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방법 논문

Murine MPTP 유발 파 킨 슨 병 모델에서 자발적인 운동의 행동 평가

17.6K 조회수

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DOI:

10.3791/58653

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2019년 1월 7일

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이 논문에서

요약

우리는 MPTP, 실린더 및 오픈 필드 테스트를 사용 하 여 모터 기능을 측정 하는 행동 평가 사용 하 여 파 킨 슨 병에 대 한 murine 모델의 설립을 설명 합니다. 우리 다음 사용 하 여 l 아미노산의 일종 한 예로 PD 약물의 연구에서이 모델을 적용 하는 방법을 보여 줍니다.

초록

파 킨 슨 병 (PD)은 일반적인 신경 장애 질환, 떨고, 강성, 운동과 치 매의 느려짐 현상 발생. 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) substantia nigra의 두뇌에서 dopaminergic 신경 세포를 파괴 하 여 일부 파 킨 슨 병 같은 증상을 이어질 수 있습니다. 그것은 다양 한 동물 연구에서 PD 모델 확립을 따라서 사용 되었습니다. 여기, 쥐 받을 MPTP 주사 (20 mg/kg/일) 7 일 및 행동 테스트 8 하루에 수행 됩니다. 이 모델은 PD의 연구에서 효율적으로 적응 시켰다. 여기에 행동 테스트 실린더 테스트 및 오픈 필드 테스트를 포함합니다. 실린더 실험은 다른 환경에 둘 때 그들의 앞 발을 들어 동물의 능력을 감지 하는 데 사용 됩니다. PD로 모델 마우스 표시 arching-마우스는 다시 아치-발 liftings 감소의 수. 이 테스트 실행 하기 쉽습니다. 오픈 필드 테스트는 실행, 산책, 그리고 움직이기 남은 쥐 보내는 시간의 양을 감지 하는 데 사용 됩니다. 우리는 소프트웨어를 사용 하 여 오픈 필드에서 동물 들의 움직임을 분석 하 고 데이터를 가져옵니다. 마지막으로, 우리 l 아미노산의 일종을 사용 하 여, 가장 일반적으로 PD 약물의 연구에이 모델을 적용 하는 방법을 보여을 한 예로 PD 약물을 사용. 우리의 결과 MPTP neurotoxicity 유도 모터 적자는 아미노산의 일종에 의해 완화 될 수 있습니다 나타냅니다.

서론

파 킨 슨 병 (PD), 더 오래 된 개인 중 가장 흔한 질병 중 하나는 장기적인 신경 장애1. 환자는 항상 떨고, 강성, 운동과 치 매 시간2이상의 악화의 느림 현상이 표시 합니다. 감각을 포함 한 다른 증상, 수 면, 그리고 정서적 문제 또한 일반적으로2를관찰 된다. PD의 원인은 아직 불분명 있지만 참여 유도 dopaminergic 신경 세포 substantia nigra3에서 손실 및 Lewy 몸과 Lewy neurites의 다양 한 지역에서의 개발 유전과 환경 요인 일반적으로 믿어진다는 뇌4입니다.

PD의 연구 중 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)5 널리 재현 실험 모델에서 일부 PD 증상에 적응 이다. 1984 년에 랭스턴 외. 다람쥐 원숭이 MPTP의 주사 Parkinsonism6에 결과 먼저 발견. MPTP 설치류 모델은....

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프로토콜

이 연구는 동물 실험을 고려 하는 국제, 국가 및 기관 규칙에 따라 수행 되었다. 연구 프로토콜의 난카이 대학 동물 윤리 위원회에 의해 승인 되었다.

1. MPTP와 아미노산의 일종 관리

참고: 10 주 오래 된 여성 BALB/c 마우스 중국 과학원 동물학 연구소에 의해 제공 되었다. 쥐 지 내게 6 했다 21-22 ° C의 일정 한 온도 상대 습도 55% ± 5%의 당에서 12 h 명암 주기 (표시등에 08시 ~ 20시), 케이지. 압력가 표준 마우스 차 우 같은 배합 및 물 광고 libitum 의 모든 동물에 게 주어졌다.

