Method Article

마우스의 보조 모터 피질에서 양측 지역 필드 전위 기록을 가진 반구 측면화의 평가

DOI:

10.3791/59310

⸱

July 31st, 2019

 ,  ,  , 
1School of Life Sciences, Guangzhou University, 2Institute for Brain Research and Rehabilitation, South China Normal University, 3School of Life Sciences, South China Normal University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

우리는 마우스의 양측 이차 모터 피질 (M2)에서 국소 전위 (LFP)의 생체 내 전기 생리학적 기록을 제시하며, 이는 반구 측면화를 평가하기 위해 적용될 수 있다. 연구 결과는 WT 통제에 비교된 APP/PS1 마우스에 있는 좌우 M2 사이 동기화의 변경한 수준을 밝혔습니다.

Abstract

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이 문서는 가능한 측면 적자를 평가하는 데 유용한 마우스의 피질 영역에서 생체 내 양자 기록 및 로컬 필드 전위 (LFP)의 분석에 대한 완전하고 상세한 절차를 보여줍니다. 설치류에서 뇌 연결 및 신경 네트워크 활동의 커플링을 평가합니다. 일반적인 신경 퇴행성 질환인 알츠하이머 병(AD)의 근본적인 병리학 적 메커니즘은 크게 알려지지 않았습니다. 변경된 두뇌 측면은 노화 사람들에서 입증되었습니다, 그러나 이상한 측공은 AD의 초기 표시의 한개인지 여부는 결정되지 않았습니다. 이를 조사하기 위해 3-5개월 된 AD 모델 마우스APP/PS1에 리터메이트 야생형(WT) 대조군과 함께 양측 LFP를 기록했습니다. 좌우 보조 모터 피질(M2)의 LFP는 특히 감마 대역에서 WT 대조군보다 APP/PS1 마우스에서 더 동기화되었으며, 이 AD 마우스 모델에서 양측 M2의 반구적 비대칭이 감소됨을 시사한다. 특히, 기록 및 데이터 분석 프로세스는 유연하고 수행하기 쉽고, 또한 신경 회로에 초점을 맞춘 실험을 수행 할 때 다른 뇌 경로에 적용 할 수 있습니다.

Introduction

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알츠하이머병(AD)은 치매의 가장 흔한형태이며 1,2. 세포외 베타 아밀로이드 단백질(β-아밀로이드 단백질, Aβ) 증착 및 세포내 신경섬유 엉킴(NFTs)은 AD 3,4,5의주요 병리학적 특징이지만 AD의 근본적인 메커니즘은 병인은 크게 불분명남아 있습니다. 인식과 기억의 핵심 구조인 대뇌 피질은 AD6에서손상되고, 느린 보행, 환경 탐색 의어려움 및 걸음걸이 장애와 같은 운동 결핍은7세가되면 발생합니다. Aβ 증착 및 신경 섬유성 엉킴은 또한 AD 환자 8의 전운동 피질(PMC) 및 보조 운동 영역(SMA)에서 관찰되었으며, 인지적으로 영향을 받은 노인9,손상된 운동장의 침범을 나타내는 AD 병인의 시스템.

뇌는 세로 균열에 의해 분할되는 두 개의 별개의 대뇌 반구에 의해 형성된다. 건강한 두뇌는 구조....

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Protocol

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중국 과학기술정보통신부(SOf Of Science And The 공) 연구실 의 지침에 따라 모든 동물은 표준 조건(12시간 빛/어두운, 일정한 온도 환경, 음식과 물에 대한 자유로운 접근)에 따라 페어링처리되었으며 실험은 승인되었습니다. 광저우대학교 지역윤리위원회에 회부한다. 이것은 비 생존 절차입니다.

참고: 대표적인 결과에 표시된 데이터의 경우, APP/PS1(B6C3-Tg(Ap6C3-Tg) 85Dbo/J) 이중 형질전환 마우스 및 3-5개월의 리터메이트 야생형(WT) 대조군을 기록(그룹당 n=10)에 사용하였다.

