쥐의 사후 뇌졸중 우울증을 유도 하기 위한 중간 대뇌 동맥 폐색 기술

요약

여기에서 우리는 내부 경 동맥을 통해 중간 대뇌 동맥을 폐색 하 여 쥐의 사후 뇌졸중 우울증을 유도 하는 프로토콜을 제시. 우리는 Porsolt 강제 수영 시험과 자당 기본 설정 테스트를 사용 하 여 유도 우울한 기분을 확인 하 고 평가 합니다.

초록

사후 뇌졸중 우울증 (PSD)은 허 혈 성 뇌졸중으로 인해 발생 하는 모든 정신병 합병증의 가장 재발입니다. 더 큰 (약 60%) 모든 허 혈 성 뇌졸중 환자는 PSD로 고생 하 고, 장애는 건강의 증가 된 죽음과 악화를 위한 허 혈 성 뇌졸중 관련 전 구체로 여겨진다. PSD의 이상 징후는 여전히 모호 합니다. PSD의 개발과 발생의 메커니즘을 연구 하 고 치료법을 발견 하기 위해 우리는 쥐의 내부 경 동맥 (ICA)을 통해 중간 대뇌 동맥 (MCA)을 폐색 해야 하는 새로운 프로토콜을 개발 하려고 시도 했습니다. 이 프로토콜은 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)을 통해 쥐에 유도 된 PSD의 모델을 기술 한다. 또한 실험에서 사용 되는 Porsolt 강제 수영 시험과 자당 선호도 검사는 조사 중인 쥐의 우울한 기분을 확인 하 고 평가 하는 것입니다. 원래 절차에 규정 된 것 처럼 외부 경 동맥 (ECA)을 통해 카 테 터를 삽입 하는 대신,이 MCAO 기술은 ICA를 통해 직접 전달 되는 모노 필 라 멘 트를가지고 있습니다. 이 MCAO 기술은 몇 년 전에 개발 되었으며 사망률과 가변성의 감소로 이어집니다. 일반적으로 사용 되는 기준은 생물학적 모델의 선택에서 선호 되는 것으로 받아들여진다. 이 프로토콜로 얻어진 데이터는 MCAO의이 모형은 쥐에 있는 PSD를 유도 하는 방법이 고 잠재적으로 병 리 생리학 및 새로운 약 및 그밖 신경 보호 에이전트의 미래 발달의 이해로 이끌어 낼 수 있다는 것을 보여줍니다.

서론

뇌졸중은 미국^1,2,3에 있는 죽음-가해자 질병의 목록에 넷째, 그것은 선진국에서 성인에서 장애의 대부분을 야기 하는 동안⁴; 이것은 뇌졸중 세계에서 가장 중요 한 건강 문제 중 선도적 인 경쟁자를 만든다. 뇌졸중 생존 환자에서 정상은 드문, 영구 장애를 겪고 생존 피해자의 약 15%-40%, 뇌졸중 발병⁵후 3 개월 기관 치료를 필요로 하는 20%, 그리고 6 개월 생존의 1/3은 그들이 사는 데 도움이 필요 매일⁶. 뇌졸중은 또한 상승 국가 건강 지출에 대 한 계정⁷. 미국 심장 협회의 추정치는 2010⁸에서 $500억 이상에서 미국에서 뇌졸중 관련 비용을가지고 있다.

뇌졸중은 개인의 장기적인 손상을 유발할 뿐만 아니라 치 매, 피로, 불안, 우울증, 정신 착 란 및 침략과 같은 정서적 및 행동 장애를 겪는 경향이 있습니다.

프로토콜

이스라엘 네 게 브의 벤 구리 온 대학의 동물 관리 위원회는이 의정서에 사용 된 모든 치료 및 시험 절차를 승인 했습니다.

1. 실험 절차를 위한 쥐의 제조

참고: 300-350 g의 무게를 가진 성인 남성을 선택 합니다.

1. 1 개의 케이지 당 4 마리의 쥐를, 22 ° c의 비 바리 움과 40%의 습도에서 반전 된 12 시간 빛/어둠의 순환 (8:00 오전에 소등)과 음식과 물을 무제한으로 이용할 수 있습니다.
2. 래 트를 2 개의 그룹, 즉 MCAO 그룹 (n=24) 및 샴 그룹 (n=19) 에 임의로 할당 한다.

