소형 펄스 레이저 다이오드 기반 데스크탑 광 음향 단층 촬영 (PLD-PAT) 시스템은 작은 동물 대뇌 피 질의 맥 관 구조의 고속 동적 생체 내 이미징에 대해 입증 되었습니다.
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방법 논문
소형 펄스 레이저 다이오드 기반 데스크탑 광 음향 단층 촬영 (PLD-PAT) 시스템은 작은 동물 대뇌 피 질의 맥 관 구조의 고속 동적 생체 내 이미징에 대해 입증 되었습니다.
광 청각적 (PA) 단층 촬영 (PAT) 화상 진 찰은 다양 한 전 임상 및 임상 응용에서 유용한 신흥 생물 의학 영상 형식입니다. 맞춤형 원형 링 어레이 기반 트랜스듀서 및 일반 부피가 큰 Nd: YAG/OPO 레이저는 PAT 시스템을 클리닉으로 변환 하는 것을 억제 합니다. 초소형 펄스 레이저 다이오드 (PLDs)는 현재 PA 이미징에 대 한 근 적외선 여기의 대체 소스로 사용 되 고 있습니다. 소형 PLD 기반 데스크탑 PAT 시스템 (PLD-PAT)을 사용 하 여 고속 동적 생체 내 이미징이 입증 되었습니다. 데스크탑 PLD-PAT 시스템을 사용 하는 시각화 된 실험적 프로토콜은이 작업에서 동적 생체 내 뇌 이미징을 위해 제공 됩니다. 이 프로토콜은 바탕 화면 PLD-PAT 시스템 구성, 뇌 혈관 영상에 대 한 동물의 준비, 쥐 대뇌 피 질의 혈관 구조에서 indocyanine green (ICG) 염료 흡수 및 클리어런스 과정의 동적 시각화를 위한 절차를 설명 합니다.
광 음향 계산 단층 촬영 (계약/PAT)은 높은 초음파 해상도1,2,3 과 풍부한 광학 콘트라스트를 결합 하는 유망한 비 침 습 적 생물 의학 이미징 양상입니다. 5. 나노초 펄스 레이저는 생체 조직 내부에 존재 하는 빛을 흡수 하는 발 색 광에 에너지를 침전 하는 경우, 국부 적으로 온도 증가 조직의 열 탄성 팽창 및 수축으로 이어지는, 생성의 결과 압력 파도. 이 압력 파는 샘플 주위의 초음파 트랜스듀서에 의해 검출 될 수 있는 초음파 파 또는 광 음향 (PA) 파도로 알려져 있습니다. 검출 된 pa 신호는 다양 한 재구성 알고리즘 (6,7,8,9 )을 사용 하 여 재구성 되어 단면 PA 이미지를 생성 한다. PA 이미징은 신체 내부에 존재 하는 내 인 성 발 색 단에 대 한 파장 의존성으로 인해 거시적 기관에서 현미경 소기관에이르기까지 구조적이 고 기능적인 정보를 제공 합니다. PAT 화상 진 찰은 유방암 검출에 성공적으로사용 되어 왔으며, 센 티 넬 림프절 이미징 (11)은 산소 헤모글로빈 (HbO2), deoxyhemoglobin의 매핑, 총 헤모글로빈 농도 (hbr), 산소량 포화 2) 12 , ( 13) 종양 맥 관 형성14, 작은 동물 몸 전체 영상 (15) 및 기타 용도.
