프로토콜 cetacean 간 및 신장 조직에 Ag를 지역화 하려면 autometallography에 의해 제공 됩니다. 또한, cetacean 조직학 Ag 분석 결과 (욕설) 라는 새로운 분석 결과 그 조직에 Ag 농도 견적 하기 위하여 개발 된다.
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이 논문에서
요약
초록
나노 (AgNPs) 섬유, 화장품, 그리고 그들의 강력한 항균 효과 인해 의료 항목을 포함 하 여 상용 제품에 광범위 하 게 사용 되었습니다. 그들은 또한 환경에 공개 될 수 있습니다 하 고 바다에 축적. 따라서, AgNPs는 Ag 오염의 주요 원천 및 Ag의 환경 독성에 대 한 대중의 인식을 증가. Ag의 (에서 소비자/육 식 동물) 확대 및 bioaccumulation (생산자)에 이전 학문은 설명 했다. 고래, 바다의 정점 육 식으로 수 있습니다 부정적인 영향 되었습니다 Ag/Ag 화합물에 의해. Cetacean 조직에 Ag/Ag 화합물의 농도 유도 결합된 플라즈마 질량 분광학 (ICP-MS)에 의해 측정 될 수 있다, 비록 ICP MS를 사용 하 여 높은 자본 비용 및 조직 스토리지/준비에 대 한 요구 사항에 의해 제한 됩니다. 따라서, autometallography (AMG) 메서드를 사용 하 여 이미지 정량 분석 포 르 말린 고정, 파라핀 끼워 넣어진 (FFPE) 조직 suborgan 수준에서 Ag 배포를 지역화 하 고 cetacean에 Ag 농도 추정 하는 보조 방법 있을 수 있습니다 조직입니다. AMG 긍정적인 신호 근 신장 관 상피, hepatocytes, Kupffer 세포의 세포질에 다양 한 크기의 검은 알갱이를 주로 갈색입니다. 때때로, 일부 비정 질 황금 노란색 갈색 AMG 긍정적인 신호는 루멘과 일부 근 신장 tubules의 지하실 막에 설명 되어 있습니다. Ag 농도 추정에 대 한 분석 결과 Cetacean 조직학 Ag 분석 결과 (욕설), AMG 방법 및 ICP-MS의 이미지 정량 분석에서 데이터에 의해 설립 하는 회귀 모델은 이름은입니다. AMG 지역화 CHAA와 반 계량 중 금속 사용 spatio 시간적 및 크로스-종 연구에 대 한 편리한 방법론을 제공 합니다.
서론
나노 (AgNPs) 섬유, 화장품, 그리고 그들의 위대한 항균 효과1,2인 의료 항목을 포함 하 여 상용 제품에 광범위 하 게 사용 되었습니다. 따라서, AgNPs와 AgNP 포함 된 제품의 생산 시간이3,4증가 됩니다. 그러나, AgNPs 환경으로 공개 될 수 있습니다 그리고 바다5,6에 축적. 그들은 Ag 오염의 주요 소스 되 고 Ag의 환경 독성에 대 한 대중의 인식을 증가.
해양 환경에서 AgNPs Ag의 상태는 복잡 하 고 끊임없이 변화입니다. 이전 연구 AgNPs 입자, 집계, 분해, 반응 화학 종 또는+ Ag 이온7,8에서 다시 생성으로 남아 있을 수 있는 표시 했습니다. 여러 종류의 Ag, AgCl, 등 그들은 생물이 유기 체에 의해 섭취 될 수 있다 하 고 먹이 사슬
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프로토콜
연구 국제 지침에 따라 수행 하 고 cetacean 조직 샘플의 사용은 위원회의 농업의 대만 (연구 허용 104-07.1-SB-62)에 의해 허용 되었다.
1. 조직 샘플 준비 ICP MS 분석
참고: 간, 신장 조직 수집에서 갓 죽은 고 적당히 autolyzed 좌초 고래24, 4 종, 1 그램퍼스 griseus (Gg), 6 좌초 된 고래를 포함 하 여 2 Kogia 종 (코), 2 Lagenodelphis 호세이 (Lh), 1 Stenella attenuata (Sa). 좌초 각 cetacean 개별 식별 필드 번호를 했다. ICP MS 분석용 조직 샘플 준비 따라 수소 첸의 연구소를 설립 하는 방법 그리고 수소 첸의 연구소 ICP MS 분석11,,1325실시.
- 좌초 고래에서 간 및 신장 조직 ICP MS 분석에 대 한 수집 하 고 사용까지 그들을 −20 ° C에 저장.
- 일치 하는....
