이 프로토콜은 면역학 및 기능 적 회복의 동시 연구를 향해 기어드 혈관 복합 동종 이식 (VCA)의 견고하고 재현 가능한 모델을 제시한다. 손 바느질 혈관 아나토모와 신경 응착오른쪽 중간 허벅지 뒷다리 직교 이식에 세심한 기술에 투자 된 시간은 기능적 회복을 연구 할 수있는 능력을 산출한다.
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이 프로토콜은 면역학 및 기능 적 회복의 동시 연구를 향해 기어드 혈관 복합 동종 이식 (VCA)의 견고하고 재현 가능한 모델을 제시한다. 손 바느질 혈관 아나토모와 신경 응착오른쪽 중간 허벅지 뒷다리 직교 이식에 세심한 기술에 투자 된 시간은 기능적 회복을 연구 할 수있는 능력을 산출한다.
사지 이식은 특히 혈관화 복합 동종 이식 (VCA)은 일반적으로 면역 억제 및 기능성 신경 운동 회복의 현재 한계에 의해 좌절 된 광범위한 치료 약속을 가지고 있습니다. 많은 동물 모델은 VCA의 독특한 특징을 연구하기 위해 개발되었지만, 여기에서 우리는 현재 VCA 제한의 두 측면을 동시에 조사하기 위해 설계된 쥐에서 직교 뒷다리 이식의 강력한 재현 가능한 모델을 제시합니다: 면역 억제 전략 및 기능성 신경 운동 회복. 모델의 핵심은 손 바느질 혈관 해부학과 대퇴 신경과 상골 신경의 신경 응착과 같은 세심한, 시간 테스트 미세 수술 기술에 대한 헌신을 달려있다. 이 접근법은 재활, 일상 활동 재개 및 기능 적 테스트를 할 수있는 더 오래 살아있는 동물을 허용하는 튼튼한 사지 재건을 제공합니다. 종래의 면역억제제의 단기 치료로, 이식후 70일까지 생존한 동종동물은 수술 후 200일을 초과하는 장기간의 대조군을 제공한다. 신경 기능 회복의 증거는 수술 후 30 일 동안 존재합니다. 이 모델은 VCA 및 신경 재생에 고유한 면역 학적 질문을 심문하는 데 유용한 플랫폼을 제공 할뿐만 아니라 VCA에 맞게 특별히 조정 된 새로운 치료 전략의 생체 테스트를 허용합니다.
혈관 복합 동종 이식 (VCA) 또는 복합 조직 동종 이식 (CTA)의 광범위한 범주에 따라 사지 이식은 아직 치료 약속을 이행하지 못했습니다. 1998년과 1999년 켄터키 주 리옹에서 처음으로 성공한 인간 손 이식 이후, 100개 이상의 상사 이식이 엄선된 환자1에서전 세계적으로 수행되었다. 실질적인 면역 억제와 제한된 기능성 신경 운동 회복에 의해 더 넓은 적용성이 좌절되었습니다. 현재 면역억제 전략은기회감염2의77%의 발생률에 직면하여 급성 거부의 85% 발생률을 초래한다. 한편, 손 이식 후 기능적 회복이 발생한다. 암 어깨와 손 (DASH) 점수의 장애는 71에서 43로 향상되지만, 그 기능 수준은 여전히 장애2로자격이 될 수 있습니다. 사지 이식의 비생명 절약 특성을 감안할 때, 현재 기술은 VCA에서 다음 단계를 취할 동물 모델에서 정제해야합니다.
1978년3년사지 이식의 첫 번째 쥐 모델 이후, 많은 혁신적인 동물 모델이 VCA4의분야를 발전시키기 위해 개발되었으며, 수술 시간을 최소화하기 위해 혈관 커프드,아나도모를 통합하여 수술 시간7,,,5,,6,이성토성 골분비쿠타네이스 이식을 통해 수령인 동물,7,8,9, 10, 11, 및 신규 면역학적 접근법 7,8,9,10,,11,및 신규 면역 접근법 14,121.14 여기에 제시된 직교 우측 뒷다리 중간 허벅지 이식의 쥐 모델은 현재 VCA 제한의 양측면을 동시에 조사하기 위해 강력하고 재현 가능한 모델 플랫폼에 대한 선행 투자로서 손 수놓은 혈관 아나스토모모 및 신경 응식과 같은 세심하고 시간 테스트된 미세 수술 기술을 강조합니다: 면역 억제 전략 및 기능성 신경 운동 회복.
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모든 실험은 국립 보건원 (NIH)의 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드에 따라 수행되었으며 노스 웨스턴 대학 동물 관리 및 사용위원회의 승인을 받았습니다. 특정 절차는 프로토콜 IS00001663에 따라 수행되었습니다.