2. 수술을 위한 쥐의 준비

1. 수정 된 MCAO 절차를 위해 쥐를 준비 하기 위해, 각 쥐를 소이 소 루 란 (유도를 위한 4%, 수술을 위한 2% 및 유지 보수를 위한 1.3%)의 혼합물로 30 분 동안 마 취 시킵니다. 인덕 션 챔버 내에서 24% 산소 (2L/min)가 자발적으로 호흡 할 수 있습니다.^{29 ,30....}

결과

조직 학적 소견 (표 1)은 MCAO 군에서 동물에 비하여 통계적으로 유의 한 경색 부피를 총 뇌 (p < 0.0001)의 백분율로 밝혀 내었다. 또한 실험 군에서 평가 되 면 통계적으로 유의 한 뇌 부 종 (p < 0.0003)이 그를 샴 대조 군의 것과 나란히 배치 하였다 고 보고 하였다.

표 2에 나타난 바와 같이, 얻어진 NSS 점수는,만-휘트니 테스트 다음에 MCAO 그룹에 대 한 더 높은 수치와 비교 하 여 실험 군에서 낮은 신경학 적 성능을 보여준다: p < 0.001 50 분 후, p < 24 시간 후 0.05, p < 7 일 후 0.05.

토론

여기에 제시 된 MCAO 기술이 원래의 MCAO 모델 보다 안전 하다 고 간주 될 수 있는 방법 중 하나는 ECA 및 후 두 동맥, 터미널 언어, 및 상 악 동맥을 포함 한 그 가지가 손상 되지 않는다는 사실에 의해 예시 된다 ICA를 통해 MCA를 폐색 할 때. MCAO (및 해당 분기)의 원래 모델의 오프셋 (및 그 지점), 거리 해 부 및 응고 하 여⁴⁶, 손상 된 저작 원인, 혈관 공급에 타협으로 인해 근육을 저작 하는⁴⁷. 근육의 파괴는 결국 추가 전산 유체 역학의 방출을 일으킬 수 있습니다. MCA에 대 한 액세스가 ECA를 통해 발생 하는 원래의 MCAO 기법과는 달리, 여기에 설명 된 기술은 ECA 및 그 지류의 혈 류 중단 발생 없이 뇌졸중에 대해 수정 됩니다.

새로운 MCAO 모델을 선호에 대 한 가장 중요 한 인수는 뇌 부 종의 가변성을 줄일 수 있는 능력에 원래 MCAO 나.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
흡수 패드	-
검은 색 무광택 방풍 상자	-		(120cm × 60cm × 60cm), 25 % 중앙 영역과 주변 경계 영역으로 나뉘어
병	Techniplast	ACBT0262SU	100mL의 물과 100mL 1% (w/v) 자당 용액으로 채워진 150mL 병
전기 충격	열 시스템 Ultasonic Inc.	-	-
Horizon-XL	Mennen Medical Ltd
이미징 시스템	Kodak	-	이미징 및 정량화용
모노필라멘트	-
-종이 타월	약국	-	쥐를 물에 담근 후 건조하게 유지하는 데 사용되는 건조 타월
Pexiglass 실린더	-	-	쥐
Purina Chow	Purina	5001	는 5 년 이상 생물 의학 연구에서 사용되어온 수명주기 영양입니다. 이 실험에서 쥐에게 자유로이 제공됨
Rat Cages	Techniplast	2000P	설치류를 위한 기존 주택. 실험 내내 쥐를 수용하는 데 사용되었습니다.
	Canon CanoScan	4200F	-
비디오 카메라	ETHO-VISION (Noldus)	-	오픈 필드 테스트에서 쥐 행동의 고화질 녹화를 위한 디지털 비디오 카메라

, 생쥐 및 햄스터에게 주어진 강제 수영 테스트 설치류 실험실 차우를 수행하는 데 사용되는 높이 100cm, 직경 40cm의 실린더 스캐너