방법 논문

돼지에서 출혈 성 쇼크의 치료에 대 한 전체 및 부분 대동맥 폐색

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DOI:

10.3791/58284

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2018년 8월 24일

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1Department of Surgery, University of Michigan, 2Hays Innovations

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

여기, 선물이 대동맥 폐색 외상에 확실 한 치료에 다리를 사용 하는 돼지에서 출혈 충격 모델을 설명 하는 프로토콜. 이 모델은 다양 한 수술 및 약물 치료 전략을 테스트 응용 프로그램.

초록

출혈 외상에 예방 가능한 사망의 주요 원인이 남아 있습니다. 비 압축 몸통 출혈의 혈관 내 수술 관리 최근 몇 년 동안에서 외상 치료의 최전선에 왔다. 완전 한 대동맥 폐색 선물 심각한 우려, 이후 부분 대동맥 폐색의 개념 성장 주의 얻고 있다. 여기, 우리 소설 부분 대동맥 풍선 폐색 카 테 터의 효과 조사 하 고 완전 한 대동맥 폐색의 원리에 작동 하는 카 테 터와 비교를 출혈 충격의 큰 동물 모델 제시. 돼지는 취 하 고 제어 고정 볼륨 출혈을 수행 하려면 계측 hemodynamic 및 생리 적 매개 변수 모니터링 됩니다. 출혈, 따라 대동맥 풍선 폐색 카 테 터 삽입 하 고는 동물 (TBV) 총 혈액 량의 20%로 전체 혈액 소생 받을 60 분, supraceliac 대동맥에 비정상적으로 증가. 풍선 디플레이션, 다음 동물 동안 유체 소생술을 받아 vasopressors 필요에 따라 4 h에 대 한 중요 한 치료 환경에서 모니터링 됩니다. 부분 대동맥 풍선 폐색 풍선 인플레이션 동안 향상 된 원심 평균 동맥 압력 (지도)를 시연, 허 혈, 마커를 감소 하 고 소생은 유체와 vasopressor 사용 감소. 돼지 생리학 및 항상성 응답 출혈 다음 문서화 되었습니다 하 고 인간, 그 같은 돼지 출혈 충격 모델 다양 한 치료 전략을 테스트를 사용할 수 있습니다. 출혈을 치료, 뿐만 아니라 대동맥 풍선 폐색 카 심장 마비, 심장 및 혈관 수술, 및 다른 고 위험도 선택 수술 절차에 그들의 역할에 대 한 인기가 있다.

서론

출혈 환자 충격적인 사건, 군사 설정에서 외상 관련 된 죽음의 90% 및 민간인 인구1, 에서 외상 후 죽음의 40%에서에서 예방 가능한 죽음의 지배적인 원인이 되 2. 직접 압력 압축할 출혈을 치료할 수, 비록 비 압축할 몸통 출혈 하기 어려운 남아 치료 및 신속한 hemostatic 제어 없이 치명적일 수 있다. Resuscitative thoracotomy 또는 대동맥 크로스 클램핑으로 개복 술의 역사적 접근은 극단적으로 침략 적3,4을 입증 했다. 이 개입에는 외상 성 모욕5받은 환자 후보를 결정 하는 복잡 한 선택 알고리즘을 또한 필요 합니다.

최근 몇 년 동안, 앞에서 설명한 접근 방식에 대 한 관심의 부활 하고있다-대동맥 (REBOA)6,,78의 resuscitative 혈관 내 수술 풍선 폐색. REBOA 출혈에 단기 생존 이점을 수 여, 비록 풍선 인플레이션 동안 대동맥의 머리말 붙인된 완전 한 폐색 돌이킬 수 없는 끝-기관 허 혈9,10를 포함 하는 심각한 우려를 제기 한다. 이 잠재적인 병 적 상태를 극복 하기 위해 시도, 출혈 관리할 대체 혈관 내 수술 전략 고안 되 있다. 성장 주의 본 한 이러한 전략은 대동맥11,12의 부분 폐색. 부분 대동맥 풍선 폐색의 아이디어는 폐색, 향상 된 생리 인접 대동맥 지도 및 점진적 afterload 감소 풍선 디플레이션을 다음의 사이트에 말 초 혈관 침대의 관류를 준다. 매개 변수에서 이러한 변화는 출혈 동물의 생리 적 특성을 원하는 수정. 인 간에 게이 방법의이 번역, 이전 완료 하 고 부분 대동맥 풍선 폐색 카 무 겁 게 출혈 충격11,,1213의 돼지 모델에서 테스트 되었습니다.

돼지는 몇 년 동안 출혈 충격을 반하는 연구에 이용 되었다. 출혈 성 쇼크의 병 태 생리학의 현재 이해의 대부분은 돼지를 포함 하 여 동물 모델 활용 연구에서 파생 됩니다. 그들의 생리학 및 항상성 응답 pathologic 볼륨 고갈 다음 출혈, 혈액 응고 및 심장 혈관 응답에 관련 된 특히 그들, 잘 문서화 되어 있으며 인간14같은 설정에서. 출혈 충격의 돼지 모델 또한 출혈 충격에 대 한 치료 전략 및 기타 외상 성 부상 조사 수 있는 기회를 제공 합니다.