참고 : 쥐의 두 변종을 사용되었다, 루이스 쥐와 8 월 코펜하겐 x 아일랜드어 (ACI) 쥐. 동물은 면역 억제 없이 동종 이식 (루이스에 ACI), 기존의 면역 억제 (루이스에 ACI), 동소 이식 (루이스 루이스 또는 ACI에 ACI)를 결합하는 세 가지 치료 그룹으로 나뉘었다. 루이스는 근친 근친 변형, ACI 쥐 는 아웃 사육 야생 형을 나타내는 동안, 따라서이 조합은 더 나쁜 경우 거부 응답을 모델링하도록 선택되었다. 종래의 면역억제는 수술 후 날(POD)에서 1~POD 28을 뺀 라파마이신 1 mg/kg또는 POD 0에서 POD 14까지 3 mg/kg으로 피하 투여한 후, 그 후 매주 한 번 투여하였다. 남성과 여성 쥐 모두 8 주에서 16 주 까지 자격을 갖춘 수령인이었다, 사이 무게 250 과 400 수술 의 시간에 그램.
1. 기증자 오른쪽 뒷다리 수확
2. 받는 사람 네이티브 오른쪽 뒷다리 절단
3. 받는 사람 사지 이식에 기증자
4. 수술 후 치료
5. 수술 후 감각 테스트
6. 수술 후 모터 테스트
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생존과 회복은 세심한 수술 기술에 달려 있습니다. 혈관 해부학과 신경 해부학뿐만 아니라 위에서 설명한 바와 같은 뼈 응고에 대한 관심은이 모델의 성공을 극대화하는 데 중요합니다. 수술 설계 및 대표적인 아나스토모틱 결과는 도 1에도시된다.
전반적인 사망률은 면역 억제 전략에 의존했으며, 이소 이식 된 동물의 대부분은 도 2에서 볼 수 있듯이 수술 후 100-200 일의 연구 종점을 달성했다. 일단 급성 수술 후 창 밖으로, 치료 된 항종 이식 동물최대 생존을 경험할 수 58 수술 후 일. 동종 이식 된 쥐는 라파마이신과 FK506에서 가변 적인 필멸의 가변을 했다 동안 연구 과정을 통해 무기한 살았다. FK506은 가장 긴 생존력을 촉진(57일)했고, 라파마이신은 치료되지 않은 대조군(10일)을 제치고 2위(20일)를 기록했다.
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사지 이식, 혈관 구성 요소 동종 이식의 광범위한 범주에 따라 (VCA), 아직 성취되지 않은 널리 적용 가능한 치료 약속. 주요 장애물은 현재 사용되는 VCA 및 신경 운동 복구 기술에 고유한 해결되지 않은 면역 학적 문제에 있습니다. 새로운 기술의 개발은 유연하고 견고하며 재현 가능한 동물 모델링에 달려 있습니다.
많은 동물 모델은 VCA에 설립되었습니다, 특정 장점4각 . 비인간 영장류 모델은 인간 환자에게 매력적인 번역성을 제공하지만 비용 우려와 면역 억제의 독성 수준에 의해 방해를 받아4가필요했다. 개 모델은 인간뿐만 아니라 경험이 풍부한 면역 체계19,,20뿐만아니라 근육 구조의 특정 유사성에 유리한 것으로 볼 수있다. 돼지 모델은 면역 계통이 점점 더 잘 연구되는 큰 동물 모형의...
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이 작품은 프랑켈 재단과 노스 웨스턴 메모리얼 병원 맥코믹 그랜트 (운영 복원)에 의해 지원되었다. 이 간행물에서 보고된 연구는 상 번호 T32GM008152의 밑에 건강의 국가 학회의 일반 메디의 과학의 국가 학회에 의해 지원되었습니다. 이 작품은 노스 웨스턴 대학 미세 수술 코어와 행동 Phenotyping 코어에 의해 지원되었다.
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| 1cc 주사기 | BD | 309659 | |
| 22 게이지 바늘 | BD | 305156 | |
| 24 게이지 혈관 카테터 | Sur-Vet | SROX2419V | |
| 25- 게이지 바늘 | Exel | 26403 | |
| 3cc 주사기 | BD | 309657 | |
| 5cc 주사기 | Exel | 26230 | |
| 알코올 | Fisher Scientific | HC-600-1GAL | |
| 마취 유도 챔버 | Vet 장비 | 941443 | |
| 마취 가스 제거제 시스템 | Vet 장비 | 931401 | |
| 양극성 electrocautery | Aura | 26-500 | |
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