Nd: YAG/OPO 레이저는 작은 동물 화상 진 찰과 깊은 조직 화상 진 찰16를 위한 광 음향 공동체에서 널리 이용 되는 1 세대 PAT 체계를 위한 전통적인 여기 근원입니다. 이 레이저는 ~ 10-100 Hz의 낮은 반복 속도로 ~ 100 mJ 에너지 펄스를 제공 합니다. 이러한 비용이 많이 들고 부피가 큰 레이저를 사용 하는 PAT 이미징 시스템은 펄스 반복률이 제한 되어 단일 요소 초음파 트랜스듀서 (SUTs)가 있는 고속 이미징에는 적합 하지 않습니다. 이는 동물 내부의 고속에서 발생 하는 생리 적 변화의 실시간 모니터링을 억제 합니다. 선형, 반원형, 원형 및 체적 배열과 같은 어레이 기반 트랜스듀서를 Nd와 함께 사용: YAG 레이저 여기, 고속 이미징이 가능 합니다. 그러나 이러한 어레이 트랜스듀서는 비용이 많이 들며 SUTs에 비해 낮은 민감도를 제공 합니다. 그러나 이미징 속도는 레이저의 낮은 반복 속도에 의해 제한 됩니다. 맞춤형 풀 링 어레이 트랜스듀서를 사용 하는 최첨단 싱글 임펄스 팩트 시스템은 50 Hz 프레임 레이트17에서 PA 데이터를 얻습니다. 이 어레이 트랜스듀서는 복잡 한 백엔드 수신 전자 장치 및 신호 증폭기가 필요 하므로 임상 사용을 위해 전체 시스템을 더 비싸고 어렵게 합니다.
컴팩트 한 크기, 낮은 비용 요구 사항 및 더 높은 펄스 반복 속도 (KHz의 순서)는 실시간 이미징에 대 한 더 유망한 펄스 레이저 다이오드 (PLDs)를 만든다. 이러한 장점으로 인해 PLDs는 2 세대 PAT 시스템에서 대체 여기 소스로 적극적으로 사용 됩니다. Pld 기반 PAT 시스템은 어레이 트랜스듀서를 이용한 하이 프레임 레이트 이미징에 성공적으로 입증되었습니다 18, 심부 조직과 뇌 이미징19,21, 심혈 관 질환 진단22 , 류 마티스 진단23. SUTs는 어레이 트랜스듀서에 비해 매우 민감하고 비용이 적게 들기 때문에 여전히 PAT 이미징에 광범위 하 게 사용 됩니다. 팬텀 이미징24를 위해 파이버 기반 pld 시스템이 시연 되었습니다. 이전에는 PAT 스캐너 (25) 내부에 pld를 장착 하 여 휴대용 pld-PAT 시스템을 시연 했습니다. 1 개의 숫 양의 원형 스캐너로, 팬텀 이미징은 스캔 시간 3 초 동안 수행 되었고, 생체 내 쥐 뇌 이미징은 PLD-PAT 시스템 (19)을 사용 하 여 5 s 기간 동안 수행 되었다.
또한 pld-PAT 시스템을 개선 하 여 더욱 콤팩트 하 게 만들고 8 개의 어쿠스틱 리플렉터 기반 단일 요소 초음파 트랜스듀서 (sutrs)26을사용 하 여 데스크탑 모델을 제작 했습니다. 여기서, SUTs는 90° 음향 반사 기 (28)의 도움으로 수평 방향 대신 수직으로 배치 되었다. 이 시스템은 최대 0.5의 스캔 시간 및 ~ 3cm 깊이의 조직 이미징 및 생체 내 작은 동물 뇌 이미징에 사용 될 수 있습니다. 이 작업에서이 데스크탑 PLD-PAT 시스템은 작은 동물의 생체 내 뇌 이미징을 위한 실험의 시각적 시연과 식품 의약품 안전 청의 통풍 관 및 통관 과정의 동적 시각화를 위해 사용 됩니다 (FDA) 승인 indocyanine 녹색 (ICG) 쥐의 뇌에 염료.
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모든 동물 실험은 싱가포르 난 양 기술 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 가이드라인 및 규정에 따라 수행 하였다 (동물 프로토콜 번호 ARF-SBS/A0331).
1. 시스템 설명
2. 쥐 뇌 이미징에 대 한 동물 준비
참고: 건강 한 암컷 쥐 ( 재료 표참조)는 작은 동물 대뇌 피 질 혈관 구조를 이미징 하기 위한 위에서 설명한 데스크탑 pld-PAT 시스템을 시연 하기 위해 사용 되었습니다.
