방법 논문

고압 산소를 사용하여 인간 U251 신경교종 세포의 방사선 감도 개선

DOI:

10.3791/62769

⸱

2022년 10월 20일

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Radiotherapy, Second Hospital Affiliated to Lanzhou University, 2Department of Ultrasound, Second Hospital Affiliated to Lanzhou University, 3Department of Cardiology, Hubei Lichuan Dongfang Harmonious Hospital

* These authors contributed equally

이 논문에서

요약

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

이 프로토콜은 고압 산소가 G2/M 단계에서 세포를 차단하여 X선 조사로 처리된 U251 신경교종 세포의 증식 억제 및 세포사멸을 향상시킬 수 있음을 보여줍니다. 이는 인간 신경교종 세포주의 방사선 민감도를 향상시킵니다.

초록

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이 연구의 목적은 인간 신경교종 세포의 방사선 민감도를 향상시키기 위해 고압 산소를 사용하는 방법을 탐구하는 것이었습니다. 하위 배양된 U251 인간 신경교종 세포는 무작위로 처리되지 않은 대조군, 고압 산소(HBO)만 처리된 세포, X선 조사(X선)만 처리된 세포, HBO와 X선으로 모두 처리된 세포의 4개 그룹으로 무작위로 나뉘었습니다. 신경교종 세포의 방사선 민감도를 개선하는 데 있어 HBO의 역할을 평가하기 위해 이 그룹에서 세포 형태, 세포 증식 활성, 세포주기 분포 및 세포사멸을 관찰했습니다. X선 선량(0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy, 8 Gy)이 증가함에 따라 신경교종 세포의 생존율(SF)이 점차 감소했습니다.

HBO와 X-선을 함께 투여한 세포에서 각 용량에 대해 X-선 그룹보다 SF가 유의하게 낮게 관찰되었습니다(모두 P < 0.05). 증식 억제는 U251 세포주에 대한 각 용량(모두 P < 0.05)에 대해 X선군보다 X선군과 병용한 HBO에서 유의하게 높았다. G2/M상 세포의 비율은 대조군(11.56% ± 2.01%)과 X선(2 Gy) 그룹(10.35% ± 2.69%)(모두 P < 0.05)보다 X선(2 Gy) 그룹(26.70% ± 2.46%)과 HBO 그룹(22.36% ± 0.91%)과 병용한 HBO에서 유의하게 높았다. U251 세포사멸은 HBO군, X선(2Gy)군, 대조군(모두 P < 0.05)보다 X선(2 Gy)군과 병용한 HBO군에서 유의하게 높았다. 우리는 HBO가 G2/M 단계에서 신경교종 세포를 차단하여 U251 신경교종 세포의 증식 억제 및 세포사멸을 강화하고 U251 신경교종 세포의 방사선 감도를 향상시킬 수 있다고 결론지었습니다.

서론

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신경교종(gloma)은 중추신경계 신경교세포(glial cells)에서 유래하는 원발성 두개내 종양이다1. 현재 신경교종의 치료 전략은 방사선 요법 및 화학 요법과 결합된 수술입니다. 신경교종에 대한 수술 후 방사선 요법은 생존에 도움이 될 수 있으며(근거 등급 I), 수술 후 조기 방사선 요법은 환자의 생존을 효과적으로 연장할 수 있다(근거 등급 II)2. 높은 등급의 신경교종(grade III 또는 IV), 특히 고악성 및 침습성 교모세포종(grade III evidence evidence)3의 경우, 수술 후 방사선 요법은 가능한 한 빨리(<6주) 시행해야 한다. 그러나 조기 개입에도 불구하고 신경교종은 여전히 재발률이 높고 종합적인 치료 후에도 예후가 좋지 않습니다. 이러한 결과는 주로 신경교종의 낮은 방사선 민감도와 관련이 있습니다. 종양 방사선 민감도와 관련된 요인으로는 종양 세포, 저산소성 또는 비저산소성 종양 세포의 고유한 방사선 민감도, 저산소성 종양 세포의 비율, 방사선 손상을 복구하는 종양 주위 조직의 능력등이 있다 4.

