이 프로토콜은 일반적으로 신경 과학에서 공부 여러 뇌 영역의 전체 및 해부에 돼지 뇌의 제거를위한 기술을 자세히 설명합니다.
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이 논문에서
요약
초록
돼지를 전임상 및 전염성 동물 모델로 사용하는 것은 심혈관 시스템, 위장 시스템 및 영양을 조사하는 연구 분야에서 잘 문서화되고 받아들여졌으며 돼지는 점점 더 신경 과학의 큰 동물 모델로 사용되고 있습니다. 또한, 돼지는 인간에서 일어나는 것과 유사한 두뇌 성장 및 발달 패턴을 표시하기 때문에 신경 발달을 공부하는 허용된 모형입니다. 신경 과학에서 덜 일반적인 동물 모델로, 돼지에 외과 및 해부 절차는 연구원 중 친숙 하거나 잘 연습 되지 않을 수 있습니다. 따라서 일관된 추출 및 해부 방법을 자세히 설명하는 표준화된 시각적 프로토콜은 돼지와 함께 일하는 연구자에게 가치가 있음을 증명할 수 있습니다. 다음 비디오는 피질과 뇌간을 그대로 유지하면서 돼지 뇌를 제거하는 기술을 보여주고 뇌간, 소뇌, 중뇌, 해마, 줄무늬, 시상 및 내측 전두엽 피질을 포함하여 여러 일반적으로 조사되는 뇌 영역을 해부하는 방법을 검토합니다. 이 비디오의 목적은 연구원에게 4주 된 돼지의 뇌 추출 및 해부를 일관되게 수행하는 데 필요한 도구와 지식을 제공하는 것입니다.
서론
돼지는 잘 문서화되어 심혈 관계 시스템1,위장 시스템2,영양3,4,당뇨병5,독성학6및 수술 기술7에서연구를위한 번역 가능한 동물 모델로 받아들여졌습니다. PubMed가 "돼지 뇌 동물 모델"이라는 키워드를 검색하여 1996-2005년 보다 4배 더 많은 결과를 초래함에 따라 신경 과학에서 돼지의 사용이 증가하기시작했으며,현재는 더 많은 결과가 나타나고 있습니다. 돼지 모델의 인기가 확대되는 주된 이유는 인간과 비교할 때 뇌의 성장, 구조 및 기능의 유사성 때문입니다. 인간의 뇌에 비해 돼지 뇌는 회색과 백색 물질의 유사한 자랄 패터닝, 혈관화 및 분포를 나타낸다9. 더욱이, 돼지 뇌는 신경 이미징 절차에 사용되어, 잠재적인 기록을 불러 일으켰으며, 신경외과 기술수립8,9. 다른 동물 모델과....
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프로토콜
어바나 샴페인 일리노이 대학의 기관 동물 관리 및 사용 위원회(IACUC)에 의해 동물 과목과 관련된 절차가 승인되었습니다.
참고 : 안락사 전에, 돼지는 텔라졸 : 케타민 : 자일라진의 조합과 근육 주사를 통해 마취되었다 (50.0 타일 타민 HCl 플러스 졸라제팜 H의 50.0 mg Cl은 케타민 HCl (100 g/L)의 2.50 mL및 자일라진 (100 g /L)의 2.50 mL로 재구성하고 0.06 mg / kg BW로 투여됩니다. 일단 마취되면, 돼지는 나트륨 pentobarbital의 심내 투여를 통해 안락사되었다 (390 mg / mL에서 투여 1 mL/ 5 kg BW). 뇌 해부에 대 한, 안락사의 방법은 조직의 원하는 분석 절차에 따라 선택 하는 것이 좋습니다. 안락사의 방법은 가능한 한 뇌에 작은 손상을 야기한다.
1. 돼지 뇌의 추출
- 인도적 안락사에 따라, 목의 목덜미 위에 절단하여 돼지를 참수, 첫 번째와 두 번째 척추 사이 (아틀라스와 축, 각각).