3. 쥐의 두뇌에 있는 ICG의 통풍 관 및 정리 과정의 생체 내 화상 진 찰
4.
참고: 1.25 mg의 ICG 분말은 마이크로 계량 기계를 사용 하 여 무게를 측정 하였으며 5 mL의 증류수와 혼합 하 여 ICG 용액에 대해 323 μ m의 농도를 얻었다.
5.
참고: 0.5 s 스캔 시간 동안 얻은 A 라인은 하나의 횡단면 이미지를 생성 하는 데 사용 됩니다. 각 스캔 사이에는 시간 간격이 0.4 ~ 0.6 초입니다.

그림 1: 데스크탑 PLD-PAT 시스템의 회로도 (A) 데스크탑 pld-PAT의 설계도를 설정 합니다. PLD: 펄스 레이저 다이오드 OD: 광 확산 기, SUTR: 음향 반사판 기반 단일 요소 초음파 트랜스듀서 AM: 마 취 기계 CSP: 원형 스캐닝 플레이트, SM: 스테퍼 모터, LDU: 증폭기, DAQ: 데이터 수집 카드. (B) 스캐닝 센터 주위에 8 개의 sutrs의 원형 배열. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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동적 생체 내 뇌 이미징에 대 한 설명 된 데스크탑 PLD-PAT 시스템의 잠재력은 해당 결과와 함께이 프로토콜에서 전시 되었다. 데스크톱 PLD-PAT 시스템의 고속 이미징 기능은 건강 한 암컷 쥐의 생체 내 뇌 영상을 수행 함으로써 입증 되었다. PA 신호는 4 초 및 0.5 s의 스캔 속도에서 쥐 뇌 주위에 360 ° 및 45 °로 회전 하는 8 개의 SUTRs를 사용 하 여 수집 되었습니다. 도 2a, B 는 각각 4 s 및 0.5의 스캔 속도로 암컷 랫 트 (98 g)의 뇌 이미지를 보여준다. 시상 부 비 동 (SS)과 횡 부 비 동 (TS)은 두 이미지 모두에서 명확 하 게 보입니다. 도 2c , D 는 뇌 영역을 통해 각각 두 피를 제거 하기 전과 후 쥐의 뇌의 사진을 표시 합니다. PAT 화상 진 찰은 온전한 피부와 두개골로 비 침 습 적 이루...
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이 작품은 생체 내 뇌 이미징 쥐 같은 작은 동물에 대 한 실험을 수행 하기 위한 데스크톱 PLD-PAT 시스템을 사용 하 여 프로토콜을 제시 하 고 ICG 같은 조 영제의 동적 빠른 통풍 관 및 통관 과정. 부피가 큰, 고가의 OPO-PAT 시스템은 생체 내 단일 단면 이미지를 획득 하기 위해 몇 분 (2-5 분)을 소요 한다. 콤팩트 한 저비용 1 세대 휴대용 PLD-PAT 시스템은 5 초 내에 단일 단면 생체 이미지를 제공 합니다. 이와 대조적으로, 고속, 콤팩트, 저비용 데스크탑 PLD-PAT 시스템은 단지 0.5 s26에서 고품질의 2d 단면 생체 이미지를 렌더링 합니다. 여기서, 동일한 데스크탑 PLD-PAT 시스템은 빠른 생체 내 동적 뇌 이미징에 대해 입증 되었다. 이 시스템을 사용 하 여, 급속 하 게 변화 하는 생리 현상의 지속적인 감시는 ICG 통풍 관 및 정리 프로세스 때문에 PA 신호의 빠른 상승 그리고 하락을 위해 작은 동물 안에 수행 됩니다. 그러나 PLDs는...
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저자는 공개에 대 한 관련 금융 이익 또는 잠재적 인 이해 상충이 없습니다.
