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방법 논문

의식 억제 토끼에서 발작, 부정맥 및 무호흡증의 식별을위한 다중 시스템 모니터링

6K 조회수

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DOI:

10.3791/62256

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2021년 3월 27일

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이 논문에서

요약

동시 비디오-EEG-ECG-oximetry-capnography를 사용하여, 우리는 자극 부정맥과 발작을 개발하기 위해 토끼 모델의 감수성을 평가하는 방법론을 개발했습니다. 이 새로운 기록 시스템은 치료법의 효능과 안전성을 테스트하는 플랫폼을 구축하고 갑작스런 사망으로 끝나는 다중 시스템 이벤트의 복잡한 폭포를 캡처 할 수 있습니다.

초록

이온 채널로요법을 가진 환자는 발작과 치명적인 심장 부정맥을 개발의 고위험에 있습니다. 간질을 가진 사람들에서 심장병과 부정맥의 더 높은 보급이 있습니다 (즉, 간질 심장). 추가적으로, 심장과 자율 장애는 포착을 둘러싼 보고되었습니다. 1:1,000 간질 환자/년 간질에서 갑작스런 예기치 않은 죽음으로 사망 (SUDEP). SUDEP에 대한 메커니즘은 불완전하게 이해되어 있습니다. 뇌전도그램(EEG) 및 심전도그램(ECG)은 발작 및 부정맥에 대한 기판/트리거를 감지하고 연구하기 위해 임상 환경에서 일상적으로 사용되는 두 가지 기술입니다. 이 방법론에 대한 많은 연구와 설명이 설치류에 있지만 심장 전기 활동은 인간과 크게 다릅니다. 이 문서에서는 의식토끼에서 동시 비디오-EEG-ECG-oximetry-capnography를 기록하는 비침습적 방법에 대한 설명을 제공합니다. 토끼와 인간에서 심장 전기 기능이 유사하기 때문에 토끼는 번역 진단 및 치료 연구의 훌륭한 모델을 제공합니다. 데이터 수집 방법론을 설명하는 것 외에도 토끼의 신경 심장 전기 기능 및 병리학을 검사하기위한 분석 접근 방식에 대해 논의합니다. 여기에는 부정맥 검출, EEG의 스펙트럼 분석 및 절제된 토끼를 위해 개발된 발작 스케일이 포함됩니다.

서론

전기장전도(ECG)는 임상 환경에서 일상적으로 사용되어 심장 전기 전도 및 전기 활성화-회수 공정의 역학을 평가합니다. 심전도는 부정맥, 허혈 및 경색의 위험을 감지, 지역화 및 평가하는 데 중요합니다. 전극은 심장의 3차원 뷰를 제공하기 위해 환자의 가슴, 팔 및 다리에 부착됩니다. 심근 탈극의 방향이 전극을 향해 있을 때 양성 편향이 생성되고 심근 탈극의 방향이 전극에서 떨어져 있을 때 음의 편향이 생성됩니다. 심장 주기의 전극 성분은 심방 탈극성(P wave), 심실 전도(P-R 간격), 심실 흥분(QRS 복합), 및 심실 석화(T wave)를 포함한다. 인간, 토끼, 개, 기니 피그, 돼지, 염소, 말1,2,3을포함한 많은 포유류에 걸쳐 심전도 및 행동 잠재적 인 조치에 큰 유사점이 있습니다.

토끼는 심장 번역 연구를위한 이상적인 모델입니다. 토끼 심장은 이온 채널 조성및 작용 잠재력 속성2,4,5의관점에....

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프로토콜

모든 실험은 국립 보건원 (NIH) 지침 및 업스테이트 의과 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 따라 수행되었습니다. 또한 이 프로토콜의 개요는 그림 1에제공됩니다.