이 연구에서 전체 및 부분 대동맥 풍선 폐색 등 혈관 내 수술 치료 전략을 평가 하는 돼지에서 출혈 충격의 임상 현실적인 모델을 설명 합니다. 우리는 더 나은 physiologic 귀착되는 대동맥의 부분 폐색 및 실험실 프로필 제어 고정 볼륨 출혈을 겪고 돼지에서 대동맥의 완전 한 폐색에 비해 가설.

우리 돼지 모델에서 출혈 성 쇼크에 대 한 치료로 부분 하 고 완전 한 대동맥 폐색의 생리 효과 비교 목적. 부분 대동맥 폐색 외상 (송탄) 카 테 터 (그림 1)에서 선택적 대동맥 풍선 폐색을 사용 하 여 달성 되었다. 송탄 테 2-풍선 수 있는 시스템을 내부 luminal 혈액의 흐름, 그로 인하여 혈관 침대는 폐색에 원심 부분 대동맥 흐름을 제공 하는. 완전 한 대동맥 폐색 (예를 들어,코 다) 대동맥 폐색 단일 풍선 카 테 터를 사용 하 여 달성 되었다 (그림 1). 치료 그룹 전체 또는 부분 대동맥 풍선 폐색 카 resuscitative 대동맥 폐색을 무작위로 했다 (n = 2/그룹).

마 취 및 삽 관 법의 유도, 마 취, 계측, 35 %TBV 출혈 (20 분 총; 첫 번째 7 분 동안 절반 및 절반 나머지 13 분 이상), 대동맥 풍선 폐색의 유지 보수를 포함 하는 모델의 주요 단계 및 전 혈 소생 (폐색의 60 분;는 폐색의 마지막 20 분 동안 20% 전체 혈액 소생), 중요 한 관리 hemodynamic 관찰, 그리고 수확 하는 조직으로 안락사 (240 분) 모니터링. 그림 2 에서는이 실험에 활용 하는 모델을 보여 줍니다.

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프로토콜

동물을 사용 하 여 연구를 실시, 조사 동물 복지 법 규정을 준수 하 고 동물과 실험 동물 및 원칙에 관련 된 다른 연방 법령 관리 및 사용에 대 한 가이드의 최신판에 명시 국가 연구 위원회의 실험실 동물. 이 연구 프로토콜 미시간 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 대학에 의해 승인 되었다. 실험은 모든 규정 및 연구에 있는 동물 복지에 관한 지침에 따라 실시 했다.

1. 동물 선택과 새 환경 순응

  1. 사용 여성 요크 셔 Landrace 잡종 돼지 (n = 2/그룹, 연령 범위: 5-6 개월, 무게 범위: 40-60 kg) 실험에 대 한.
  2. 시설에 그들의 도착 후 개별적으로 감 금 소에 있는 동물을 집 하지만 연습장 주변 동물 사이의 충분 한 상호 확인 하십시오.
  3. 그들은 완전히 실험을 수행 하기 전에 acclimated 됩니다 있도록 5 d 이상 동물을 집. 이 기간 동안 동물 표준 식단을 먹 고 건강의 좋은 상태에 있는지 확인 그들을 관찰.
  4. 먹고는 삽 관 법 중 흡입의 위험을 방지 하기 위해 수술 전에 자정 이후 음주에서 동물을 유지.