이러한 요인 중 저산소성 또는 비저산소성 종양세포와 저산소성 종양세포의 비율은 종양의 방사선 민감도에 중요한 영향을 미친다. 고압 산소(HBO)는 조직 산소 장력과 혈액 산소 확산을 증가시켜 조직 산소 저장을 개선할 수 있습니다. HBO는 또한 일련의 유익한 생화학적, 세포학적, 생리학적 효과를 생성할 수 있습니다5. 예를 들어, HBO는 방사선 요법으로 인한 방사선 손상에 대해 뚜렷한 회복 효과가 있습니다. 방사선 요법 또는 화학요법과 HBO를 병용하면 신경교종6에 대한 방사선 요법 또는 화학요법의 임상적 효능이 개선되는 것으로 보고되었지만, HBO가 단독으로 악성 신경교종 성장에 어떤 영향을 미치는지에 대해서는 상당한 논란이 있습니다. Ding et al.7 및 Wang et al.8은 모두 HBO가 세포사멸 억제 및 종양 혈관 신생 촉진을 포함하는 메커니즘을 통해 마우스의 상피내 신경교종의 성장을 촉진한다는 것을 입증했습니다. 생리학적 조건에서 HBO는 산화 스트레스를 유발하여 종양 혈관 신생을 촉진하는 것으로 보고됨9.

그러나 한 연구에 따르면 HBO에 단기간 노출되면 종양세포 증식이 촉진되는 반면, 장기간 HBO에 노출되면 세포사멸이 촉진되고 증식이 억제된다고 한다10. 따라서 HBO가 신경교종의 성장을 촉진하거나 억제하는지, 그리고 HBO를 방사선 요법 또는 화학요법과 병용하면 어떻게 치료적 감작을 유도할 수 있는지 알아보기 위한 추가 연구가 필요하다. 특히, HBO가 신경교종의 방사선 민감도를 어떻게 개선하는지에 대한 기계론적 세부 사항이 필요합니다. 이 연구에서 HBO가 인간 U251 신경교종 세포의 방사선 민감도를 어떻게 개선하는지 알아보기 위해 신경교종 세포 증식에 대한 X선 조사와 결합된 HBO를 사용하고 세포주기 분포 및 세포사멸에 미치는 영향을 관찰했습니다.

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프로토콜

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모든 연구 방법은 란저우 대학 부속 제2병원의 기관 검토 위원회와 윤리 위원회의 승인을 받았으며 관련 지침 및 규정에 따라 수행되었습니다.

1. 신경교종 세포의 치료

참고: 이 실험에는 U251 신경교종 세포주가 사용되었습니다.

  1. U251 세포 배양
    1. 10% 소 태아 혈청(FBS)을 함유한 DMEM으로 여러 접시에 U251 세포를 시딩하고 5% CO2로 37°C에서 배양합니다.
    2. 50%-60% 농도에 도달하면 트립신-EDTA 용액(0.25%, 페놀 레드 없음)을 사용하여 세포를 해리한 다음 80% 농도까지 성장하도록 합니다.
  2. X선 조사
    1. 배양 플레이트 또는 플라스크를 최대 1cm 두께의 동등한 조직 보정기로 덮습니다. 그런 다음 소스 셀 거리가 100cm인 6MV 선형 가속기에서 전달되는 X선 조사에 세포를 노출시키고 원격 제어 보드의 회전 버튼을 클릭하여 조정합니다.
    2. 물리학자가 방사선량을 측정하고 감쇠를 수정하도록 합니다. 대조군으로, X선 조사 전에 매체가 들어 있는 플라스크를 검출기에 놓습니다.
  3. 고압 산소(HBO)
    1. 자외선을 15분 동안 켠 다음 0.02MPa의 순수 산소를 5분 동안 주입하여 HBO 챔버를 소독합니다.
    2. 챔버 내의 플레이트 또는 배양 플라스크에 세포를 넣은 후 챔버 외부의 제어 보드에 있는 압력 조절기 버튼을 클릭하여 조사 후 30분 이내에 챔버의 HBO 압력을 0.2MPa(2.0 ATA)로 높입니다.
    3. 30분 후 압력 조절기 버튼을 클릭하여 HBO 압력을 이전 압력 수준(0.1MPpa)으로 낮춥니다. 그런 다음 배양 병이나 플레이트를 3일 연속으로 하루에 1회 HBO로 처리합니다.

