여기에서, 우리는 오픈 흉부 수술 접근법을 사용하여 마우스에 있는 우심실 및 폐 동맥의 침략적인 혈역학 평가를 능력을 발휘하는 프로토콜을 제시합니다.
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이 논문에서
요약
초록
폐 동맥 고혈압 (PAH)는 만성 및 심한 심폐 장애입니다. 마우스는이 질병을 모방 하는 데 사용 하는 인기 있는 동물 모델. 그러나, 우심실 압력의 평가 (RVP) 및 폐 동맥 압력 (PAP) 쥐에 기술적으로 도전 남아. RVP와 PAP는 좌우 심장 시스템 사이의 해부학적 차이 때문에 좌심실 압력보다 측정하기가 더 어렵습니다. 이 백서에서는 건강한 PAH 마우스를 사용하여 안정된 우심혈역학 측정 방법과 그 유효성 검사를 설명합니다. 이 방법은 오픈 가슴 수술 및 기계 환기 지원을 기반으로합니다. 그것은 닫힌 가슴 절차에 비해 복잡한 절차입니다. 이 수술에 잘 훈련 된 외과 의사가 필요하지만,이 절차의 장점은 동시에 RVP및 PAP 매개 변수를 모두 생성 할 수 있다는 것입니다, 그래서 PAH 모델의 평가를위한 바람직한 절차입니다.
서론
폐 동맥 고혈압 (PAH)은 작은 폐 동맥의 세포 증식 및 섬유증에 의해 유발되는 폐 동맥 압력 (PAP) 및 우심실 압력 (RVP)의 상승과 만성 및 심한 심폐 장애입니다. 1. 또한 스완 간츠 카테터라고 폐 동맥 카테터2,일반적으로 RVP와 PAP의 임상 모니터링에 사용됩니다. 또한, 무선 PAP 모니터링 시스템은 임상적으로3,4,5를사용되어 왔다. 마우스에서 연구를 위한 질병을 모방하기 위하여는, 저산소 환경은 PAH6의인간적인 임상 표현을 시뮬레이션하기 위하여 이용됩니다. 동물에서 PAP의 평가에서, 큰 동물은 인간 피험자와 동일한 기술을 사용하여 폐 동맥 카테터를 통해 상대적으로 모니터링하기 쉽지만, 쥐와 마우스와 같은 작은 동물은 작은 체형 때문에 평가하기가 어렵습니다. 마우스에서 우심실 시스템의 혈역학 측정은 초소형 1 Fr 카테터7로가능합니다. 마우스에서 RVP 및 PAP를 측정하는 방법은 문헌8,
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프로토콜
동물 프로토콜은 후와이 병원, 중국 의학 아카데미, 북경 연합 의과 대학 (NO.0000287)의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 검토되고 승인되었습니다. 실험동물은 중국의 동물복지 지침에 따라 사육되고 먹이를 주었다.
참고: 8-12주령의 수컷 C57BL 마우스는 12시간 암/12시간 광주기를 가진 환경에 보관하였다. PAH 마우스는 10%의 산소 농도 하에서 4주 동안 보관되었고, 산소 조절 저산소증 챔버에 의해 유지되어 폐 고혈압을 유도하고, 대조군 마우스는 동일한 조건하에서 실내 공기(21%의 산소)에 보관하였다. RVP 및 PAP 측정은 저산소증 도전의 4 주 끝에 수행되었다.
1. 수술 전 준비
- 혈역학 실험 전에 적어도 30 분 동안 실온에서 0.9 % 식염수로 압력 트랜스듀서 카테터 (크기 : 1 Fr)를 담급니다.
- 0.22 μm 필터로 2,2,2-Tribromoethanol 용액을 걸레로 걸레로 4도 냉장고에 보관하십시오.
- 청소 수술 도구 및 수술 장갑과 같은 용품을 준비합니다.
