쥐에서 건조 분말 제형의 장내 투여

요약

흡입을 위한 건식 분말 제형은 호흡기 질환 치료에 큰 잠재력을 가지고 있습니다. 인간 연구에 들어가기 전에, 전임상 연구에서 건식 분말 제형의 효능을 평가할 필요가 있다. 간 내 막 경로를 통해 마우스에서 건조 분말을 투여하는 간단하고 비침습적 방법이 제시된다.

초록

흡입 할 수없는 건조 분말 제제의 개발에서, 전임상 동물 모델에서 자신의 생물학적 활동을 평가하는 것이 필수적이다. 본 논문은 마우스에서 건식 분말 제형의 비침습적 전달 방법을 소개합니다. 3방향 스톱콕을 통해 1mL 주사기에 연결된 200 μL 젤 로딩 파이펫 팁으로 구성된 드라이 파우더 로딩 장치가 제시됩니다. 소량의 건조 분말(1-2 mg)이 파이펫 팁에 적재되어 주사기에 0.6mL의 공기가 분산됩니다. 파이펫 팁은 일회용이고 저렴하기 때문에 다른 건조 분말 제형은 사전에 다른 팁으로 로드 할 수 있습니다. 다양한 제형은 장치 세척 및 용량 리필 없이 동일한 동물 실험에서 평가될 수 있으므로 시간을 절약하고 잔류 분말로부터 의 교차 오염의 위험을 제거합니다. 분말 분산의 정도는 파이펫 팁에 남아있는 분말의 양에 의해 검사 될 수있다. 사용자 정의 광원과 안내 캐뉼라가있는 마우스에 삽관 프로토콜이 포함되어 있습니다. 적절한 관착은 마우스의 깊은 폐 부위에 건조 분말 제형의 장내 전달에 영향을 미치는 주요 요인 중 하나입니다.

서론

투여의 폐 경로는 지역 및 조직 적 행동 모두에 대한 치료를 제공하는 다양한 혜택을 제공합니다. 폐 질환의 치료를 위해, 높은 국부 약물 농도는 폐 전달에 의해 달성 될 수있다, 따라서 필요한 용량을 감소시키고 전신 부작용의 발생률을 낮추는. 더욱이, 폐에서 상대적으로 낮은 효소 활동은 조기 약물 대사를 줄일 수 있습니다. 폐는 또한 크고 잘 퍼진 표면적, 매우 얇은 상피 세포 층 및 폐 모세^혈관1의높은 혈액 부피로 인한 전신 작용에 대한 약물 흡수에 효율적입니다.

흡입건조분말제제는 천식, 만성폐쇄성 폐질환, 당뇨병 및 폐예방접종^2,3,4등 다양한 질환의 예방 및 치료를 위해 널리 조사되고^있다. 고체 상태의 약물은 일반적으로 액체 형태보다 더 안정하며, 건조 분말 흡입기는 분무기^5,6보다휴대성이 뛰어나고 사용자 친화적이다. 흡입건조분말제형의 개발에서, 안전성, 약동성 프로파일 및 치료효능은 폐투여에 따른 전임상 동물모델에서 평가될 ....

프로토콜

이 연구에서 수행 된 실험은 홍콩 대학 인 교육 및 연구를위한 살아있는 동물 사용위원회 (CULATR)의 승인을 받았습니다. 루시파라기 메신저 RNA(mRNA)의 0.5%를 함유한 스프레이 동결 건조(SFD)에 의해 제조된 건식 분말 제형은, 5% 합성 펩타이드 PEG₁₂KL4 및 94.5%의 매니톨(w/w)을 함유하여 폐^16에서mRNA 발현을 입증하기 위해 이 연구에서 사용된다. SFD 분말의 질량 중앙공기역학적 직경(MMAD)은 2.4 μm입니다. 분무 건조(SD) 매니톨 분말은 분말^{분산(16)에}사용되는 공기 부피의 효과를 조사하는 데 사용된다. SD 분말의 MMAD는 1.5 μm입니다.

