이성애 복부 마우스 심장 이식 모델에서 혈액 회로 재건을 위한 새로운 기술이 입증된다.
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방법 논문
복부 마우스 심혼 이식 모형에 있는 혈액 회로 재건
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이 논문에서
요약
초록
마우스에서 이성애 복부 심장 이식의 외과 기술은 이식 면역학에 있는 연구를 위한 표준 모형입니다. 여기서, 이종성 복부 심장 이식 모델에서 수정된 혈액 회로 재건을 위한 확립된 기술이 제시된다. 이 방법은 기증자 심장의 폐 동맥 대신 열등한 정맥 카바(IIVC)를 사용하여 수혜자의 열등한 정맥 카바에 대한 해부학을 사용한다. 그것은 촉진 하 고 쥐에 복 심 혼 이식에 대 한 성공률을 개선.
서론
마우스에서 이성토피복부 심혼 이식의 외과기술은 이식면성1,2,3에대한 연구를 위한 표준 모델을 나타낸다. 그러나, 그것은 수행하는 것은 매우 도전적이며,이 모델4의광범위한 사용에 대한 제한을 연루4,5.
전통적인 마우스 심장 이식 (THTx)에서, 기증자 대동맥및 수령인 복부 대동맥은 폐 동맥이 수신자 열등한 베나 카바6,7,8에마취되는 동안 마취된다.
이러한 수정된 마우스 심장 이식 기법에서, 기증자 대자는 수혜자 복부 대어타에 대해 마취하고 기증자 IIVC는 수신자 열등한 정맥카바(3,4,6)(도
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프로토콜
모든 동물 실험은 과학적 목적으로 사용되는 동물의 보호에 대한 유럽 의회의 지침 2010/63/EU의 지침에 따라 수행되었습니다 (윤리위원회 승인, #G1071/09).
참고: 예비 제제, 마취, 수술 후 치료 및 모니터링 작업은 전통적인 수술 방법1,2,4에서수행되는 것과 동일합니다. BALB/c 마우스는 심장 기증자와 C57BL/6J를 이식 수혜자로 사용했습니다. 마우스는 8-12 주, 이식에 무게 ~30 g 세하 고 표준 조건 하에서 보관 되었다.
1. 준비 단계
- 마취의 경우, 쥐흡입제 이소플루란을 준다(2%) 잠들 때까지 케타민(100 mg/kg) + 자일라진(10 mg/kg) + 아세프로마진(2 mg/kg)의 복막 주사가 뒤따릅니다. 수술 후 진통의 경우 메타미졸 (200 mg /kg) p.o 및 Carprofen (5 mg / kg) s.c.를 적용하십시오.
참고: 이러한 물질이 면역 반응에 영향을 미칠 수 있기 때문에 항생제의 적용은 의도적으로 기권되었다. - 수술을 위해 마이크....
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결과
여기서, 이전에 우리의 실험실에서 개발되고 지난 16 년 동안 유용하다는 것을 입증한 마우스에 있는 이성애 복부 심혼 이식의 수정된 기술이 제시됩니다. 이전에는 베나카바(V-V 군)에 대한 전체 40건의 경우, 기존 폐동맥40례와 비교하여 정맥카바(P-V 군) 마취시4(표1)혈관 아나스토모시스가 V-V그룹에서 20.8±1.3분이 걸린 것으로 보고되었다. P-V 그룹(27.5±1.3분, p<0.01)보다 현저히 짧아졌다. 따뜻한 허혈 시간, 총 수용자 수술 시간 및 수술 후 심장 반복 시간, 각각 25.5±1.2 분, 42.0±1.5 분, 1.1±0.2 분, 또한 기존의 P-V 그룹에서 관찰 된 것보다 현저히 단축되었다 (모든 p<0.05)(그림 1). 본 모델10,11.......
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토론
마우스에 있는 이종성 복부 심혼 이식의 외과 기술은 아주 도전적이고 이것은 이 모형의 광범위한 사용에 제한을 연루합니다.