2. 다른 그룹의 U251 신경교종 세포

  1. 세포 성장 곡선을 계산하기 위해 대조군, X선(2 Gy) 그룹, X선(2 Gy) 그룹과 결합된 HBO를 설정합니다.
  2. 최대 성장률을 보이는 신경교종 U251 세포로부터 단일 세포 현탁액을 준비합니다(1.1.2단계 참조). 혈구계 슬라이드를 사용하여 세포를 계수하여 세포 밀도를 1 × 106/mL로 조정합니다. 그런 다음 세포 현탁액 1mL를 각 그룹에 대해 3개의 별도 병이 있는 배양 병(세포 밀도: 1 × 106/병)에 추가합니다.
  3. 명시야 현미경으로 100배 배율에서 세포 형태를 평가하여 24시간, 48시간 및 72시간 배양에서 부착 세포를 열거합니다.

3. HBO 후 30분 이내 U251 신경교종 세포의 방사선 민감도(클론 형성 분석)

  1. 6-웰 플레이트에서 5 × 102 cells/mL로 웰 전체에 U251 단일 세포 현탁액을 파딩한 다음 표시된 X선 조사량(0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy 및 8 Gy)에 노출시키고 각 X선 선량에 대해 3개의 병렬 샘플을 검사합니다.
  2. X선(2 Gy) 그룹과 결합된 HBO의 경우, HBO 치료 후 30분 이내에 세포를 X선 조사에 노출시킵니다. 처리 후 37 °C에서 5 % CO2 로 14 일 동안 세포를 배양한다.
  3. 클론이 보이면 배지를 제거하고 PBS로 클론을 2x 세척합니다.
  4. 1mL의 10% 메탄올에 세포를 15분 동안 고정한 후 1mL의 0.1% 크리스탈 바이올렛으로 20분 동안 염색합니다.
  5. 염색 후 피펫을 사용하여 6mL의 증류수로 세포를 세척한 후 결정 바이올렛 용액을 흡인합니다. 세포를 자연 건조시키십시오.
  6. 현미경으로 직경이 0.3mm에서 1.0mm 사이인 클론을 세어 클론당 >50개의 세포가 있는지 확인합니다.
  7. 방정식 (1)을 사용하여 생존 분율(SF)을 계산합니다.
    SF = figure-protocol-1 × 100% (1)
  8. 통계 소프트웨어를 사용하여 방정식 (2)를 사용하여 SHMT(Single-Hit Multitarget) 모델을 기반으로 방사선 선량-생존 곡선을 생성합니다.
    에스 = 1 - (1 - figure-protocol-2)엔 (2)
    여기서 S = 생존 확률; k = 평균 치사량(세포당 평균 1타를 유발하는 용량); x = 셀당 적중 횟수; N = 표적의 수(세포 사멸에 대한 적중 횟수).
  9. 평균 치사량(D0), 준역치 선량(Dq), 외삽 수(N), 방사선 조사량에서 생존율 2Gy(SF2), 감작 증진 비율(D0)(대조군에서 SER = D0 /실험군에서 D0 ) 및 SER(Dq)(대조군에서 SER = Dq/실험군에서 Dq)을 포함한 방사선 생물학적 매개변수를 계산하여 U251 신경교종 세포의 방사선 민감도에 대한 HBO의 영향을 평가합니다.
    여기서D0 = 생존 곡선의 선형 부분 기울기의 역수 값(생존율을 63% 감소시키는 선량)
    N = 세로좌표를 충족하기 위해 선형 부분을 외삽하여 형성된 교차점의 값(방사선으로 인한 손상을 복구할 수 있는 세포 능력을 반영함)
    Dq = 가로 좌표에서 1.0을 통과하는 선을 그리고 가로 좌표와 평행하게 외삽 선을 만나기 위해 가로 좌표에 평행하게 그려 형성된 교차점의 교차점 투영 지점의 값입니다.