2. 마 취 및 삽 관 법

  1. 진정 동물 5 mg/kg tiletamine/zolazepam 주어진 피하 (IM)와 대 둔 근 근육에 동물 주택 지역에 있는 동안. 동시에, anticholinergic 에이전트는 삽 관 법 중 분 비를 최소화 하기 위해 아트로핀 0.05 mg/kg IM을 제공 합니다.
  2. 수술 실에 주거 지역에서 동물을 수송 하 고 그것을 운영 테이블에 부정사 위치에 놓습니다.
  3. 흡입된 isoflurane (2%-5%)를 사용 하 여 마 취를 유도. 캐리어 가스로 21% 산소 (0.4 L/min) 공기 (4 L/min)와 혼합을 사용 하 여 흡입된 마 취 가스를 제공.
  4. 마 취의 원하는 깊이 달성 되 고, 하는 동안 필요에 따라 체액, 약물, 또는 마 취의 4 행정에 대 한 귀 정 맥에는 20 G 주변 정 맥 (IV) 카 테 테 르 장소.
  5. 동물 마 취의 원하는 깊이 획득로 부드럽게 씻어 어떤 낭비와 왼쪽 및 오른쪽 사 타 구니 지역, 왼쪽 및 오른쪽 목과 복 부의를 포함 하 여 요원 사이트에서 파편. 전기 머리 깎기를 사용 하 여 요원 사이트에서 모든 머리카락을 제거. 동물의 뒷 다리를 꼬 집 고 (부족의) 응답을 관찰 하 여 마 취의 깊이 평가 합니다.
  6. 주위는 삽 관 법에 앞서 각 말단 수술 면 로프를 사용 하 여 운영 테이블에 동물을 확보.
  7. 외과 면 밧줄의 짧은 조각을 사용 하 여 해제를 구두 구멍을 엽니다 혀 함께 mandible. 면 로프의 다른 조각을 사용 하 여 maxilla 아래쪽으로 당겨. 턱 휴식은 충분 하거나 보컬 폴드 축소, 짧게 isoflurane 수준을 향상 하 고이 단계를 반복.
  8. 비 지배적인 손을 사용 하 여 기존의 후 두 경 장착 조명된 밀러 칼 날에 12의 핸들을 잡고. oropharynx 통해 밀러 블레이드 팁을 전달 합니다. 구강에서 블레이드 기동 시키기 동안 치아와 구강 점 막 보존 하기 위해 주의 연습. 천천히는 후두개 명확 하 게 구상 될 수 있다 때까지 블레이드 팁과 후 두 입구 과거 사전 사전. 손목을 사용 하 여, 블레이드, 후 두의 명확한 보기를 얻을 그런 후두개, 높이 들어올립니다.
  9. 6.5 장소 Fr 또는 기도로 성 주름 사이 stylet와 7 Fr endotracheal 관 (ETT). 점 막 자극으로 인해 laryngospasm, 경우 보컬 폴드 및 메디아 glosso epiglottic 필드에 2 %lidocaine 적용 하 고 재평가.
  10. 완전히 기도 다운 튜브는 튜브에 확고 한 그립을 유지 하면서 발전 하기 전에 stylet을 제거 합니다. 위 내용의 포부와 팔목 주위 어떤 공기 누출을 방지 하기 위해 공기의 10-15 cm3 풍선 팔목을 부 풀 려.
  11. 호흡 필터 (열과 습기 교환기)를 통해 기계적 통풍에는 1 명이 연결 합니다. 주 둥이 (maxilla) 주위 면 테이프를 매 여는 ETT를 보안 합니다.
  12. 실패 한 삽 관 법의 경우 동물 oxygenate 시키고 추가 시도 앞에 짧게 환기.
  13. 적절 한 기계적 인공 호흡기 설정 확인: 혼합 21% 산소 및 공기; 해 양의 7-10 mL/kg 몸 무게; 10-15 호흡/40 mmHg ± 2 mmHg의 끝 갯벌 pCO2 유지 분의 호흡 속도.
  14. 귀, 혀, 또는 혈액 산 소화 및 심장 박동을 측정 하는 꼬리에 펄스 산소 농도계를 놓습니다. 지속적인 온도 모니터링을 위해 항문 구멍을 통해 직장 조사 사전.
    참고: 동물의 온도 38 ° C ~ 40 ° C 온수 온도 규제 운영 테이블, 열 매트, 또는 난방 담요를 사용 하 여 사이 유지 될 것입니다.
  15. Isoflurane (1%-3%)를 사용 하 여 절차를 통해 마 취의 유지 보수에 대 한. 이 시간 동안 뒷 다리 핀치를 사용 하 여 통증 반사에 대 한 테스트 하 여 마 취의 깊이 평가 합니다. 또한, 프로그래밍 된 호흡 속도 일치 하는지 확인을 호흡기에 호흡 속도 모니터링 합니다.
    참고: 과다 호흡 마 취의 부적당 한 깊이 나타냅니다.

3. 수술 부위의 살 균 (준비 및 Draping)

  1. 실험 절차에 대 한 그들을 둘러싼 광범위 한 지역으로 절 개 사이트를 준비 합니다. 실험에 대 한 절 개 사이트 포함 양자 사 타 구니 지역, 양자 목 및 더 낮은 복 부. Povidone-요오드 5 분의 풍부한 금액으로 그들을 닦 고 하 여 요원 사이트를 소독.
  2. 건조, 살 균 거 즈를 사용 하 여 피부에서 povidone-요오드 비누를 제거.
  3. 메 마른 외과 분야를 보존 하 신 사이트 주위 메 마른 외과 수건을 놓습니다. 수건 집게를 사용 하 여 안전한 장소에 수건. 수술 사이트의 어떤 오염 든 지 방지 하기 위해 살 균 드 레이프와 동물을 커버.