1. 동물 마취 및 수술

  1. 현지 동물 관리 위원회에서 승인된 마취 요법으로 마우스를 계량하고 마취합니다.
  2. 수술 전에 깊은 마취를 확인하기 위해 집게로 꼬리 또는 발가락 핀치를 수행합니다.
  3. 마우스를 입체 전지 장치에 놓고 머리를 고정합니다.
  4. 촉촉한 유지를 위해 두 눈에 눈 연고를 바하십시오. 수술 전 및 수술 후 진통에 관한 현지 동물 관리 지침을 따르십시오.
  5. 수술용 클리퍼를 사용하여 모발을 면도하십시오. 가위로 노출 된 수술 부위 의 중간에 작은 절개 (12-15mm)를 만듭니다. 집게를 사....

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Results

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초기 AD 병리학이 반구 측면화의 용량을 손상시키는지 확인하기 위해 APP/PS1 마우스및 WT 대조군(3-5개월 숙성)의 좌우 M2에서 양측 세포 외 LFP 기록을 실시하고 이들 좌측및 좌측및 좌측의 상호상관관계를 분석하였다. 오른쪽 LFP. WT 마우스에서, 결과는 양수 시간 시차에 좌우 LFP 사이의 평균 상관관계가 음의 시간 시차에서 그와 크게 다르다는 것을 보여주었으며, WT 컨트롤의 M2 영역에서 반구 적 비대칭의 존재를 연루시켰다 (그림4 C; WT 양성, 0.08161 ± 0.01246; WT 음성, 0.0206 ± 0.01218; p = 4.74531E-4 < 0.001 두 샘플 t-test에 의해). 이에 비해, APP/PS1 마우스의 좌우 LFP는 시간 영역에서 더 높은 동기화를 보였으며, 좌우 M2 사이의 비대칭 감소를 시사한다(도4C.......

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Discussion

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우리는 여기에 생체 내 양측 세포 외 기록에 대한 절차를보고, 이중 영역 LFP 신호의 동기화를 분석과 함께, 이는 모두 유연하고 뇌 반구 측면화를 추정하기 위한 수행하기 쉬운, 뿐만 아니라 연결, 방향성 또는 두 뇌 영역의 신경 활동 간의 커플링. 이것은 그룹 신경 활동뿐만 아니라 지역 간 전기 생리학의 몇 가지 기본 특성, 특히 진동 활동 이나 시스템이없는 실험실을 선별하는 데 관심이있는 실험실을 밝히는 데 널리 사용될 수 있습니다. 행동 동물23에서멀티 채널 기록.

일반적으로 뇌전도(EEG), 자기뇌전도(MEG), 기능성 자기 공명 영상(fMRI)을 포함한 일련의 기술을 뇌 활동을 모니터링할 수 있습니다. 이러한 방법은 제시된 기록과 비교하여 상대적으로 시간적 및 공간적 해상도가 낮습니다. 예를 들어, EEG는 뇌의 세포 외 활동을 조사하기 위한 가장 오래되고 가장 상업적으로 이용 가능한 기기 중 하나입니다. 불충분.......

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 공개 할 것이 없다.

Acknowledgements

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이 작품은 중국 국립자연과학재단(31771219, 31871170), 광동과학기술과(2013KJCX0054), 광동성 자연과학재단(2014A030313418) 보조금으로 지원되었다. 2014A030313440).

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AC / DC 차동 증폭기AM 시스템모델 3000
아날로그 디지털 컨버터Cambridge Electronic Design Ltd.Micro1401
유리 붕규산 마이크로 피펫난징 봄 교육 실험 장비 회사161230외경 : 1.0mm
미세 전극 풀러NarishigePC-10
NaCl광저우 화학 시약 공장7647-14-5
핀 미세 전극 홀더World Precision Instruments, INC.
스파이크2 케임브리지 전자 디자인 회사
스테레오현미경Zeiss435064-9020-000
스테레오택시 장치 RWD 생명 과학68045
우레탄시그마-알드리치94300
MEH3SW10

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Goedert, M., Spillantini, M. G. A century of Alzheimer's disease. Science. 314 (5800), 777-781 (2006).
  2. Perrin, R. J., Fagan, A. M., Holtzman, D. M. Multimodal techniques for diagnosis and prognosis of Alzheimer's disease. Nature. 461 (7266), 916-922 (2009).
  3. Cummings, B. J., Pike, ....

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Hemisphere LateralizationBilateral Local Field PotentialSecondary Motor CortexAlzheimer s Disease ModelAPP PS1 MiceCross Correlation AnalysisGamma Band SynchronizationHemispheric AsymmetryStereotaxic ApparatusMicroelectrode Recording

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