1. 녹음 장비 준비

  1. 컴퓨터를 64핀 헤드박스로 앰프에 연결합니다.
    참고: 각 동물은 헤드의 4사분면으로부터 EEGs용 4개의 직선 피하 피피 핀 전극(7 또는 13mm), ECG용 3개의 구부러진 피하 체가슴핀 전극(13mm,35°각도), 오른쪽 다리에 1개의 구부러진 피더말 접지 전극, 그리고 1개의 직선 하부 두피 핀 전극을 헤드의 참조로 제공합니다.
  2. 헤드박스의8번째 핀을 참조로 만들려면 인수 소프트웨어 설정, 획득 탭을 업데이트하므로 참조 전극은"독립"(예: 연구 모드)입니다.
    참고: 이를 통해 최대 7마리의 동물을 동시에 기록할 수 있으며, 각 동물은 7개의 전극과 전용 기준 전극과 지상 전극을 통해 하나의 앰프, 디지타이저 및 컴퓨터를 통해 기록할 수 있습니다. 모든 전극은 단극성 채....

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결과

전술한 방법은 호흡 장애뿐만 아니라 뇌와 심장의 전기 전도 시스템에서 이상을 검출할 수 있다. 데이터 수집 소프트웨어는 심전도 형태를 평가하고 비정상적인 심박수, 전도 장애 또는 심전도 리듬(심방/심실 이외 자극 박동 및 브래디/빈맥-부정맥)을 검출하는 데 사용됩니다(그림6). 심전도 형태를 시각화하는 것 외에도, 추적은 RR 간격, 심박수, PR 간격, P 지속 시간, QRS 간격, QT 간격, QTc, JT 간격 및 T피크를 T끝 간격으로 정량화하기 위해 분석된다. 이 데이터의 분석은 타키 / 브래디 부정맥이 쉽게 검출된다는 것을 보여줍니다.

ECG 데이터를 분석하는 것 외에도 EEG 데이터도 분석됩니다. 기준선 EEG는 스펙트럼 분석(도

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토론

이 실험 용 설정은 특히 심장 및 / 또는 뉴런 질환의 모델에서 토끼의 상세한 동시 비디오 EEG-ECG -oximetry-capnography 기록 및 분석을 용이하게합니다. 이 문서의 결과는 이 방법이 발작과 부정맥을 감지하고 전기 화티팩트에서 차별화할 수 있음을 보여줍니다. 예상 된 결과 토끼에게 발작을 유도 하는 질성 경련을 줄 때 얻은. 비디오-EEG 기록에서 얻은 데이터는 인증 구동 반응, 뇌병증 및 간질 방전을 포함한 모터 발작 및 뇌전도 이상 증가와 자발적움직임을 구별하기 위해 추가로 분석될 수 있었다. 다양한 유형의 간질 방전을 더욱 특징으로 하고 모터 활동과 상관관계가 있었다. 심전도의 분석은 높은 신호 대 잡음 비율을 생성하고 각 전기 적 심장 순환의 식별 및 정량화를 허용하는 방법을 입증했다. 이 방법은 또한 조기 심실 복합체, 서맥, 심장 블록, 빈맥, 빈맥 부정맥 및 아시스톨을 포함한 심장 이상의 존재를 감지할 수 있었습니다. 다중 시스템 질병의 신경 심장 상호 작용을 더 자세히 조사하는 강력한 방법의 .......

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공개 사항

저자는 공개 할 것이 없습니다.

감사의 글

저자는 이 연구가 미국 심장 협회, 미국 간질 학회 및 약리학의 SUNY 업스테이트 부의 보조금에 의해 지원되었다는 것을 인정합니다.

....