4입니다. cannulation

  1. 대 퇴 동맥 및 정 맥 cannulation
    참고: 오른쪽 대 퇴 동맥, 왼쪽된 대 퇴 동맥, 및 왼쪽된 대 퇴 정 맥 cannulation 수행 됩니다. 오른쪽 대 퇴 동맥은 대동맥 풍선 폐색 카 테 터 삽입에 대 한 14 Fr 삽입 칼을 사용 하 여 cannulated. 왼쪽된 대 퇴 동맥은 원심 지도 모니터링 5 프랑 카 테 터를 사용 하 여 cannulated. 8 프랑 카 테 터는 왼쪽된 대 퇴 정 맥 유체 관리 및 혈액 철수에 배치 됩니다. 오픈 Seldinger 기술 모든 cannulations15혈관 접근에 채택 된다.
    1. 절 개를 하기 전에 동물의 뒷 다리를 곤란 하 게 하 여 마 취의 깊이 평가 합니다.
    2. 메스를 사용 하 여 숫자 10 메 마른 외과 블레이드를 장착, 확인 오른쪽에 세로 8 c m 절 개는 4 위에 cm, 4 cm 오른쪽 사 타 구니 주름 아래 사 타 구니.
    3. 피하 조직과 근육을 통해 해 부 고 적절 한 노출을 위한 2 개의 Weitlaner 견인 기를 사용 합니다. 추가 상승에 대 한 육군-해군 견인 기를 사용 하 여 필요한 경우.
    4. 사용 하 여 Mixter 직각 포 셉 electrocautery neurovascular 뭉치는 명확 하 게 노출 될 때까지 결합 조직을 통해 해 부하.
    5. 신중 하 게 동맥 해 부. 측면-대부분 구조는 신경 보존.
    6. 신중 하 게 정 맥, 동맥에서 가장 medially 위치 해 부.
    7. 2-0 실크 넥타이 사용 하 여 동맥의 근 위 및 원심 제어 이득.
    8. 동맥을 펑크 20 G 각도 중개자 바늘을 사용 합니다. 타악기는 관찰 하 여 배 루멘에서 적절 한 위치를 확인 바늘의 다른 쪽 끝을 통해 혈액 흐름.
    9. 사전에 각된 바늘의 루멘을 통해 guidewire 라운드 밀고 0.35.
    10. guidewire 통해 바늘을 철회 한다. 장소에 그것을 잡고는 guidewire의 마이그레이션 없음을 확인 합니다.
    11. 10 Fr 팽창 guidewire 같은데요 동맥에서 개통을 통해 전달 합니다. 10 Fr 확장기를 제거 합니다. guidewire 이상 14 Fr 삽입 칼을 삽입 합니다.
    12. 조심 스럽게 유지는 동맥 내부 정 guidewire 함께 삽입 칼 집에서는 확장기를 제거.
    13. 플러시 배 루멘 내의 그것의 위치를 보장 하기 위해 삽입 칼 집.
    14. 3-0 polyglactin 봉합과 장소에서 카 테 터의 끝을 보호 합니다.
    15. 3-0 나일론 봉합 사를 사용 하 여 수행 overlying 피부의 임시 실행 폐쇄.
    16. 왼쪽된 대 퇴 동맥 cannulation 5 프랑 카 테 터 (초기 팽창)을 사용 하 여 위에서 언급 한 단계를 반복 합니다. 비슷한 패션에 왼쪽된 대 퇴 정 맥을 분리 하 고 8 프랑 카 테 터를 사용 하 여 cannulate. 3-0 나일론 봉합 사를 사용 하 여 수행 overlying 피부의 임시 실행 폐쇄.
  2. 경 동맥 및 외부 경 정 맥 cannulation
    참고: 양자 외부 경 정 맥과 좌 일반 경 동맥의 cannulation 수행 됩니다. 5 프랑 카 테 터는 인접 지도 모니터링, 왼쪽된 일반 경 동맥 및 유체 관리 및 vasopressor 주입에 대 한 추가 중앙 정 맥 접근을 위한 왼쪽된 외부 경 정 맥에 8 프랑 카 테 터에 배치 됩니다. 9 프랑 카 테 터 (예를 들어, 백조 Ganz)는 폐 동맥과 폐 동맥 도관 법에 대 한 오른쪽 외부 경 정 맥에 배치 카 테 터, 경 흐름 프로브는 경 유량 바로 일반적인 경 동맥 주위에 배치 하는 동안 모니터링. Seldinger 접근 모든 cannulations에 대 한 혈관 액세스 하는 데 사용 됩니다.
    1. 10-블레이드 메스를 사용 하 여 게 6 cm 수직 절 개를 약 2 cm 옆 목의 왼쪽에서 중간.
    2. Electrocautery를 사용 하 여 sternocleidomastoid (SCM) 근육 노출 때까지 피하 조직을 통해 해 부.
    3. 완전 철회에 대 한 절 개의 인접 하 고 원심 측면에 Weitlaner 견인 기를 배치 합니다.
    4. 왼쪽된 외부 경 정 맥 노출 SCM 근육의 측면 테두리 따라 해 부.
    5. 선박 cannulation 다음 단계 4.1.8-4.1.14에 의해 얻을 수 있습니다. 삽입 하 고 플러시, 정 맥에는 8 프랑 카 테 테 르를 확보.
    6. 좌 일반 경 동맥 노출, SCM 근육의 내측 가장자리를 해 부. 장소는 Weitlaner 견인 노출 향상입니다.
    7. 기도의 측면 테두리 따라 경도 결합 조직을 통해 해 부. 그들이 발생 하는 경우 흉 선 동맥을 유지 합니다.
    8. 경 동맥, 내부 경 정 맥 그리고 미주 신경 경 삼각형을 표시 합니다. 그것의 궤도 결정 하기 위해 일반적인 경 동맥을 만져
    9. 신중 하 게 정 맥과 신경에서 일반적인 경 동맥 해 부.
    10. 다음 단계 4.1.8-4.1.14 경 cannulation을 수행 합니다. 삽입 하 고 플러시, 앞에서 설명한 대로 동맥에서 5 프랑 카 테 터를 확보.
    11. 4.1 단계를 반복 합니다. 해 부 및 오른쪽 외부 경 정 맥 및 오른쪽 일반적인 경 동맥의 격리.
    12. 바로 일반적인 경 동맥 주위 4mm 경 동맥 흐름 프로브를 배치 합니다. 흐름 프로브 및 최적의 흐름 신호에 대 한 선박 사이 변환기 젤을 적용 하 고.
    13. 다음 단계 4.1.8-4.1.14 오른쪽 외부 경 정 맥 9 Fr 중개자 칼을 사용 하 여 cannulate. 플러시 및 카 테 테 르 장소에서 보안. 3-0 나일론 봉합 사를 사용 하 여 수행 overlying 피부의 임시 실행 폐쇄.