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결과
Cetacean 간 및 신장 조직에 AMG 긍정적인 신호의 대표 이미지는 그림 5에 나와 있습니다. AMG 긍정적인 신호 근 신장 관 상피, hepatocytes, Kupffer 세포의 세포질에 다양 한 크기의 검은 알갱이 변함없이 크기의 갈색을 포함합니다. 때때로, 아 몰 퍼스 황금 노란색 갈색 AMG 긍정적인 신호 루멘과 일부 근 신장 tubules의 지하실 막에 설명 되어 있습니다. ICP-MS의 결과 간 및 신장 조직, AMG 양성 값 사이 긍정적인 상관 관계 이며 원점 통과 선형 회귀 여분의 합계의 사각 F 테스트 및 AIC12,26, 선호 27. 정확도 테스트에서 SDs 간 및 신장에 대 한 욕설의 뜻은 3.24 및 0.16, 각각. 정밀 .......
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토론
문서 연구의 목적은 suborgan 수준에서 Ag 배포를 평가 하 고 cetacean 조직에 Ag 농도 추정 하는 보조 메서드를 설정 하는 것입니다. 현재 프로토콜 ICP-MS, 2) AMG 분석 알려진된 Ag 농도와 일치 하는 쌍 조직 샘플의 3) Ag 농도 추정에 대 한 회귀 모델 (욕설)의 설립에 의해 cetacean 조직에 Ag 농도의 결정 1) 포함 AMG 양수 값, 4)에 의해 평가의 정확성과 정밀도 CHAA, 및 5의) 욕설에 의해 Ag의 추정 농도.
이 연구에서 ICP-MS의 데이터 했다 크게 하 고 긍정적으로 상관의 AMG 양수, amg가 양수 값 cetacean 조직에 Ag 농도 예상할 수 있는 제안. 따라서, amg가 양수 값과 회귀 모델에 근거 하는 욕설 고래의 간 및 신장 조직에 Ag 농도 추정에 대 한 개발 되었습니다. 일반적으로, 더 많은 매개 변수 (즉, 더 복잡 한 회귀 모델)을 사용 하 여 회귀 모델, 데이터에 잘 맞는 하지만 그것.......
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공개 사항
저자는 공개 없다.
감사의 글
우리는 대만 Cetacean 좌초 네트워크 샘플 수집 및 저장, 대만 Cetacean 사회, 타이페이;를 포함 하 여에 대 한 감사 Cetacean 연구 실험실 (교수 선취 Siang Chou), 연구소의 생태학 및 진화 생물학, 국립 대만 대학, 타이 페이; 자연 과학 (박사 Chiou-주 야 오), 타이중;의 국립 박물관 그리고 해양 생물학 & Cetacean 연구 센터, 국립 쳉 쿵 대학. 우리 또한 그들의 허용에 대 한 임업 국, 농업 위원회, 행정원을 감사합니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
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| Surgipath Paraplast | Leica Biosystems | 39601006 | 파라핀 |
| 100 % 에탄올 | Muto Pure Chemical Co., Ltd | 4026 | |
| Non-Xylene | Muto Pure Chemical Co., Ltd | 4328 | |
| 실란 코팅 슬라이드 | Muto Pure Chemical Co., Ltd | 511614 | |
| 커버 유리 (25 x 50 mm) | Muto Pure Chemical Co., Ltd | 24501 | |
| Malinol | Muto Pure Chemical Co., Ltd | 20092 | |
| GM Haematoxylin Staining | Muto Pure Chemical Co., Ltd | 3008-1 | |
| 10% 중성 완충 포르말린 용액 | Chin I Pao Co., Ltd | --- | |
| Tip (1000 μ L) | 엠디비오, Inc. | 1000 | |
| PIPETMAN 클래식 P1000 | 길슨, Inc. | ||
| 15ml 원심분리기 튜브 | GeneDireX, Inc. | PC115-0500 | |
| Dogfish liver | National Research Council of Canada | DOLT-2 | |
| Dogfish muscle | National Research Council of Canada | DORM-2 | |
| Inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS) | PerkinElmer Inc. | PE-SCIEX ELAN 6100 DRC | |
| FreeZone 6리터 동결 건조 시스템 | Labconco | 7752030 | 동결 건조용 |
| BRAND® SILBERBRAND 용량 플라스크 | Merck | Z326283 | |
| 30 mL 표준 바이알, 33 mm 클로저가 있는 평평한 내부 | Savillex Corporation | 200-030-12 | diagestion |
| Nitric acid, superpur®, 65.0% | Merck | 1.00441 | diagestion |
| Hot Plate/Stirrers | Corning® | PC-220 | 다이아메션용 |
| 고전단 실험실 믹서 | Silverson | SL2T | 균질화용 |
| 멸균 폴리프로필렌 샘플 항아리(250mL) | Thermo Scientific™ | 6186L05 | 균질화 |
| 디지털 카메라 | Nikon Corporation | DS-Fi2 | |
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| 스테인레스 스틸 조직 임베딩 금형 | Shenyang Roundfin Trade Co., Ltd | RD-TBM003 | 파라핀 emedding용 |
참고문헌
- McGillicuddy, E., et al. Silver nanoparticles in the environment: Sources, detection and ecotoxicology. Science Total Environment. 575, 231-246 (2017).
- Yu, S. J., Yin, Y. G., Liu, J. F. Silver nanoparticles in the environment. Enviro....
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