이 프로토콜은 서로 다른 혈역학 (그루터기 및 분기 별자리)을 가진 두 개의 엘라 스타제 소화 동맥류가있는 토끼 모델을 만드는 단계를 설명합니다. 이를 통해 단일 동물 내에서 다양한 혈관 구조 및 혈역학 적 상태를 가진 동맥류에서 새로운 혈관 내 장치를 테스트 할 수 있습니다.
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이 프로토콜은 서로 다른 혈역학 (그루터기 및 분기 별자리)을 가진 두 개의 엘라 스타제 소화 동맥류가있는 토끼 모델을 만드는 단계를 설명합니다. 이를 통해 단일 동물 내에서 다양한 혈관 구조 및 혈역학 적 상태를 가진 동맥류에서 새로운 혈관 내 장치를 테스트 할 수 있습니다.
인간 두개내 동맥류에 가까운 혈역학적, 형태학적 및 조직학적 특성을 가진 전임상 동물 모델은 병태생리학적 과정의 이해와 새로운 치료 전략의 개발 및 테스트에 중요한 역할을 합니다. 이 연구는 동일한 동물 내에서 서로 다른 혈역학 적 조건을 가진 두 개의 엘라스타제 소화 천골 동맥류를 만들 수있는 새로운 토끼 동맥류 모델을 설명하는 것을 목표로합니다.
평균 체중이 4.0 (± 0.3) kg이고 평균 연령이 25 (±5) 주 인 암컷 뉴질랜드 흰 토끼 5 마리가 미세 수술 그루터기와 분기 동맥류 생성을 받았습니다. 하나의 동맥류 (그루터기)는 상완 두부 줄기에서 기원에서 우측 총 경동맥 (CCA) 노출에 의해 생성되었습니다. 임시 클립은 CCA 원점과 2cm 위의 다른 클립에 적용되었습니다. 이 세그먼트는 20분 동안 100 U의 엘라스타제의 국소 주사로 처리되었다. 두 번째 동맥류 (분기)는 엘라 스타제 처리 된 동맥 주머니를 오른쪽 CCA의 끝에서 측면 문합으로 봉합하여 왼쪽 CCA로 생성되었습니다. 개통성은 생성 직후 형광 혈관 조영술에 의해 조절되었다.
평균 수술 시간은 221분이었다. 같은 동물에서 두 개의 동맥류를 만드는 것은 합병증없이 모든 토끼에서 성공적이었습니다. 모든 동맥류는 엘라스타제 배양 및 즉각적인 내강 내 혈전증으로 인해 극심한 조직 반응을 보인 분기 동맥류 1개를 제외하고 수술 직후 특허를 받았습니다. 수술 및 최대 1개월의 추적 관찰 기간 동안 사망률은 관찰되지 않았습니다. 이환율은 일과성 전정 증후군 (토끼 1 마리)으로 제한되었으며, 하루 만에 자연적으로 회복되었습니다.
여기에서 처음으로 입증 된 것은 그루터기 및 분기 혈역학 적 특성과 고도로 퇴화 된 벽 조건을 가진 2 동맥류 토끼 모델을 만들 수있는 가능성입니다. 이 모델은 다양한 흐름 조건에서 동맥류 생물학을 기반으로 자연 경과 및 잠재적 치료 전략을 연구 할 수있게합니다.
두개 내 동맥류는 파열 후 사망률이 50 %에 도달하고 환자의 10-20 %에서 장기 장애가있는 심각한 상태입니다1. 지난 10년 동안 혈관 내 치료 옵션이 급속히 발전했지만 동시에코일링 후 동맥류 재개통의 최대 33%로 재발률이 증가했습니다. 동맥류 폐색 및 재개통의 기초가 되는 병태생리학을 더 잘 이해하고 새로운 혈관내 장치의 개발 및 테스트를 위해 현재 혈류역학적, 형태학적 및 조직학적 특성이 인간 두개내 동맥류의 특성을 모방하는 신뢰할 수 있는 전임상 모델이 필요합니다.4,5,6 . 현재로서는 전임상 시험의 표준으로 정의된 모델이 없으며 연구자(7,8)가 광범위한 종과 기술을 사용할 수 있습니다.
그러나 토끼는 목 동맥과 인간 대뇌 혈관 사이의 크기와 혈역학 적 유사성뿐만 아니라 유사한 응고 및 혈전 용해 프로파일로 인해 특히 관심있는 종입니다. 총 경동맥 (CCA)에 엘라스타제 소화 천골 동맥류가있는 여러 모델은 유동 조건, 기하학적 특징 및 벽 특성 9,10,11,12 측면에서 인간 두개 내 동맥류와 정 성적 및 정량적 유사성을 보였다. 이 연구는 동일한 동물에서 그루터기와 분기 엘라스타제 소화 동맥류가 모두 있는 새로운 토끼 동맥류 모델을 만드는 기술을 설명하는 것을 목표로 합니다. 수술 기술은 Hoh et al.13 및 Wanderer et al.14의 기술에서 영감을 받아 우수한 표준화 및 재현성을 제공하고 낮은 사망률 및 이환율을 보장하기 위해 약간 수정되었습니다.
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참고: 실험은 스위스 베른 주 동물 관리 지역 위원회(신청 번호 BE108/16)의 승인을 받았으며 모든 동물 관리 및 절차는 기관 지침 및 3R 원칙15,16에 따라 수행되었습니다. 데이터는 REACH 지침에 따라 보고됩니다. 수술 전후 관리는 보드 인증 수의사 마취 전문의가 수행했습니다. 이 연구를 위해 평균 체중이 4.0 (± 0.3) kg이고 평균 연령이 25 (±5) 주 인 암컷 뉴질랜드 흰 토끼는 22-24 ° C의 실온에서 12 시간의 명암 주기로 물, 펠릿 및 건초에 자유롭게 접근 할 수있었습니다.