5. 파 카 테 터 삽입

  1. 주입 포트, 인접 포트 및 일반 식 염 수 (NS)와 카 테 터의 원심 포트 플러시되고 그리고 변환기 튜브에 연결. 중앙 정 맥 압력 (CVP) 포트로 인접 포트를 지정 하는 동안 원심 포트 폐 동맥 (PA) 포트로 지정 됩니다.
  2. 카 테 터를 이동 하 여 모니터에 유물 추적에 대 한 확인 합니다. 이 테 작동 하는지 있는지 확인 위해 수행 됩니다.
  3. 미리 멸 균 소매를 통해 펜 실바 니 아 테.
  4. 3 cm3 주사기를 사용 하 여, 인플레이션에 대 한 테스트를 공기의 1.5 c m3 보다 더와 PA 카 테 터의 풍선을 부 풀 려. 삽입 칼 집에서 카 테 터를 삽입 하 고 풍선 폐
  5. 9 Fr 삽입 칼 집 통해 PA 카 테 터를 삽입 합니다. 일단 파 테 18 cm 이상 삽입은, 공기의 1.5 c m3 보다 더 이상 함께 풍선을 부 풀 려.
  6. 천천히 전진 파 테 고 삽입 동안 부정맥에 대 한 모니터를 확인 합니다. 심 실 ectopy, 경우 급증 하 고 폐는 풍선의 진행을 방지 하기 위하여. 삽입 되 면 어떤 식으로든에서 어려운, 풍선의 공기를 빼는 해야 고 테 철회 해야 하 고 다시 삽입.
  7. 폐 동맥 쐐기 압력 (PWP) PA에 오른쪽 심 실 (RV) 오른쪽 아 트리 움 (RA)에서 전환 평가 모니터를 관찰 합니다.
  8. 풍선이 폐 고 PA 추적 모니터에 반환 확인 합니다.
    참고: 오른쪽 외부 경 정 맥에 삽입 사이트에서 카 테 테 르의 적절 한 길이 대략 45-55 cm입니다.
  9. 아빠는 내 카 테 터의 위치를 확보 하기 위하여 삽입 칼 집에 멸 균 소매의 끝에 연결
  10. 심장 산출 (CO) 및 정 맥 산소 (SVO2)의 채도를 캡처 단위를 PA 카 테 터의 삽입 포트를 연결 합니다.
  11. PA 테 모니터링 시스템 보정. 몸 길이 무게는 동물의 using, 동물에 대 한 시스템 모니터링 PA 테의 비보에 교정을 실시 합니다. 정 맥 혈 가스를 사용 하 여 산소 포화와 헤모글로빈 수치를 사용 하 여 추가 교정에 대 한.

