림프부종은 림프 기능 장애로 인한 사지 부종입니다. 우리는 림프부종의 만성 뮤린 꼬리 모델과 꼬리에 유전화물 전달을위한 조직 나노 트랜스펙션 기술 (TNT)의 새로운 사용을 설명합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
림프부종은 림프 기능 장애로 인한 사지 부종입니다. 영향 받은 사지는 액체의 축적 때문에 확대합니다, 지방, 및 섬유증. 이 질병에 대한 치료법은 없습니다. 꼬리 의 밑면 근처에서 초점 전체 두께 피부 절제를 사용하는 마우스 꼬리 모델은 꼬리 부종을 초래하여 림프부종을 연구하는 데 사용되었습니다. 그러나, 이 모형은 혈관 포함 및 결과적인 꼬리 괴사 및 초기 꼬리 팽윤 해상도 귀착될 수 있습니다, 그것의 임상 번역성을 제한하. 만성 뮤린 꼬리 림프부종 모델은 15 주 이상 지속적인 림프부종과 꼬리에 신뢰할 수있는 관류를 유도합니다. 전통적인 뮤린 꼬리 림프부종 모델의 개선은 1) 정밀한 전체 두께 절제 및 림프 클리핑 을 포함 수술 현미경을 사용하여, 2) 고해상도 레이저 반글을 사용하여 수술 후 동맥 및 정맥 관류의 확인, 3) 적외선 레이저 림프 촬영 근처 indocyanine 녹색을 사용하여 기능 평가. 우리는 또한 마우스 꼬리 혈관에 유전화물의 새로운 비 바이러스, 경피, 초점 전달을 위한 조직 나노 트랜스페션 기술 (TNT)를 사용합니다.
서론
림프부종은 림프 기능 장애로 인한 사지 부종입니다. 영향 받은 사지는 액체의 축적 때문에 확대합니다, 지방, 및 섬유증1. 림프부종은 전 세계적으로2억5천만 명에게 영향을 미치며2,3,4. 유방암, 흑색종, 부인과/비뇨기과 종양, 또는 육종과 같은 고체 악성 종양치료를 받는 환자의 20~40%가 림프부종2,4,5를개발하는 것으로 추정된다. 림프부종으로부터의 이환율은 재발성 감염, 통증 및 기형6을포함한다. 이 점진적인 평생 질병에 대한 치료법은 없습니다. 현재 치료법은 variaby 효과적인7및 물리 치료사에 의한 압축, 완전한 충혈 치료, 절제 절차 및 혈관 성 림프 우회7,8,
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
이 프로토콜은 기관의 동물 연구 윤리 위원회의 지침을 따릅니다. 모든 동물 실험은 인디애나 대학 의과 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었습니다. 동물들은 음식과 물 광고 리비툼으로 12시간 밝은 어두운 주기 아래에 보관되었습니다.
1. 마우스 꼬리 림프제의 외과 중단
- 동등한 성별 분포의 8 주 된 C57BL/6 마우스를 사용 하십시오.
- 전신 마취 하에 마우스를 100% 산소로 3-4% 이소플루란으로 유도 챔버에 놓고 시술 중에 1-3%의 유지 보수 체이션을 유지합니다.
- 통증 조절을 위해 0.5 mg/kg 지속 방출(SR) 부프레노르핀을 피하로 투여하십시오.
참고: 추가 진통제 투여 후 투여: 카프로펜 은 적어도 48 h에 대 한 매 24 시간 및 부피바카인 한 번 절개가 만들어진 후 또는 절개를 닫기 전에, 피부 가장자리에 떨어지는 에 의해 적용 (4 – 6 시간까지 지속). - 마우스를 등쪽으로 배치하고 70 %의 이소 프로필 알코올로 꼬리를 준비합니다.
