
| 자동 미생물 식별 시스템 | bioMé rieux | VITEK2 | 다른 동등한 시스템은 |
| 형광등 실시간 PCR 기계 | ThermoFisher | ABI7500 | 다른 동등한 기계를 사용할 수 있습니다 |
참고문헌
- Roy, S. L., Scallan, E., Beach, M. J. The rate of acute gastrointestinal illness in developed countries. Journal of Water and Health. 4, Suppl 2 31-69 (2006).
- Wilking, H., et al. Acute gastrointestinal illness in adults in G....
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재인쇄 및 허가