  1. 순응의 1 주 후 동물 6 생쥐의 세 가지 그룹으로 나눕니다.
  2. 그룹 1, 염 분의 250 µ L/마우스/일 복 주사 (단계 1.5 참조)에서 관리 1 일 하루 7와 intragastric 관리 수행 (단계 1.6 참조) 8 일에 염 분의 250 µ L/마우스의.
  3. 그룹 2, 20 mg/kg의 복 주사 관리/MPTP 매일 1 일에서 7 한 일 다음 주 8에서 염 분의 250 µ L/마우스의 intragastric 관리를 수행.
  4. ....

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결과

실린더 테스트에서 벽에 투우사의 감소는 쥐 (그룹 2)로 치료 MPTP 하루 1에서에서 하루 7 염 분 처리 쥐 (그룹 1)에 비해 8 하루에 염 분을 투우사의 증가 쥐 (그룹 3) MP로 치료에서 관찰 되었다 동안에 관찰 되었다 하루 하루 7 1에서에서 TP와 쥐 (그룹 2)을 비교 하 여 8 일에 아미노산의 일종 처리 MPTP 하루 1에서에서 일 7 및 염 주 8 (그림 1).

그림 2 는 대표적인 추적 및 정적 시간 배포 도보 시간 및 생쥐의 세 가지 그룹의 분량. (A) 마우스 식 염 수로 치료 했다. (B) 쥐 주 8에서 하루 7, 염 분을 하루에 1에서 MPTP로 치료. (C) 쥐 주 8에서 7 일과 l 아미노산의 일종에 하루 1에서에서 MPTP로.......

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토론

때문에 두뇌의 substantia nigra에서 dopaminergic 신경의 파괴, MPTP 쥐7파 킨 슨 병 같은 증상 발생합니다. 모터 이상 akinesia 강성15등의 효과적인 억제와 PD, 환자에서 정상적인 일상 활동을 유지 하는 데 도움이 때문에 l 아미노산의 일종은 그것의 임상 사용 이후 PD에 대 한 가장 선호 약 이다. 쥐 취급 MPTP 실린더 테스트 및 MPTP 모델을 연구 하는 데 사용할 수 있는 오픈 필드 테스트와 같은 행동 테스트에서 장애를 보였다. 실린더 테스트 및 오픈 필드 테스트 일반적으로 자발적인 행동을 측정 하는 데 사용 됩니다. 여기, 우리는 PD의 연구에 그들을 적용 하려면이 두 가지 행동 테스트를 수정 합니다. 우리의 결과에서 같이, l 아미노산의 일종은 동물 들의 운동 능력을 개선 하 여 동작에 장애를 줄일 수 있습니다.

일반적으로, 쥐 그들은 계속 새로운.......

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공개 사항

저자는 공개 없다.

감사의 글

우리의 작업은 천진 학부 교육 프로그램 혁신 및 기업가 (보조금 번호 63183004)에 투자 됩니다. 이 프로젝트는 주 키 연구소의의 약 화학 생물학 난카이 대학에서 시작 되었다. 저자는 관심의 충돌이 없는 선언 합니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
70% 에탄올Ruiboxing CompanyRBX-64175
카메라BASLERacA645-100gm
실린더 테스트난카이 대학교 사내 제작N/A
엑셀MicrosoftN/A
레보도파시그마-알드리치72816
Matalb 2017aMathworks해당 없음
MiceInstitute of Zoology, Chinese Academy of SciencesBalb/c성체 암컷 마우스(10주)
MPTPYuanye Biological Technology Company Ltd., ShanghaiS31504-500mg
Open field test난카이 대학교 사내주사기 Solelybio
S-xsgwz-w관개
주사기Jiangxi Fenglin Medical 애플리케이션 (주)hc3824복강내 주사
제작

참고문헌

  1. Dehay, B., Bourdenx, M., Gorry, P., Przedborski, S., Vila, M., Hunot, S., Singleton, A., Olanow, C. W., Merchant, K. M., Bezard, E. Targeting -synuclein for treatment of Parkinson's disease: mechanistic and therapeutic considerations. Lancet Neurology. 14, 855-866 (2015).
  2. Weintraub, D., Comella, C., Horn, L., S,

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재인쇄 및 허가

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