이 연구는 싱가포르 보건부의 국립 의료 연구 위원회 (NMRC/OFIRG/0005/2016)에 의해 지원 됩니다. 저자는 기계가 게 지원을 위한 미스터 차 우와이 호 옹 바비에 게 감사 드립니다.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 12V 전원 공급 장치 | Voltcraft | PPS-11810 | PLD |
| 음향 반사판 | Olympus | F102 | 45도 반사경 |
| 아크릴 물 탱크 | NTU 작업장 | 맞춤 제작 | 동물의 뇌와 검출기 사이의 음향 결합 매체 역할을하는 물을 보유하는 데 사용됩니다 |
| 마취 기계 | 산소 집중 장치를 가진 의학 플러스 pte 주식 회사 | Non-Rebreathing 마취 기계. | 동물에게 산소와 이소플루란을 공급합니다. |
| 동물 유통 | In Vivos Pte Ltd, 싱가포르 | 연구 목적으로 작은 동물을 공급하는 동물 유통 업체 | |
| 동물 홀더 | NTU 작업장 | 맞춤 제작 | 동물을 복부에 안는 데 사용 |
| 호흡 마스크 | NTU 작업장 | 맞춤 제작 | 동물 홀더와 함께 동물 |
| 원형 스캐너 | NTU 작업장 | 에 마취 혼합물을 공급하는 데 사용됩니다.맞춤형 | 스캐너는 알루미늄으로 만들어집니다 |
| DAQ (데이터 수집) 카드 | 스펙트럼 | M2i.4932-exp | 16 비트, 30 Ms/s, 8 채널, 1 Gs, PCIe |
| 데이터 수집 소프트웨어 | National Instruments Corporation, Austin, TX, USA)NI | LabVIEW 2015 SP1 (32 비트) | 스테퍼 모터를 제어하고 검출기에서 PA 신호를 수집하기 위해 실험실에서 개발 한 LabVIEW 기반 프로그램 |
| 데이터 처리 소프트웨어 | Matlab (Mathworks, Natick, MA, USA) | Matlab R2015b | 단면 PA 이미지를 재구성하기 위해 실험실에서 개발 한 Matlab 코드 |
| 함수 생성기 | RIGOL | DG1022 | PLD의 반복률을 변경합니다. DAQ를 레이저 여기와 동기화하기 위해 TTL 신호를 제공합니다. |
| 저잡음 신호 증폭기 | Genetron 미니 회로를 사용하여 맞춤 제작, ZFL-500LN-BNC | SUTR에서 PA 신호를 수신 및 증폭합니다. 이득은 24dB입니다. | |
| 광학 확산기 | Thorlabs | DG-120 | 레이저 빔을 균일하게 만드는 데 사용되는 |
| 펄스 레이저 다이오드 | Quantel, France | QD-Q1924-ILO-WATER | 816nm 파장, 펄스 에너지당 3.4mJ, 107ns 펄스 폭, 2KHz 최대 펄스 반복 속도, 치수: 13.0 x 7.6 x 5.0cm |
| Rats | In Vivos Pte Ltd, 싱가포르 | NTac : SD, Sprague Dawley / SD | 여성, 체중 100 ± 10g, 쥐의 균주 : Sprague Dawley, 연령 : 4-5 주 |
| 기어 박스가있는 스테퍼 모터 | LIN Engineering (서보 동역학) | 모터 : CO-5718L-01P-RO, 기어 박스 : DPL64 / 1; 전원 공급 장치 PW-100-24 | 감지기 홀더를 원형 형상으로 이동합니다. 토크: 2.08Nm, 로터 관성: 2.6kg-cm2 |
| 초음파 젤 | Progress/parker 아쿠아소닉 젤 | PA-GEL-CLEA-5000 | 투명 초음파 |
| 젤 초음파 변환기 | Olympus | V309-SU/ U8423013 | 광음향 감지에 사용되는 초음파 센서. 중앙 주파수 5MHz, 0.5인치 |
| 가변 고전압 전원 공급 장치 | Elektro-Automatik | EA-PS 8160-04 T | 레이저 출력 전력을 변경하려면 |
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