6. cystostomy 관 배치

  1. 10-블레이드 메스를 사용 하 여 중간에 5cm 더 낮은 복 부 절 개를 확인 합니다.
  2. 피하 조직과 교육을 통해 해 부 electrocautery를 사용 하 여 알바. 해 부 동안 각 레이어를 시각화 합니다.
  3. 오 줌 방광 extracorporealize
  4. 2 기금 집게와 파악 ureteral 구멍에서 복 부 표면에 오 줌 방광.
  5. Electrocautery를 사용 하 여 내부 루멘 노출 방광에 작은 개통을 확인 합니다.
  6. 흡입을 사용 하 여 방광 루멘 내에서 모든 소변을 제거. 외과 스폰지 소변 방광 외부의 어떤 실수로 흘림에 대 한 사용할 수 있습니다.
  7. 4-0 폴 리 프로필 렌 봉합 사를 사용 하 여 방광의 임시 지갑-문자열 폐쇄를 수행.
  8. 방광 루멘 안에 18 프랑 폴 리 카 테 터를 배치 하 고 10 cm3 주사기를 사용 하 여 풍선을 부 풀 려. 폴 리 카 테 터를 오 줌 배수 가방을 연결 하 고 운영 테이블의 측에 그것을 확보.
  9. 방광 루멘에서 폴 리 카 테 터를 확보 하 여 아 4-0 폴 리 프로필 렌 봉합을 묶어.
  10. 3-0 나일론 봉합 사를 사용 하 여 수행 하는 복 부 벽의 overlying 피부의 임시 실행 폐쇄.

7. 완전 및 부분 대동맥 풍선 카 테 터 삽입

  1. 전체 또는 부분 대동맥 풍선 폐색 카 받을 동물 무작위.
  2. 0.035 260 cm 14 Fr 삽입을 통해 Amplatz 뻣 뻣 한 Guidewire 오른쪽 대 퇴 동맥에 칼 집 그리고 supraceliac 대동맥 (영역 1)으로 복 부와 흉부 대동맥의 초음파를 사용 하 여 그것을 가이드에 삽입 합니다.
  3. 폐색 출혈을 다음을 수행 하는 대동맥의 영역 1에는 guidewire 통해 풍선 폐색 카 테 터를 삽입 합니다.
  4. 초음파로 대동맥의 영역 1에 대동맥 풍선 폐색 카 테 터의 마지막 배치를 확인 합니다.

8. 자가 Hemodynamic 및 실험실 모니터링

  1. 튜브, 변환기, 그리고 hemodynamic 모니터에 튜브를 사용 하 여 모니터링 시스템에 침입 카 테 터의 연결을 확인 합니다. 침략 적 모니터링 시스템 해야 될 ' 제로 ' 정확한 모니터링 되도록 동물의 심장의 수준.
  2. 기록 생리 데이터는 인접 및 원심 지도, 심장 박동 (인사), CVP는, CO, PA 압력, SVO2, 끝 간만 CO2, 그리고 핵심 체온을 포함 하 여 실험을 통해.
  3. 기록이 변수 마다 5 분 동안 출혈 및 풍선 인플레이션 단계, 뿐만으로 매 15 분 실험의 나머지 기간 동안.
  4. 4 시간-포인트에서 혈액 샘플을 수집: 기준선 (BL), 포스트 충격 (PS), 후 소생 (홍보), 실험의 끝 (E)에. 혈액 10 mL 각 시간 지점에서 플라스마와 혈 청 분석을 위해 수집 됩니다.
  5. ABG 주사기에 혈액 1 mL를 수집 하 여 동맥 혈 가스 (ABG) 샘플링을 수행 합니다. 각 상기 시간 포인트에서 ABG 샘플링을 수행 하 고 또한 실험 기간 동안 필요할 때. 혈액 가스 분석기를 사용 하 여 분석에 대 한.
    참고: 각 샘플 10 분 이상 지연 결과16의 효율성을 줄일 수 있기 때문에 혈액을 그리기의 10 분 안에 분석 되어야 합니다.

9입니다. 출혈

  1. TBV 계산 합니다.
    Ml에서 TBV g에서 무게 × 0.06 + 0.77 =
  2. 첫 번째 7 분 동안 반 그리고 다음 13 분 동안 다른 하프 20 분 제거 기간 동안 자동된 펌프를 사용 하 여 TBV의 35% 출혈.
  3. 표준 혈액 컬렉션 가방에서 혈액을 수집 합니다. 미래 수혈의 기대에 4 ° C에서 그들을 저장 합니다.
  4. 지도 아래 30 mmHg 감소 하는 경우는 출혈을 중지 하 고 isoflurane, 해제 한 NS의 50-100 mL boluses를 관리.
  5. 지도 30 mmHg에 반환 될 때 출혈이 다시 시작 합니다.