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
0.9% 염화나트륨 관개, USP - 플렉시블 컨테이너화이자(HOSPIRA)7983-09희석제
10cc 루어 잠금 주사기(20G x 1" 바늘 포함)Sur-VetSS-10L2025약물 주입 후 플러시로 사용
4x4 거즈 스폰지Fisher Scientific22-415-469튜브에 말아서 혈관 테터로 귀에 부목
과 소스Kirkland897971경구 약물 용 차량
컴퓨터DellOptiplex 5040수집 컴퓨터
E-4031Tocris1808QT 간격을 연장하는 것으로 알려진 에이전트
ECG 전극RhythmLinkRLSND116-2.513mm 35도 구부러진 (0.4mm 직경) 피하 핀 전극
EEG 전극RhythmLinkRLSP5135-트위스트 13mm 직선(직경 0.4mm) 피하 핀 전극
EEGLAB (2020)Swartz Center for Computational NeuroscienceOpen Access의 스펙트럼 분석을 수행할 수 있습니다
락사-III 솔루션Med-PharmexANADA 200-280펜토바르비탈 나트륨 및 페니토인 나트륨 함유, 규제 물질
폼 패딩일반N/A목 압박의 심폐 부작용을 방지하기 위해 구속자에 의해 작은 토끼의 목에 가해지는 압력을 줄입니다.
헤파린 잠금 플러시메드라인EMZ50051240혈관 카테터의 개통을 유지하기 위해
IR 라이트BoschEX12LED-3BD-8W어두운 곳에서도 쉽게 녹음할 수
LabChart Pro (2019, 버전 8.1.16)ADInstrumentsN/AECG Analysis
JELCO PROTECTIV Safety I.V. Catheters, 25 gaugeSmiths Medical3060marginal ear vein catherize
MATLAB (R2019b, Update 5)MathWorksN/AEEGLAB
마이크Sony StereoECM-D570P실행에 필요발작의 가청 징후 기록
미세 기공 의료 테이프, 종이, 흰색3M1530-1전선을 고정하고 귀 부목을 만드는 데 사용
Natus NeuroWorksNatusLC101-8획득 및 검토 소프트웨어
Pentylenetetrazol (1-10 mg / kg, 항상 1mL 용량)Sigma-Aldrich88580식염수
Photic StimulatorGrass에서 제조 된 희석광 펄스의 주파수, 지연, 지속 시간, 강도를 제어하는
LM-12-100-BLK 12Vwire.com LM-12-100-BLK노이즈를 줄이기 위한 번들 와이어
PS 22 Photic Stimulator잔디 악기BZA641035플래시 주파수, 지연 및 강도를 조정할 수 있는 스트로브 라이트
PVC 파이프일반N/A작은 토끼가 뒷다리를 차서 척추 부상을 일으키는 것을 방지합니다
Quantum AmplifierNatus13926증폭기 / 디지타이저
Quantum HeadBox 증폭기Natus2213464핀 브레이크아웃 박스
토끼 재조련Plas-Labs501-TC다양한 크기의 토끼 재조정기를 사용할 수 있습니다. 이 연구에서는 6" x 18" x 6"입니다.
고무 패드 (부스터)일반N / A목 압박을 방지하기 위해 구속 장치에서 작은 토끼를 들어 올립니다
SpO2 귀 클립NONIN61000PureSAT / SpO2
SpO2 센서 어댑터NONIN13931XPOD PureSAT / SpO2
SRG-X120 1080p HDMI, IP 및 3G-SDI 출력 SonySRG-X120Impela 카메라
Terumo Sur-Vet 투베르큘린 주사기 1cc 25G X 5/8" Regular LuerSur-Vet13882정맥 투여제 주입에 사용
의학 주사 플러그 Luer LockSur-VetSRIP2V정맥 투여용 바늘 삽입용 주사 플러그
Webcol Alcohol Prep, Sterile, Large, 2-plyCovidien5110카테터 삽입 전에 귀 정맥을 준비하기 위해
사, EEG, 이더넷-이더넷 어댑터, 카메라를 컴퓨터에 연결하기 위한 Linksys USB3G16 어댑터. 안 있습니다 PS22 자극기사 수

참고문헌

  1. Kaese, S., et al. The ECG in cardiovascular-relevant animal models of electrophysiology. Herzschrittmacherther Elektrophysiology. 24 (2), 84-91 (2013).
  2. Pogwizd, S. M., Bers, D. M. Rabbit models of heart disease. Drug Discovery Today: Disease Models....

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