이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

요추 척추 불안정의 마우스 모델

9.1K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/61722

⸱

2021년 4월 23일

 ,  ,  , 

이 논문에서

요약

우리는 L3-L5 가시 과정의 절제술에 의해 요추 추간판 변성 마우스 모델을 개발했으며, 초라 및 간 척추 인대 및 패러시러스 근육의 분리와 함께.

초록

추간판 변성(IDD)은 요통으로 이어지는 흔한 병리학적 변화입니다. 적절한 동물 모델은 병리학 적 과정을 이해하고 신약을 평가하기위해 필요합니다. 여기서, 수술 후 1주일부터 IDD를 개발하는 외과적으로 유도된 요추 척추 불안정(LSI) 마우스 모델을 소개했습니다. 상세하게, 마취 하에 마우스는 낮은 허리 피부 절개에 의해 작동되었다, L3-L5 가시 공정 노출, 파라위스 근육의 분리, 프로세스와 인대의 절제술, 피부 폐쇄. L4–L5 IVDs는 관찰을 위해 선택되었다. LSI 모델은 초기 단계에서 엔드플레이트의 다공성 및 비대증에 의한 요추 IDD를 개발하고, 추간판 부피감소, 중간 단계에서핵 펄포스의 수축, 요추척추(L5)의 뼈 손실 등을 개발한다. LSI 마우스 모델은 강력한 조작성, 특수 장비의 요구 사항, 재현성, 저렴하고 상대적으로 짧은 기간의 IDD 개발의 장점이 있습니다. 그러나, LSI 수술은 아직도 첫 주 수술 후 내염증을 일으키는 원인이 되는 외상입니다. 따라서, 이 동물 모델은 요추 IDD의 연구에 적합합니다.

서론

무척추 디스크 변성 (IDD)은 일반적으로 노화와 많은 요인에 의해 발생 하는 젊은 사람들1. IDD로 고통받는 환자를 위한 수술은 요통및 손상된 운동을 일으키는 원인이 되는, 일반적으로 나중에 단계 또는 가혹한 경우에 수행되고 비조합 또는 감염2와같은 잠재적인 리스크가 있습니다. 이상적인 비수술적 치료는 IDD 메커니즘에 대한 포괄적인 이해가 필요합니다. IDD 동물 모델은 IDD 메커니즘 의 연구와 IDD 치료 평가를 위한 중요한 도구 역할을 합니다.

더 큰 동물은 영장류, 양, 염소, 개 및 토끼와 같은 IDD 모델에 선택되었습니다. 그러나 이러한 동물 모델은 시간이 많이 걸리고 비용이 많이 드는9입니다. 마우스 IVD는 종횡비, 핵 펄포스 대 디스크 영역 비율....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

조사는 건강의 국가 학회의 실험실 동물의 배려 그리고 사용을 위한 지침에 부합하고 전통적인 중국 의학 동물 관리 및 사용 위원회의 상하이 대학에 의해 승인되었습니다 기술되었습니다. 모든 외과 조작은 깊은 마취하에 행해졌고 동물은 시술 도중 어떤 단계에서든 고통을 경험하지 않았습니다.

1. 사전 작동 준비

  1. 기기 살균: 수술 전 오토클레이브(121°C 15분)에서 스팀 멸균 수술기구. 금속 용기에 악기를 포장하고 수술에 사용될 때까지 유지합니다.
  2. 수술 플랫폼 설정: 수술에 대해 최소 60cm x 60cm의 벤치 영역을 할당합니다. 75%의 알코올로 표면을 청소하고 일회용 의료 수건으로 덮습니다. 멸균 수술 기구 팩, 시약, 수술 용품을 1/3 상부 내일회용 의료 용 수건에 놓습니다. 나머지 2/3은 수술 수술을 위해 깨끗한 영역을 둡니다. 열 지지대를 위해 수술 용 패드 아래에 핫패드를 추가합니다.
  3. 동물 제제
    1. 동물(C57BL/6J 마우스, 수컷, 8주 된 마우스)을 유도실에 놓습니다. 이소플루란의 경우 4%, 산소용 L/min의 유도 수준에서 기화기를 켭니다. 동물이 완전히 마취된 후, 코 콘과 마취성 전달을 이소플루란의 경우 1.5%, 수술 중 산소에 대해 0.4 L/min수준....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