10. 대동맥 풍선 폐색 테 인플레와 전체 혈액 소생

  1. 9-12 c m3 의 공기 또는 추가 풍선 물가 지적 원심 지도 다음에 더 이상 감소까지 대동맥 풍선 폐색 테 부 풀 려.
  2. 완전 한 대동맥 풍선 폐색 테에 대 한 그것을 떠나 있는 동안 원심 대동맥 흐름을 촉진 하기 위하여 부분 대동맥 풍선 폐색 테에서 와이어를 제거 합니다. 존 1 테 마이그레이션을 배제 하기 위해 초음파를 사용 하 여 대동맥 풍선 폐색 카 테 터의 위치를 확인 합니다.
  3. 중단 된 3-0 나일론 봉합 사를 사용 하 여 피부에 카 테 터를 보호 합니다.
  4. 대동맥 폐색의 40 분, 다음 자동된 펌프를 사용 하 여 20 분 동안 전체 혈액 크거나 볼륨에는 TBV 통해 왼쪽된 대 퇴 정 맥 카 테 터의 20%를 가진 동물을 소생. 40 ° C의 온도 대상으로 하는 수혈에 대 한 따뜻한 혈액을 사용 하 여
  5. 소생, 후 5 분 이상 증분 풍선 폐.
  6. 14 Fr 삽입 칼 집에서 대동맥 풍선 폐색 카 테 터를 제거 합니다.
  7. 모니터는 hemodynamics 밀접 하 게이 시간 동안 연결 된 저 혈압으로 국 소 빈 혈 reperfusion 상해의 알려진된 위험을 주어진.

11. 중요 한 관리, 관찰, 및 복구

  1. 그들의 생리 및 실험실 매개 변수의 지속적인 모니터링으로 4 h에 대 한 동물을 관찰 합니다.
  2. 정 맥 유체 (50 ml/h에서 NS 주입) 유지 보수를 제공 합니다.
  3. NS는 CVP 대상 떨어지면 20 ml/kg boluses 뒤의 30 ml/kg boluses를 관리 함으로써 6 mmHg의 CVP를 대상. 시간별 유체 응답을 평가 합니다.
  4. 노르 주입 (0.024 mg/ml)을 사용 하 여 60 mmHg의 지도 대상.
  5. 생리 38-40 ° C의 온도 난방 담요를 사용 하 여 유지 합니다.
  6. 4 h 기간의 끝에, 나트륨 pentobarbital (100 mg/kg) 주입으로 동물을 안락사.

12입니다. 검 시

  1. 동물에서 모든 필수 선 및 튜브를 제거 합니다.
  2. 일반 얼음으로 컨테이너를 준비 하 고 시체에서 제거 직후 장기 조직을 동결 운영 테이블 옆에 있는 장소.
  3. 메스를 사용 하 여 피부, 피하 조직, pectoralis 근육과 늑 골 연골을 통해 해 부 왼쪽 sternal 국경 6 cm 긴 수직 절 개를 만들기 위해. 흉 강 심장과 폐를 폭로 입력 합니다.
  4. 메스로 절 개 하 여 마음에서 pericardial 멤브레인을 제거 하 고 집게를 사용 하 여 심장의 꼭대기를 잡아. 메스를 사용 하 여 정점에 심 혼의 5 x 5 cm 섹션을 잘라.
  5. 가 위를 사용 하 여 폐의 기지의 앞쪽 테두리에서 폐의 5 x 5 cm 섹션을 잘라.
  6. 복 부, 복 부 내장 노출의 앞쪽 중간에 thoracotomy 절을 확장 합니다.
  7. 집게를 사용 하 여 간 좌 엽 고 5 x 5 cm 섹션을 잘라.
  8. 비장에서 샘플을 얻기를 위한 동일한 프로세스를 반복 합니다.
  9. 오른손을 사용 하 여 신장 잡으려고 왼쪽된 retroperitoneum 입력 창을 만들. 신장 실질 동원 후 신장 동맥, 정 맥, 그리고 ureter transect. 신장 캡슐을 제거 합니다.
  10. 부드럽게 5 cm 긴 섹션의 작은 창 자에서 대변을 짜 내 고가 위를 사용 하 여 창 자는 mesentery에서의 5 cm 긴 섹션을 잘라.
  11. 메스를 사용 하 여 허벅지에서 근육 근육의 5 x 2 cm 긴 섹션을 잘라.
  12. Microcentrifuge 튜브에 배치 하는 작은 섹션으로 그들을 절단 하 여 이러한 샘플 추가 처리 합니다. 플래시-동결 조직 샘플 드라이 아이스 나 액체 질소에 튜브를 삽입 하 여.
  13. 조직의 조직학 평가 대 한 섹션을 잘게 잘라 3 ㎝ 길이를 해결 하기 위해 포함 하는 포 르 말린 솔루션 50 ml 원뿔 관을 사용 합니다.

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결과

Hemodynamic 및 생리 적 매개 변수:

지도 (그림 3A - 3D) 출혈 후 즉시 감소. 풍선 인플레이션 단계 동안 완전 한 폐색 그룹에서 동물 부분 폐색 그룹 (그림 3A 와 3B)에서 동물에 비해 더 높은 인접 지도 경험. 풍선 물가 동안 평균 원심 지도 완전 한 폐색 그룹에 비해 부분 폐색 그룹에서 더 높았다 (평균 원심 지도, 풍선 인플레이션 단계; 부분: 31 ± 2.9 mmHg, 전체: 16.5 ± 1.14 mmHg; p > 0.05), 부분 원심 대동맥 흐름 (그림 3C 와 3D) 반영. 다음 소생, 인접 하 고 원심 지도 두 그룹 전부에서 증가 하...

