만성 심리사회적 스트레스(CGS) 패러다임은 임신 중 임상적으로 관련된 스트레스요인들을 고용하여 산모와 유아의 정신장애를 모델링합니다. 여기서는 CGS 패러다임 및 다운스트림 평가를 적용하여 이 모델의 유효성을 검사하는 단계별 절차를 제공합니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
방법 논문
어머니와 유아에 있는 정신 장애에 대한 번역 관련 패러다임으로 임신에 있는 심리사회적 긴장의 Murine 모형을 이용하
이 논문에서
요약
초록
peripartum 기간은 불리한 모성 노출이 신경 정신병 장애의 발달을 포함하여 어머니와 자손 둘 다에 대한 장기적인 부정적인 결과를 초래할 수 있는 민감한 기간으로 여겨됩니다. 모계 유아 dyad에 있는 정서적 dysregulation의 출현에 연결된 위험 요소는 광범위하게 공부되었습니다. 임신 중 심리사회적 스트레스에 대한 노출은 지속적으로 가장 강력한 예측 요인 중 하나로 부상했습니다. 이 연결을 탐색하기 위해 여러 설치류 모델이 만들어졌습니다. 그러나, 이 모형은 정확하게 여자가 경험하는 스트레스의 모형, 강렬 및 주파수를 포착하지 않는 반복적인 방식으로 제시된 물리 스트레스또는 한정된 수의 심리사회적 스트레스제의 사용에 의지합니다. 이러한 한계를 극복하기 위해, 만성 심리 사회적 스트레스 (CGS) 패러다임은 예측할 수없는 방식으로 제시 다른 강도의 다양한 심리 사회적 모욕을 사용하는 생성되었다. 원고는 임신 일 6.5에서 17.5까지 임신 한 여성 마우스가 낮과 밤에 다양한 스트레스에 노출되는이 새로운 CGS 패러다임을 설명합니다. 하루 스트레스, 2 시간 휴식으로 분리 하루에 두, 침구의 빈번한 변화에 이물질 이나 육식 동물 냄새에 노출에서 범위, 침구의 제거, 그리고 케이지 틸팅. 야간 스트레스에는 연속 광 노출, 케이지 메이트 변경 또는 습윤 침구가 포함됩니다. 우리는 이전에 CGS에 노출이 증가 된 스트레스 반응성, 단편화된 모계 치료 패턴의 출현, anhedonia 및 불안 관련 행동의 출현, 주산기 기분과 불안 장애로 고통받는 여성의 핵심 특징을 포함하여 모계 신경 내분비 및 행동 이상의 발달을 초래한다는 것을 보여주었습니다. 따라서 이 CGS 모델은 태아 신경 발달에 영향을 미치고 자손에 있는 부정적인 장기 행동 결과를 초래하는 트랜스 태반 기계장치뿐만 아니라, 모계 정서 dysregulation의 근본적인 분자 결함을 해명하는 데 사용할 수있는 독특한 도구가됩니다.
서론
기전은 peripartum 기간에 있는 불리한 모계 노출 다음 어머니와 유아에 있는 신경 정신병 장애에 증가한 감수성을 근본적으로 남아 있습니다 크게 알려지지 않았습니다. 실질적인 모성 생리학적 변화는 건강한 자손 신경발달뿐만 아니라 모성 정신건강보호를 위해 서술되는 여러 신경 내분비 적응을 포함하여 임신 중 및 산후 기간으로의 전환중에 발생한다1,2. 모계 시상하부 하부 부신(HPA) 축의 수준에서, 일루날 HPA 축 활성의 보다 평평한 리듬을 포함하고 급성 스트레스에 대한 HPA 축 반응이3,4,5를약화시키는 등, circadian 및 스트레스 유발 수준 모두에서 적응이 관찰된다. 향상된 HPA 축 활성이 산후 정서적 dysregulationsregulation을 가진 여성의 하위 집합에서 보고된다는 점을 감안할 때, 순환 글루코코르티코이드의 증가 수준을 포함하고 부정적인 피드백을 억제6,7,
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
설명된 모든 동물 실험은 신시내티 아동 의료 센터의 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인되었으며 국립 보건 원 지침에 따라 일치했습니다. 표준 설치류 차우및 물에 대한 광고 리비툼 접근은 CGS 패러다임 동안을 포함하여 마우스에게 항상 제공되었다. 마우스는 달리 지정되지 않는 한 14 h/10h 의 밝은 어두운 주기 (06:00 h의 조명)에 보관되었습니다 (즉, 하룻밤 동안 조명에 노출).
1. 시간 제비 결합 준비
- 시간 조정 된 짝짓기를 설정하기 전에 적어도 2 주, 표준 마우스 케이지 (18.4 cm x 29.2 cm x 12.7cm), 케이지 당 4 개의 마우스에 성인 여성 마우스를 함께 보관하십시오. 이어 태그를 통해 각 여성 마우스에 특정 ID 번호로 레이블을 지정합니다.
