조사 된 버피 코트에서 피더 세포를 사용하여 T 림프구의 격리 및 배양을 통해 대동맥 밸브 석회화 조사

Lavinia Curini; Mary Roxana Christopher; Herko Grubitzsch; Ulf Landmesser; Amedeo Amedei; Alexander Lauten; Brunilda Alushi

doi:10.3791/62059

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방법 논문

조사 된 버피 코트에서 피더 세포를 사용하여 T 림프구의 격리 및 배양을 통해 대동맥 밸브 석회화 조사

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DOI:

10.3791/62059

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2021년 2월 4일

Lavinia Curini^*¹^,² , Mary Roxana Christopher^*¹ , Herko Grubitzsch³^,⁴ , Ulf Landmesser¹^,³ , Amedeo Amedei^*²^,⁵ , Alexander Lauten^*¹^,⁶ , Brunilda Alushi^*¹^,⁶

¹Department of Cardiology, Campus Benjamin Franklin, Charité Universitätsmedizin Berlin and German Centre for Cardiovascular Research (DZHK), ²Department of Experimental and Clinical Medicine, University of Florence, ³Berlin Institute of Health, ⁴Department of Cardiology, German Heart Centre Berlin (DHZB), ⁵Sod of Interdisciplinary Internal Medicine, Azienda Ospedaliera Universitaria Careggi (AOUC), ⁶Department of General and Interventional Cardiology, Helios Klinikum Erfurt

^* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

이 연구에서는, 우리는 유동 세포 분석분석을 사용하여 적응성 백혈구 하위 집합의 특성화를 위한 T 세포 복제의 신선한 견본 및 T 세포 복제의 분석 단계에서 T 림프구 절연의 과정을 기술합니다.

초록

석회화 대동맥 판막 질환 (CAVD), 밸브의 온화한 두껍게에서 심한 석회화에 이르기까지 활성 질병 과정, 고체 대동맥 판막 교체 (TAVR)와 같은 새로운 치료 옵션에도 불구하고, 높은 사망률과 연관된다.

밸브 석회화로 시작하여 심각한 대동맥 협착증으로 이어지는 전체 경로는 부분적으로만 이해됩니다. 생체 내 대동맥 판막 세포의 밀접한 표현을 제공함으로써, 스테노판 막부 조직에서 T 림프구의 분석은 석회화의 발달에 있는 그들의 역할을 명확히 하는 능률적인 방법이 될 수 있었습니다. 수술 후, 신선한 대동맥 판막 시료는 작은 조각으로 해부되고 T 림프구가 배양되고 복제된 다음 형광 활성 세포 분류(FACS)를 사용하여 분석합니다.

염색 절차는 간단하고 스테인드 튜브는 파라포름알데히드의 0.5%를 사용하여 고정할 수 있으며 최대 15일 후에 분석할 수 있습니다. 염색 패널에서 생성된 결과는 개입과 관련하여 시간이 지남에 따라 T 세포 농도의 변화를 추적하는 데 사용될 수 있으며 관심의 특정 T 세포 아류형의 활성화 상태를 평가하기 위해 쉽게 더 발전될 수 있다. 이 연구에서는, 우리는 새로운 석회화 대동맥 판막 샘플과 CAVD 병리생리학에서 적응성 면역의 역할을 더 이해하기 위해 유동 세포 세포를 분석하는 단계와 T 세포 클론에 수행 T 세포의 절연을 보여줍니다.

서론

석회화 대동맥 판막 질환 (CAVD)은 가장 흔한 심장 판막 질환 중 하나이며 의료에 큰 영향을 미칩니다. 지난 몇 년 동안 대동맥 판막 교체의 빈도가 급격히 증가하고 있으며, 고령인구가 증가함에 따라 더욱 증가할 것으로 예상됩니다¹.

CAVD의 근본적인 병리생리학은 부분적으로만 알려져 있으며 현재 치료 전략은 외과 또는 경피 적 절차를 통해 보수적 인 조치 또는 대동맥 판막 교체로 제한됩니다. 현재까지, 어떤 효과적인 치료도 CAVD 진행을 방해하거나 되돌릴 수 없으며 높은 사망률은 대동맥 판막 교체(AVR)가 수행되지 않는 한 초기 증상 발병과 관련이 있습니다². 심한 증상 대동맥 협착증 환자에서 3 년 증상없는 생존은 20%³으로 낮게 보고되었습니다. Transcatheter 대동맥 판막 교체 (TAVR)는 새로운 옵션을 나타냅니다, 고위험 환자에 대한 치료를 혁명, 특히 노인 중 극적으로 사망률을 감소했다, 이는 본질적으로 이 인구^4,5,6. ....