고주파 두개골 이중 초음파를 가진 수브라크누이드 출혈의 뮤린 모형에 있는 뇌 혈관경련의 분석

요약

이 원고의 목적은 마우스의 대뇌 동맥에서 혈류의 생체 내 이미징을 허용하는 초음파 기반 방법을 제시하는 것입니다. 우리는 지주 막 증 출혈의 뮤린 모델에서 혈관 경련과 관련 된 혈액 흐름 속도의 변화를 결정 하기 위해 그것의 응용 프로그램을 보여줍니다 (SAH).

초록

치피 뇌졸중의 일종인 체해 출혈 후 몇 주 후에 발생하는 뇌 혈관질은 뇌허혈지연에 기여합니다. SAH의 뮤린 모델을 사용하여 실험 연구에서 발생하는 문제는 마우스에서 뇌 혈관 경련의 생체 내 모니터링방법이 부족하다는 것입니다. 여기서, 우리는 마우스에 대한 경두개 이중 초음파 검사를 수행하기 위해 고주파 초음파의 적용을 보여줍니다. 이 방법을 사용하여 내부 경동맥(ICA)을 식별할 수 있습니다. 두개내 IcA의 혈류 속도는 SAH의 유도 후 크게 가속화되었으며, 두개골 ICA의 혈류 속도는 뇌 혈관 경련을 나타내는 낮은 상태를 유지했습니다. 결론적으로, 여기서 입증된 방법은 뮤린 SAH 모델에서 뇌 혈관경련의 기능적 비침습적 생체 내 모니터링을 허용한다.

서론

자발적인 지주막 출혈 (SAH)은 주로 두개 내 동맥류^1의파열로 인한 출혈성 뇌졸중의 한 형태이다. 신경학적 결과는 주로 출혈의 효과와 관련된 과도 글로벌 뇌 허혈의 영향으로 인한 조기 뇌 손상(EBI)과 출혈^2,3다음 주 동안 발생하는 지연된 대뇌 허혈(DCI)의 두 가지 요인에 의해 좌우된다. DCI는 SAH 환자의 최대 30%에 영향을 미치는 것으로 보고되었다^2. DCI의 병리학은 혈관 신생 뇌 혈관 경련, 미세 혈관 경련 및 미세 혈전증으로 인한 방해 된 미세 순환, 피질 확산 우울증 및 염증^4에의해 유발되는 효과를 포함한다. 불행하게도, 정확한 병리 생리학은 불분명남아 효과적으로 DCI^3을방지하는 가능한 치료가 없습니다. 따라서 DCI는 많은 임상 및 실험 연구에서 조사됩니다.

요즘, SAH에 대한 대부분의 실험 연구는 특히 마우스^5,

프로토콜

동물 실험은 책임있는 동물 관리위원회 (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz)에 의해 승인되고 독일 동물 복지법 (TierSchG)에 따라 실시되었습니다. 동물의 치료와 사용에 대한 모든 해당 국제, 국가 및 제도적 지침이 준수되었습니다. 이 연구에서는 19-21 g 사이의 체중으로 11-12 주 세 여성 C57BL/6N 마우스에서 두개 내 및 두개골 동맥의 혈류 속도의 측정을 수행했습니다. 마우스는 SAH 유도 또는 가짜 수술을 받았으며, 이는 다른 곳에서 자세히 설명된^10,12,13.

1. 재료 의 준비

1. 초음파 기계를 켜고 동물 ID를 입력합니다.
2. 초음파 시스템의 가열 판을 37 °C로 데우습니다. 직장 온도 프로브를 사용할 준비가 되었는지 확인합니다.
3. 수조를 사용하여 초음파 젤을 37 °C로 가열하십시오. 제모 크림, 전극에 대한 접촉 크림, 눈 연고를 준비합니다.

2. 마취

1. 마우스를 챔버에 넣고 4% 이소....