참고: C57BL6 이전 임신 없이 3~6개월 사이의 여성 마우스가 이 프로토콜에 사용되었습니다. - 적어도 1 주 시간 시간 결합을 설정 하기 전에, 개별적으로 결합에 사용 되는 성인 남성 마우스를 집.
2. 시간 제비 결합 설정
- 시간 조정된 짝짓기는 18:00h에 설정합니다. 암컷 마우스 두 마리를 데리고 개별적으로 보관된 수컷....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
임신한 암컷 마우스를 CGS에 노출시킴으로써 임신 중 체중증가(도 2A)와산후 기량 증가(도2B)19의만성 스트레스 관련 파라미터의 변화를 초래한다. 중요한 것은, CGS에 노출은 모계 신경 내분비 기능에 있는 산후 이상을 초래합니다. CGS 댐은 새로운 급성 모욕의 적용에 따라 혈청 코르티코스테론 수준이 증가하여 입증된 바와 같이 활동적인 HPA 축을나타낸다(그림 3)19.
임신한 여성 마우스를 CGS에 노출시키는 것은 우울과 같은 표현형의 출현을 반영하는 것처럼 보이는 초기 산후 기간에 있는 행동 이상을 더 초래합니다. CGS 댐은 새끼에 의해 수신된 모계 신호의 단편화 정도의 증가에 의해 반영된 바와 같이 모성 배려에 있는 변경을 .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
임신한 마우스를 CGS 산후 산모 신경내분비 기능에 노출시키고, 새로운 스트레스에 대한 HPA 축 반응을 포함하고, 주산기 기분과 불안 장애와 관련된 다양한 행동 이상과 관련이 있다. 모델이 환경 위험 인자의 활용을 사용하는 것을 감안할 때, 유전자모델(22)에서달리 관찰된 것보다 더 높은 현상변이 예상된다. 그럼에도 불구하고 CGS 패러다임의 적용으로부터 얻은 결과는 결과를 혼동할 수 있는 변수를 최소화하기 위해 주의를 기울이면 연구 실험실 전반에 걸쳐 일관되게 이루어질 수 있다.
프로토콜의 중요한 단계는 CGS 마우스와 분리된 하우징 제어 마우스를 포함하여 일반적인 축산 관행과 관련된 단계 및 시간 제결합 단계를 포함합니다. 공동 하우징 제어 및 CGS 마우스 자체는 대조군에 대한 스트레스 자극이 될 수 있으므로 신경 내분비 또는 행동결과(23,24)를혼동할 수
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 공개 할 이해 상충이 없습니다.
감사의 글
저자는 일반 의학 과학 T32 GM063483-14 보조금과 신시내티 아동 연구 재단의 국립 연구소의 지원을 인정하고자합니다. Zoubovsky 등에서 적응 된 데이터의 경우, 2019, 크리에이티브 공통 라이센스는 다음 위치에서 찾을 수 있습니다: http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 동물 란셋 | Braintree Scientific Inc. | GR4MM | |
| 무딘 끝 프로브 | Fine Science Tools | 10088-15 | 교미 플러그 병을 확인하는 데 사용됩니다 |
| . | WTRBTL S-BL | 100mL 유리 물병, 스토퍼와 홀퍼 볼포인트 튜브 포함, 1mL 등급. | |
| 원뿔형 튜브(50mL) | Corning Inc. | 352098 | 급성 스트레스에 대한 HPA 축 반응을 측정하기 위해 마우스를 억제하는 데 사용됩니다. 원추형 튜브의 끝에 환기를 위한 작은 구멍이 있는지 확인하십시오. |
| 레고 | 아마존 | - | |
| 마블 아마존 | - | ||
| 마우스 코르티코 스테론 ELISA 키트 | 바이오 벤더 | RTC002R | |
| 마우스 EZM | TSE 시스템 | - | |
| 상호 실험실 쉐이커 | Labnet international | S2030-RC-B | |
| 혈청 분리기 튜브 | Becton Dickinson | 365967 | |
| 정적 케이지 - 바닥 | Alternative Design Manufacturing and Supply Inc. | RC71D-PC | |
| 정적 케이지 - 여과 된 통풍 탑 | Alternative Design Manufacturing and Supply Inc. | FT71H-PC |
참고문헌
- Hillerer, K. M., Reber, S. O., Neumann, I. D., Slaterry, D. A. Exposure to chronic pregnancy stress reverses peripartum-associated adaptations: implications for postpartum anxiety and mood disorders. Endocrinology. 152 (10), 3930-3940 (2011).
- Hillerer, K. M., Neumann, I. D., Slaterry, D. A.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