- 카테터 세척을 위해 1.0% 소화 효소 용액 10 mL을 준비하십시오.
- 압력 트랜스듀서 카테터를 압력 부피 ....
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결과
압력 트랜스듀서 카테터를 25 G 바늘로 팽창된 터널을 통해 우심실(도3A)에삽입하고, 전형적인 RVP 파형(도3C)을수득하였다. 카테터를 지속적으로 조정하고 천천히 진행시키고 폐 판막을 통과하면서 폐 동맥과 동일한 축으로 유지하였다(그림3B). 압력 센서가 폐 동맥에 성공적으로 삽입되었을 때, 특유의 이각 노치를 가진 전형적인 PAP 파형이나타났다(도 3D). 인공 데이터의 생성을 피하기 위해, 우리는 파형이 노이즈를 가지고 있는지 여부를 관찰(그림 4)또는 카테터의 제로 레벨이 표류했는지 여부(그림 5)........
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토론
기관 삽관은 열린 가슴 수술을위한 첫 번째 중요한 단계입니다. 쥐 또는 마우스와 같은 작은 동물을 위한 기관 삽관의 고전적인 방법은, 기관에 T 모양 절개를 만들고 기관에 Y형 기관 튜브를 직접 삽입하는 관련시킵니다. 실제로 이 방법은 작업 중에 쉽지 않다는 것을 알게 됩니다. Y형 기관 튜브는 작은 동물에게는 너무 크고 기관과 각도를 형성합니다. 따라서 튜브를 제자리에 고정하기가 어렵습니다. 또한, 일단 삽관 튜브 실수로 오픈 가슴 수술 중 기도에서 나온다, 그것은 일반적으로 기계적 환기 지원의 손실 때문에 동물 죽음결과. 따라서 피부에 절개를 하고, 근육층을 분리하여기관(도 1C)을노출시키고, 기관 튜브를 기도내로 직접 삽입하여피부(14)를 삽입하는 방법을 수정했습니다. 동물의 입. 기관 내의 튜브의 배치는 집게를 사용하여 기관을 클램핑하여 편리하게 확인할 수 있습니다
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없다.
감사의 글
이 연구는 북경 연합 의과 대학의 대학원 교육 및 교육 개혁 프로젝트 (10023-2016-002-03), 후와이 병원 청소년 기금 (2018-F09), 그리고 전 임상 연구의 베이징 주요 연구소의 이사 기금에 의해 지원됩니다 심혈관 임플란트 재료에 대한 평가 (2018-PT2-ZR05).
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 2,2,2-트리브로모에탄올 | 시그마-알드리치 | T48402-5G | 마취용 |
| 동물 온도 조절기 | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | 온도 제어용 |
| 해부 겸자 | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | 수술 용 |
| 쌍둥이 자리 소작 시스템 | 쌍둥이 | 자리 GEM 5917 | 수술 |
| 용 정맥 카테터 (22G) | BD 혈관 | 381123 | 삽관 용 |
| LabChart 7.3 | AD 데이터 | 분석 | |
| 용 조명 시스템 | 올림푸스 | 수술 | |
| 용 Mikro-Tip 카테터 | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | 압력 측정용 |
| Millar 압력-볼륨 시스템 | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | 압력 측정용 |
| O2 컨트롤러 및 저산소증 챔버 | Biospherix | ProOx 110 | 만성 저산소증용 |
| PowerLab 데이터 수집 시스템 | ADInstruments | PowerLab 16/30 | 데이터 기록용 |
| 가위 | 파인 사이언스 도구, Inc. | 14084-08 | 수술용 |
| 소동물 인공호흡기 | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | 수술용 |
| 실체현미경 | Olympus | SZ61 | 수술용 |
| 수술 테이프 | 3M | 수술용 | |
| Terg-a-zyme 효소 | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | 카테터 세척용 |
참고문헌
- Humbert, M., et al. Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension. Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).
- Chatterjee, K. The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint. Circulation
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