1. 건조 분말 인수프플랫터 의 제조 및 건조 분말의 적재

1. (선택 사항) 건식 분말(유리병)과 200 μL 비필터 라운드 젤 로딩 파이펫 팁의 정적 충전을 중화시합니다. 제조업체의 지시에 따라 정전기 방지 총 또는 탈이온화 기능과의 균형을 사용합니다.
2. 약 4cm x 4cm 크기의 계량 용지를 준비합니다. 용지를 대각선으로 반으로 접은 다음 전개합니다.
3. 계량 용지에 1-2 mg의 드라이 파우더를 계량....

결과

건조 분말 insufflator동물의 폐에 분말 에어로졸을 전달하는 데 사용되는 경우, 사용되는 공기의 양은 분말 분산 효율뿐만 아니라 안전에 영향을 미치기 때문에 매우 중요합니다. 이를 최적화하기 위해, 다양한 공기량(0.3mL, 0.6mL 및 1.0mL)을 사용하여 건조 분말(1 mg의 분무 건조 매니톨)을 분산시키고 마우스의 무게를 투여 후 48시간 동안 모니터링하였다(도6). 0.3 mL 및 0.6 mL의 공기 사용은 투여 후 최대 48h까지 마우스의 체중 감소를 일으키지 않았다. 1mL의 공기로 분말을 분산하면 24 시간 이내에 체중 감량의 5 % 이상이 발생했으며 48 시간 후에 완전히 회복되지 않았습니다. 이 프로토콜에서, 7-9주 된 BALB/c 마우스가 사용되었다. 종의 종, 동물의 변형 및 나이, 분말 특성(예를 들어, 입자 크기 분포, 응집력 및 밀도) 및 분말의 질량에 따라 효율적인 분말 분산 및 동물 내성을 위해 사용되는 공기의 부피는 다른 동물 모델에.......

토론

이 논문에서는 건조 분말 부피 및 장내 삽관을 위한 맞춤형 장치가 제공됩니다. 분말 적재 단계에서, 건조 분말은 200 μL 젤 로딩 파이펫 팁에로드됩니다. 팁의 좁은 끝에 분말의 느슨한 포장을 허용 하기 위해 팁을 부드럽게 탭 하는 것이 중요 하다. 그러나 분말이 너무 단단히 포장되면 팁에 갇히고 제대로 분산 될 수 없습니다. 분말 로딩을 용이하게 하기 위해 분말 및 파이펫 팁의 정적 충전을 중화하는 것이 좋습니다. 가이딩 캐뉼라는 장치의 중요한 구성 요소입니다. 그것은 마우스의 기관으로 분말로드 파이펫 팁의 삽관을 용이하게하는 데 사용됩니다. 가이딩 캐뉼라의 직경이 너무 넓어서는 안 됩니다. 그렇지 않으면 기관지에 삽입하기가 어렵고 마우스가 손상될 수 있습니다. 가이딩 캐뉼라의 직경은 광섬유와 분말로 된 파이펫 팁에 맞게 충분히 넓어야 하며, 파이펫 팁은 약 1-2mm의 안내 캐뉼라를 돌출해야 한다.

기관의 개방을 시각화하는 능력은 관독 과정에서 매우 중요하며, 가이딩 캐뉼라.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
BALB/c 마우스			암컷; 7-9주령; 체중 20-25g
CleanCap 반딧불이 Luciferase mRNA	TriLink Biotechnology	L-7602
건조 분말 흡입기	PennCentury	모델 DP-4M
케타민 10%	Alfasan International BV
발광 다이오드 (LED) 토치	Unilite Internation	PS-K1
Mannitol (Pearlitol 160C)	Roquette	450001
Non-filter round gel loading pipette tip (200 µ L)	Labcon	1034-800-000
나일론 치실	리치	30017050
바늘이없는 1 밀리리터 주사기	Terumo	SS-01T
광섬유	섬유 데이터	OMPF1000
PEG12KL4 펩타이드	EZ Biolab		(PEG12) -KLLLLKLLLLLLLKLLLK-NH2
플라스틱 파스퇴르 미세 팁 피펫	알파 Labotatories	LW4061
삼방향 마개	Braun	D201
Xylazine 2%	Alfasan International BV
Zerostat 3 정전기 방지 건	MILTY	5036694022153

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