1. 수술 전 단계 및 마취
2. 수술
3. 수술 후 단계
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그루터기와 분기 동맥류의 생성은 수술 중 합병증없이 5 마리의 뉴질랜드 흰 토끼 모두에서 성공적이었습니다. 수술 중 또는 24 ± 2 일의 추적 기간 동안 사망률은 관찰되지 않았다. 한 토끼는 전정 증후군과 오른쪽의 실명으로 수술 후 합병증을 경험했습니다. 동물은 24 시간 후에 완전하고 자발적으로 회복되었습니다. 이 합병증은 정상적인 활동 (자유로운 움직임, 물 및 음식 섭취, 다른 동물과의 상호 작용)을 방해하지 않았으며 특별한 치료가 필요하지 않았습니다. 자발적인 동맥류 파열은 없었습니다.
평균 수술 기간은 221분(190분에서 255분 사이)이었다. 모든 동맥류는 엘라스타제 배양과 즉각적인 혈전증으로 인해 극심한 조직 반응을 보인 분기 동맥류 1개를 제외하고 수술 직후 특허를 받았습니다. 추적 관찰에서 동맥류 개통은 자석 공명 혈관 조영술 (그림 3)과 조직 추출 후 거시적 검사 (...
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동맥류 생성을위한 가장 일반적인 기술은 개방 또는 혈관 내 방법을 통해 올바른 CCA의 기원에 그루터기 동맥류를 만드는 것입니다. 이 모델은 시간20,21로 열려 있는 안정적인 비성장 동맥류로 검증되었습니다. 두 번째 가능한 기술은 왼쪽의 오른쪽 CCA를 문합하고 분기 14,22,23에 동맥류 주머니를 봉합하여 동맥 분기 동맥류를 미세 수술로 만드는 것입니다. 두 방법 모두 혈관 내 장치의 테스트 및 병태 생리학 연구에 적합한 것으로 나타 났지만 동맥류 형태와 관련된 혈역학 적 힘 및 흐름 특성은 실질적으로 다릅니다. 기존 모델에서 동물 당 하나의 동맥류 유형 만 만들 수 있다는 점을 감안할 때, 분기 유형의 동맥류와 그루터기 유형의 동맥류의 자연 경과를 직접...
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저자는 이해 상충이 없음을 선언합니다.
저자는 Hans Rudolf Widmer 교수, Luca Remonda 박사 및 Javier Fandino교수의 과학적 지원과 기술적 기여에 감사드립니다. 절차 중 조언을 해준 Olgica Beslac과 도움을 준 Kay Nettelbeck에게 특별한 감사를드립니다. 또한 Daniela Casoni DVM, PhD 및 med. 수의사. Luisana Garcia, PD Alessandra Bergadano 박사 및 Carlotta Detotto 박사의 헌신적 인 수의사 지원.
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 4-0 흡수성 봉합 | Ethicon Inc., 미국 | VCP292ZH | |
| 4-0 흡수성 봉합 | Ethicon Inc., 미국 | VCP304H | |
| 6-0 비흡수성 봉합 | B. Braun, 독일 | C0766070 | |
| 9-0 비흡수성 봉합사 | B. Braun, 독일 | G1111140 | |
| 아드레날린 | 아미노 AG | 1445419 | 모든 일반 |
| Amiodarone | Helvepharm AG | 는 | 모든 일반 |
| 마취 기계 | Drä 5078567; ger | 기타 | |
| 아스피린 | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | 모든 일반 |
| Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | 모든 일반 |
| 대역 통과 필터 파란색 | Thorlabs | FD1B | 기타 |
| 모든 대역 통과 필터 녹색 | Thorlabs | FGV9 | 기타 |
| Biemer 혈관 클립 (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, 스위스 | FD560R | 기타 |
| 바이폴라 겸자 | 기타 | ||
| Bispectral 지수(신생아), | 기타 | ||
| 혈압 커프(신생아), | 기타 | ||
| Bycilces, 스포트라이트 | 다른 | ||
| Clamoxyl | GlaxoSmithKline, AG | 758808 | 모든 제네릭 |
| Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | 모든 일반 |
| 엘라스타제 | Sigma Aldrich | E7885 | |
| 심전도 전극 | |||
| Ephedrine | Amino AG | 1435734 | |
| Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | |
| Fentanyl (정맥 사용) | Janssen-Cilag AG | 98683 | |
| 펜타닐 (경피) | Mepha Pharma AG | 4008286 | |
| Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | |
| Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | |
| 가열 패드 또는 가열 강제 공기 온난화 시스템 | |||
| 아이소 톤 염화나트륨 용액 (0.9 %) | Fresenius KABI | 336769 | |
| 케타민 | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 342261 | |
| 뚜껑 견인 | Approach | ||
| Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | |
| Longuettes | |||
| Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | 약물 |
| 메타돈 | Streuli Pharma AG | 1084546 | Sedaton |
| 마이크로 펜치 곡선 | Ulrich 스위스, 스위스 | U52-015-15 | |
| 마이크로 펜치 스트레이트 2x | Ulrich 스위스, 스위스 | U52-010-15 | |
| 마이크로가위 | Ulrich 스위스, 스위스 | U52-327-15 | |
| Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | |
| 바늘 23 G | 동맥 절개 | ||
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| Yasargil titan 표준 클립(2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T |
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