- 스파이크를 포함하도록 수정된 고정된 벤치 바이스로 머리를 고정합니다. 진행 하기 전에 머리가 완전히 고정 되어 있는지 확인 합니다.
- 메스를 사용하여 두개골의 중간선을 따라 ....
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결과
이 섹션에서는 4주 된 돼지 뇌의 정확한 추출 및 해부 후 얻은 결과의 예를 설명합니다. 그림 1은 해부 동안 가이드로 사용하기 위해 각 뇌 영역의 모양을 간략하게 설명합니다. 뇌의 일부는 소뇌의 제거 후 두개골에 남아있을 수 있습니다(도 1B). 이것은 소뇌의 원하는 영역을 격리하는 동안 제거 될 수있다. 표 1은 해부된 각 뇌 영역(n=5)에 대한 평균 중량(평균 ± 표준 오차)을 표시합니다.
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토론
본 명세서에 기술된 기술은 약 4주 의 돼지를 위해 디자인되었다. 돼지가 뇌 조직 구조의 무결성을 유지하기 위해 인도적으로 안락사 된 직후이러한 단계를 수행하는 것이 중요합니다, 특히 후속 생화학 적 분석을 고려할 때. 처음 기술을 배울 때 아틀라스 또는 섬유16 해부 가이드를 사용하는 것이 도움이됩니다. 실험자는 데이터 수집을 위한 샘플을 얻기 전에 여러 뇌 추출 및 해부를 연습하는 것이 좋습니다. 가장 어려운 단계는 두개골을 제거하는 것입니다. 이 단계는 주로 두개골에서 볼 수있는 곳과 두개골이 잘려졌을 때를 알 수있는 직접적인 연습이 필요하기 때문에 경험이 더 쉬워질 것입니다. 이 절차는 Bassi 외12에의해 설명된 것과 유사하지만 육각형 두개골 창을 만들 필요가 없으며 기술을 수행하는 방법에 대한 시각적 자습서를 제공합니다.
이 기술의 한계는 오래된 돼지와 함께 작업 할 때 나이가 들면.......
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공개 사항
저자는 경쟁적인 재정적 이익이 없다고 선언합니다.
감사의 글
저자는 짐 노블라우치와 마틴 부스 호지스 농업, 소비자 및 환경 과학 정보 기술 및 통신 서비스 대학의 촬영, 녹음 및 오디오 및 비디오 편집에 대한 전문 지식을 인정하고 싶습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| #22 메스 블레이드 #4 핸들 | Ted Pella, inc. | 549-4S-22 | |
| 11 1/2" Satterlee 뼈 톱 | Leica Biosystems | 38DI13425 | |
| 5 1/2" 두개골 브레이커와 끌 끝 (고기 후크) | Leica Biosystems | 38DI37636 | |
| 5인치 헤비 듀티 워크샵 벤치 바이스 | 포니 | 29050 | |
| 정육점 칼 25cm | Victorinox | 5.7403.25 | 사용 전 날카롭게 |
| CM40 라이트 듀티 드롭 단조 C 클램프 | Bessey | 00655BC3120 | |
| 다이아몬드 혼 나이프 셰 | 이퍼 셰프 ' s Choice | 436-3 | |
| Shandon 스테인리스 스틸 메스 블레이드 핸들 #4 | ThermoScientific | 5334 | |
| 조직 집게 Henry | Schein | 101-5132 | |
| 비닐 해부 패드 | Carolina | 629006 |
참고문헌
- Hughes, H. C. Swine in cardiovascular research. Laboratory Animal Science. 36 (4), 348-350 (1986).
- Yen, J. Anatomy of the Digestive System and Nutritional Physiology. Biology of the Domestic Pig. , 31-63 (2001).
- Pond, W. G. Of Pigs and People.
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재인쇄 및 허가