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토론

이 프로토콜에서 우리 돼지에서 출혈 충격 모델을 강조. 이 모델은 안정적이 고 재현16,17,,1819수를 보였다. 유사한 모델 동물 생리학16,20에 출혈 충격의 효과 조사 하는 여러 과학적 연구에서 고용 있다. 또한,이 모델 또한 표시 성공12,13,,1619, 출혈 성 쇼크에 모두 약리학 적인 수술 치료 개입을 테스트 하기 위해 사용 되었습니다. ...

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공개 사항

이 작품은 미국 육군 의료 연구 및 계약 번호 아래 물자 명령에 의해 지원 W81XWH-16-C-0102입니다. 조회, 의견 및 결과이 보고서에 포함 된의 저자 고 해석 해서는 안 육군 위치, 정책, 또는 결정의 공식 학과로 그래서 다른 설명서 지정 하지 않는 한.

감사의 글

우리는 그들의 동물 연구를 레이첼 오코넬 제시카 리를 인정 하 고 싶습니다. 우리 또한 소 령 일반 해 롤 드 Timboe, 메릴랜드, MPH, 미국 육군 (ret.), 누구는 고문과이 프로젝트에 대 한 멘토를 인정 하 고 싶습니다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Yorkshire-Landrace SwineMichigan State University 수의학 농장
마취 : TelazolPfizer용량 : 2-8 mg / kg; IM
항콜린성: 아트로핀화이자용량: 1mg, IM
마취: 이소플루란백스터용량: 1-5%, INH
베타딘Humco
알코올 70%HumcoNDC 0395-4202-28
Datex-Aespire 마취기GE Healthcare7900
기관내관DEE 수의학20170518동물에 적합한 크기(6.5 또는 7.0F)
후두경Miller85-0045
StyletHudson RCI5-151--1
Jelco 20G IV 카테터Smiths Medical4054
수술실 모니터(활력 징후 모니터)SurgiVet AdvisorV9201이 필요할 수 있습니다
.Kimberly Clark90142외과 의사에게 적합한 크기를 사용하십시오.
멸균 수술용 장갑Cardinal Health (Allegiance)22537-570외과 의사에게 적합한 크기를 사용하십시오.
Cautery PencilMedlineESPB 2000
흡입 튜브MedlineDYND50251
Sunction 팁: YankauerMedlineDYND50130
Bovie Aaron 1250 전기소작 유닛Bovie Medical Co. FLBOV-A1250U
Salpel Blade - Size #10Cardinal Health (Allegiance)32295-010
Scalpel 핸들 Martin10-295-11
Debakey 집게RobozRS-7562
Weitlander 견인RobozRS-8612
Mayo 가위RobozRS-76870SC
육군 해군 견인Teleflex164715
Mixter 직각 집게Teleflex175073
5F(1.7mm) 11cm 삽입 칼집(0.35인치 가이드와이어포함) Boston Scientific16035-05B
8F(2.7mm) 11cm 삽입 칼집(0.35인치 가이드와이어포함) Boston Scientific16035-08B
20G 각도 도입부 바늘화살표AK-09903-S
14F(4.78mm) 13cm 삽입 칼집(10F 확장기포함) Cook MedicalG08024
2-0 실크 18'' 45 cmEthiconA185H
3-0 Vicryl 36'' 90 cmEthiconJ344H
3-0 나일론 18'' 45 cmEthicon663G
4-0 Prolene 30'' 75 cmEthicon8831H
20 ml 주사기Metronic/Covidien8881512878
3 mL 주사기Metronic/ Covidien1180300555
6 mL 주사기Metronic/Covidien1180600777
1000ml 0.9% 식염수Baxter2B1324X
Foley 카테테르 (18F 30 cc)Bard0166V18S
비뇨기 배수 가방Bard154002
9F 10 cm 삽입 칼집화살표AK-09903-S
Swan-Ganz 폐동맥 카테터 (8F)Edwards Lifesciences co. CA746F8
경동맥 유량 프로브 시스템Transonic, Ithaca, NY3, 4 또는 6mm 프로브
SABOT 카테터Hayes Inc.
CODA 풍선 카테터쿡 메디컬8379144
초음파, M-TurboSonoSite
앰플라츠 스티프 가이드와이어(0.035인치, 260cm)쿡 메디컬G03460
동맥혈 가스 주사기Smiths Medical4041-2
동맥혈 가스 분석기Nova 생화학ABL800
Masterflex 펌프Cole PalmerHV-77921-75
혈액 수집 가방Terumo1BBD606A
매크로 IV 드립 세트Hospira12672-28
PentobarbitalPfizer용량 : 100 mg / kg; IV
Eppendorf 튜브Sorenson11590
50cc 원추형 튜브Falcon352097
FormalinFisherbrand431121
Bair Hugger Normothermia SystemArizant Healthcare, Inc.
최소 2개의 수술 가운기 기

참고문헌

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