- 캘리퍼를 사용하여 꼬리의 기지에서 20mm부터 시작하는 5mm 증분에서 절차 전에 꼬리 직경을 측정합니다. 이러한 측정은 잘린 콘방정식(37)을
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
지속적인 림프부종에 대한 마우스 꼬리 모델에 대한 기술은 도 1에도시된다. 그림은 마우스 꼬리 모델의 관련 해부학을 나타낸다. 도 2는 림프부종 유도 후 마우스 꼬리에서 점진적인 붓기와 지속성 림프부종을 보여줍니다. 잘린 원뿔 방정식에 의해 계산된 마우스 꼬리 부피는 주 4에서 피크를 6주차로 정점에 그었으며, 그 다음으로 15주차까지 지속되는 점진적인 개선이 뒤따릅니다. 꼬리 부피는 모델에서 림프부종에 대한 치료 적 개입의 효과를 평가하기 위한 결과 변수로 사용될 수 있다. 도 3에서,꼬리 혈관 의 자식의 평가를 위한 고해상도 레이저 반점이 관찰될 수 있다. 이것은 웰빙이 정맥 부상보다는 림프 기능 장애에 이차적임을 보장하기 위해 모델에 엄격함을 추가합니다. 내정간섭의 효력은 그 때 잠재적으로 더 중대한 신뢰를.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
림프부종은 1 차 (선천성) 또는 이차 (iatrogenic 림프) 상해38,39로분류된다. 이차 림프부종은케이스 39의 99%를포함합니다. 이차 림프부종은 가장 일반적으로 감염에 의해 발생 (filariasis) 또는 림프절절제술 또는방사선을가진 사후 종양학 치료4,39. 림프절및 방사선으로 치료된 동물의 70%가 림프부종2,16을획득하지 않기 때문에 번역 동물 모델은 이차 림프부종에 도전적이다. 또한, 황체형 림프부종은 림프 후 지연 된 발병 (1 년)을 나타낸다. 림프부종의 마우스 꼬리 모델은 이러한 장애물을 극복, 초점 꼬리 림프 절제를 겪고 모든 마우스는 절차 후 일.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 경쟁적인 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
이 작품은 미국 성형 외과 의사 학술 장학금 협회와 국방부 W81XWH2110135가 AHH에 제공하는 보조금 기금에 의해 지원되었습니다. 미적 수술 교육 및 연구 재단은 CKS에 NIH U01DK11909, R01NS042617 및 R01DK125835에 보조금을 지급합니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Tegaderm 필름 | 1626W | ||
| 외과 현미경 | Leica, Wetzlar, 독일 | MSV266 | |
| 접착 드레싱 (Tegaderm) | 3M, 세인트 폴, 미네소타 | 1626W | |
| 레이저 스페클 (Pericam PSI 시스템) | Perimed AB, Stockholm, Sweden) | PSIZ | |
| 근적외선 레이저 (LUNA) | Stryker (Formerly Novadaq Technologies, Toronto, Canada) | LU3000 | |
| C57BL/6 마우스 | Jackson Laboratories | 000664 | |
| Micro-Adson Forceps - 1x2 Teeth | Fine Science Tools (USA) Inc. | 11019-12 | |
| V-Hook | Fine Science Tools (USA) Inc. (브이훅 파인 사이언스 툴스) Inc. | 18052-12 | |
| 메스 SS NO15 | Fischer Scientific | 29556 | |
| 일회용 바늘 30GX1 | Fischer Scientific | 305128 | |
| 작동 가위 | Fischer Scientific | 12-460-796 | |
| Surgi-Or Jeweler's Forceps, Sklar 4-1/2 in | Fischer Scientific | 50-118-4255 | |
| 스프링 가위 - 스트레이트/샤프-샤프/ 8mm 커팅 엣지 | 파인 사이언스 도구 (미국) Inc. | 15024-10 | |
| Cardiogreen | Sigma | I2633-25MG | |
| IsosulfanBlue (림파주린) 50 mg/5ml | 마일란 | 67457-220-05 |
참고문헌
- Kataru, R. P., et al. Fibrosis and secondary lymphedema: chicken or egg. Translation Research. 209, 68-76 (2019).
- Brayton, K. M., et al. Lymphedema prevalence and treatment benefits in cancer: impact of a therapeutic inte....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