LSI 마우스 모델은 EP20,21,22,23에서경화증, 감각 내시경 등의 IDD 메커니즘, IDD 처리, 엔드플레이트(EP) 변성의 연구에 적용된다. LSI 마우스는 식별된 IDD 및 EP 퇴행성 변화를 개발하여 IVD 볼륨및 높이 감소, EP 볼륨 증가, IVD 및 EP 점수 증가등을 통해 확인할 수 있습니다.

해부 및 고정 하부 흉부 및 요추 척추는 이전에 설명된20,21과같이 고해상도 마이크로 컴퓨팅 단층 촬영(μCT)에 의해 검사되었다. 갈비뼈가 있는 하부 흉부 요추는 L3–L5 척추(그림

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

척추에서 후부 보전근육이 분리되고 척추및 간척추인과 함께 가시공정이 절제된 자궁경부 척추 척추증 마우스 모델을 기반으로 요추증 불안정성을 마우스 모델을개발했다. 우리는 더 눈에 띄는 가시 공정을 가지고 요추 척추에 유사한 작업을 수행했다. LSI 마우스 모델은 요추 척추에서 유사한 IDD를 개발했습니다.

LSI 모델의 장점은 강력한 조작성, 특수 장비의 요구 사항, 재현성 및 IDD 개발의 비교적 짧은 기간을 포함한다.

작업 중 성공률을 개선하기 위해 몇 가지 핵심 사항이 여기에 제시됩니다. 또한 중요한 단계이기도 합니다. 첫째, 상처에 남아있는 면도 된 머리카락이 아나필락시성 반응을 일으킬 수 있기 때문에 가능한 한 명확하게 허리 부분에 머리카락을 제거하십시오. 둘째, 원통형 패드 또는 다른 패드는 요추 척추를 올리는 것이 좋습니다. 셋째, 마이크로 가위를 사용하여 절개 깊이와 출혈을 .......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

저자는 공개 할 것이 없습니다.

감사의 글

이 작품은 중국 국립 자연과학 재단(81973607)과 중국 과학기술부로부터 필수 의약품 연구 개발(2019ZX09201004-003-032)의 지원을 받았습니다.

....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
Chlortetracycline Hydrochloride Eye Ointment Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd. (클로르테트라사이클린 하이드로클로라이드 아이 연고Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.)H31021931안구 건조를 예방하고 상처 감염을 예방
C57BL/6J 수컷 마우스Tian-jiang Pharmaceuticals Company (Jiangsu, CN)SCXK2018-0004동물 모형
의료 수건Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.20160090외과 수술용 플랫폼
흡입제 마취 장비MIDMARKMatrx 3000마취
IsofluraneShenzhen RWD Life Technology Co., Ltd.1903715마취
리도카인 염산염Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.H37022839통증 완화
의료 봉합사 바늘상하이 Pudong Jinhuan 의료 제품 Co., Ltd.20S0401J봉합사
피부 안과 겸자Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. 수술 기구 공장JD1050클립
피부 안과 가위(10cm)Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. 수술 기구 공장Y00030피부 절개
실크 꼰Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.11V0820봉합사
피부 작은 동물 트리머Shanghai Feike Electric Co., Ltd.FC5910제모
멸균 수술용 블레이드(12#)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.35T0707근육 절개
Veet 제모 크림RECKITT BENCKISER (India) LtdNA제모
비너스 가위Mingren 의료 장비길이 : 12.5cm근육 및 가시 돌기 클립
합니다 일회용

참고문헌

  1. Makino, H., et al. Lumbar disc degeneration progression in young women in their 20's: a prospective ten-year follow up. Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 22 (4), 635-640 (2017).
  2. Lee, Y. C., Zotti, M. G. T., Osti, O. L.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

더 많은 논문 탐색

추간판 변성수술 절차극돌기 절제술3D 조직형태계측 분석종판 비대수핵척추골 손실C57BL/6 마우스