결과

6마리의 마우스에서, 3마리가 샴 수술을 받는 동안 내측 경동맥(ICA)과 자궁내경동맥(ICA)의 혈류 속도가 수술 1일 전에 결정되었고, 수술 후 1일, 3, 7일 동안 내혈관 필라멘트 천공 모델을 사용하여 SAH를 유도하였다. 측정은 37°C^19에서체온을 유지하면서 이소플루란을 가진 마취하에 다른 연구의 에코카르디그래피 검사의 일환으로 수행되었다.

수술 전, 초두개 및 두개 내 혈류 속도뿐만 아니라 내외 혈액 흐름의 수분은 SAH와 가짜 동물 사이에 유사했습니다. SAH 유도 후 첫날에는 두개 내 혈류 속도 또는 두개 내 및 외두개 혈류의 비율에 큰 변화가 없었습니다.

3일과 7일에 ICA의 두개 내 혈류 속도는 SAH 동물의 2에서 현저하게 증가하여 SAH 후 뇌 혈관 경련을 나타냅니다. 두개골 혈류 속도가 거의 변하지 않았기 때문에, 대뇌 혈관 경련을 나타내는 SAH 동물의 7 일.......

토론

우리의 지식의 최고에, 이 연구는 고주파 경두개 색 으로 코딩 된 듀플렉스 초음파와 SAH의 뮤린 모델에서 뇌 혈관 경련의 모니터링을위한 프로토콜을 제시하는 첫번째입니다. 우리는 이 방법이 마우스에 있는 SAH 유도 후에 두개 내 혈류 속도의 증가를 측정할 수 있다는 것을 보여줍니다. 인간 의학에서 이 현상은 잘 알려져^있다3,15. 몇몇 임상 연구는 큰 두개 내 동맥의 높은 혈류 속도와 자궁 내 및 외두개 혈류 속도의 높은 몫이 혈관 협개및 혈관 질화증과 상관 관계가 있는 기능적인 결과이다는 것을 보여주었습니다^(15에서검토됨). 임상적 관행에서, 따라서 SAH^3,15이후 뇌 혈관 경련의 비침습적 침대 측 모니터링을 위해 TCD 또는 TCCD를 사용하는 것이 일반적이다.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
Balea 제모 크림	Balea; 독일	ASIN B0759XM39V	제모 크림
C57BL/6N 마우스	Janvier; Saint-Berthevin Cedex, 프랑스	n.a.mice
Corneregel	Bausch& 롬; 미국 뉴욕주 로체스터	REF 81552983	안연고, 윤활
면봉	Hecht Assistent; Sondenheim vor der Rö hn, 독일	REF 44302010	면봉
Ecco-XS 면도기	Tondeo; Soligen, 독일	DE 28693396	면도기
전극 크림	GE; 보스턴, 매사추세츠, 미국	REF 21708318	전도성 페이스트
가열판	Medax; Kiel, 독일	2005-205-01
Isoflurane	Abvie; 독일 비스바덴	n.a.	휘발성 마취제
Leukofix	BSN medical; 독일 함부르크	REF 02137-00	테이프
기계 팔 + 미세 조작기	VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA	P/N 11277
마이크로백 티슈	Paul Hartmann AG; 독일 함부르크	REF 981387	항균 조직
MZ400, 38MHz 선형 어레이 변환기	VisualSonics; FujiFilm, 토론토, CA	REF 51068-30	초음파 변환기
Sonosid	ASID Bonz GmbH; Herrenberg, 독일	REF 782010	초음파 검사 젤
초음파 플랫폼(가열판 및 ECG 기록	VisualSonics 포함); FujiFilm, 토론토, CA	P/N 11179
UniVet-Porta	Groppler; 독일 Oberperasberg,	S/N BKGM0437	이소플루란 기화기
Vevo3100	VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA	REF 51073-45	초음파 검사 장치
VevoLab 소프트웨어	VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA	n.a.	평가 소프트웨어