종래기술의 단점 중 하나는 기증자의 폐동맥(PA)의 제한 길이이다. 그것은 일반적으로 약 2 mm 길이의 길이, 반면 우리의 모델에 사용 되는 기증자 심장의 IIVC의 길이는 일반적으로 약 1 cm(도 2). 즉, 변형된 모델에서 IIVC 해부학은 해부학의 향상된 수술을 가능하게 하고 혈관의 너무 엄격한 봉합사 또는 손상병변의 원치 않는 발달을 방지하는 수술 시상주의 명확한 시력을 제공한다는 것을의미한다(도 4). PA의 건설과 IIVC 해부학은 숙련 된 운영자에게도 도전적입니다. PA는 매우 섬세하고 얇은 벽이며 IIVC는 마우스에서 더 얇고 잠재적으로 더 취약합니다. 따라서 운영자는 이러한 제한을 알고 있어야 하며 IIVC를 이의를 제기하고 필요할 때.......
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감사의 글
윤수 박사가 성우, 닥터 젠화 펑(Jianhua Peng) 박사의 도움에 감사를 표하고, 애니카 쿠칸 박사의 의견과 지원에 감사드립니다. 이 작품은 독일 연구 재단 (DFG)이 국제 협력을 촉진하기 위해 부분적으로 지원되었다 (HO2581/4-1 AH에), 중국의 국립 과학 재단 (NSFC; FJ에 #81760291).
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 30G-바늘 | Braun | 456300 | |
| acepromazine | CP Pharma | Tranquisol P | |
| BALB/c AnNCrl 마우스 | Charles River. 독일 | 카탈로그 번호 | |
| 없음 Bepanthen 눈 연고 | Haus-Apotheke | PZN 01578675 | |
| Bonn Micro Forceps | FST | 11083-07 | |
| 절연 및 산소 공급 장치용 상자 | RUSKINN | INVIV | |
| C57BL/6J 마우스 | Charles River. 독일 | 카탈로그 번호 | |
| 없음 Carprofen | Zoetis | Rimadyl 50 mg/ml | |
| CATHETER-FEP 26G | TERUMO | Surflo-W | |
| 클립 애플리케이터 펜치 스타일 | FST | 18057-14 | |
| 곡선 펜치 | WPI | 14114-G | |
| custodiol/HTK | Dr. Franz Kö hler Chemie | 카탈로그 번호 | |
| Cutasept 피부 소독 | VWR | BODL980365 | |
| 전기 수술 펜 | Bovie | CHANGE-A-TIP | |
| 거즈 패드, 면봉 | Lohmann-Rauscher | 13353 | |
| 가열 매트 | THERMO MAT PRO 30W | HTP-30 | |
| 지혈 스폰지 | CuraSpon | J1276A | |
| 헤파린 용액 | Haus-Apotheke | PZN 03029820 | |
| 아이스 박스 | PETZ | 카탈로그 번호 없음 | |
| 흡입 마취 장치 | GROPPLER | BKGM 0616 | |
| 절연 및 산소 공급 장치 | RUSKINN | INVIV | |
| 이소플루란 | CP Pharma | 이소플루란 CP 1 ml/ml | |
| 케타민 | Zoetis | 카탈로그 번호 | |
| metamizole | WDT | 카탈로그 번호 | |
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| 봉합사 묶는 집게 - 10 cm | FST | 18025-10 | |
| 봉합사(10-0) | 메드트로 | N2540 | |
| 봉합사(4-0) | 에틸론 | V4940H | |
| 봉합사(7-0) | 에틸론 | 1647H | |
| 주사기(0.3 mL) | BD | 324826 | |
| 주사기(1 mL) | BD | 320801 | |
| 자일라진 | 바이엘 | 롬푼 |
참고문헌
- Corry, R., Winn, H., Russell, P. Primarily vascularized allografts of heart in mice. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Habertheuer, A., et al. Donor tissue-specific exosome profiling enab....
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