4. U251 신경교종 세포 증식을 평가하기 위한 세포 계수 분석

  1. 대조군, HBO 그룹, X-ray 치료군(0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy, 8 Gy)을 단독으로 또는 HBO와 병용하여 설정합니다.
  2. 단일 세포 현탁액에서 U251 세포를 사용하여 세포 밀도를 1 × 104 cells/mL로 조정합니다.
  3. 세포 현탁액(100μL, 밀도: 1 × 103/well)을 96웰 플레이트(그룹당 5웰)에 파종합니다. 세포 계수 분석( Table of Materials(재료 표 참조)을 수행한 다음 시약으로 48시간 배양 후 마이크로플레이트 리더를 사용하여 450nm에서 광학 밀도(OD)를 측정합니다.
  4. 방정식 (3)에 따라 세포 증식 억제율(IR)을 계산합니다.
    IR = figure-protocol-3 × 100% (3)

5. U251 신경교종 세포의 세포사멸 검출

  1. 세트 제어, HBO, X선(2 Gy) 및 HBO와 X선(2 Gy) 그룹.
  2. 배양 후 배지를 제거하고 1x PBS로 세포를 세척합니다.
  3. 트립신으로 세포를 분리한 다음 현미경으로 둥근 세포 형태를 관찰할 때 DMEM을 추가하여 트립신을 비활성화합니다.
  4. 세포를 원심분리 튜브에 옮기고 200 × g으로 5분 동안 원심분리합니다.
  5. 상등액을 버리고 펠렛에 3mL의 1x PBS를 첨가한 다음 세포를 다시 현탁시키기 위해 부드럽게 피펫팅합니다.
  6. 200 × g 에서 5분 동안 세포를 다시 원심분리합니다. 그런 다음 상등액 PBS를 흡인하고 세포를 2회 세척한 후 50μL의 결합 완충액에서 부드러운 피펫팅으로 재현탁합니다.
  7. 4°C에서 세포에 5μL의 annexin V-FITC를 추가하고 400μL의 결합 완충액을 추가하기 전에 4°C의 암흑에서 15분 동안 세포를 배양합니다. 혼합물을 5μL의 프로피듐 요오드화물(PI) 염료 용액(10mg/mL)이 들어 있는 유세포 분석 튜브로 옮깁니다. 유세포분석법11로 5분 후 세포사멸세포(apoptotic cells)를 검출합니다.
  8. 488nm 여기파에서 적색 형광을 기록하고, 컴퓨터에 입력하여 5,000개 세포에서 각 세포 주기의 백분율을 분석한 다음, 자가사멸 세포의 피크를 인쇄합니다.
  9. Annexin V와 PI 두 배 레테르를 붙이기에 의하여 빨강과 녹색 형광을 모으고, 분석하기 위하여 컴퓨터에 그(것)들을 입력하고, 그 후에 점 추첨 자료를 인쇄하십시오.

6. U251 신경교종 세포주기 분포 검출

  1. 트립신으로 치료하기 전에 위에서 언급한 세포를 PBS 1mL로 2x 세척합니다.
  2. 광학 현미경으로 둥근 세포 형태가 감지되면 10% FBS가 포함된 DMEM을 추가합니다.
  3. 실온에서 200 × g 에서 5분 동안 세포를 원심분리합니다.
  4. 상층액을 제거하고 사전 냉각된 75% 에탄올 용액을 첨가하기 전에 1mL의 PBS에 이러한 세포를 재현탁합니다.
  5. 혼합물을 최소 4시간 동안 또는 -20°C에서 하룻밤 동안 배양합니다.
  6. 얼음처럼 차가운 PBS와 180μL의 EDTA(0.1mM, 3.7mg의 EDTA + 100mL의 PBS), 20μL의 RNase A(10mg/mL), 35μL의 Triton X-100(2%, 2mL의 Triton + 98mL의 FBS) 및 96.5μL의 PBS로 세포를 2x 세척합니다. 그런 다음 17.5μL의 PI 용액(1mg/mL)을 추가합니다.
  7. 혼합물을 4 ° C의 어두운 곳에서 10 분 동안 배양합니다.
  8. 200μL의 PBS에서 세포를 세척한 다음 유세포 분석기에 넣어 앞서 설명한 바와 같이 세포 주기 분포를 평가합니다(12).
  9. 22 μm x 66 μm 및 13 μm x 66 μm 스폿 크기의 듀얼 레이저, 3차원 공간, 여기 모드에서 유세포 분석기를 작동합니다. 430 μm x 180 μm, 300-1,100 nm 스펙트럼, ≤100 MESF 검출 가능성 및 CV <2% 분해능의 플로우 룸을 사용합니다. 그런 다음 세포를 488nm 여기광에 노출시키고 기기 소프트웨어로 형광 신호를 감지 및 측정하여 세포 주기 분포13을 결정합니다.
  10. DNA 함량을 결정한 다음 DNA 함량에 따라 세포주기를 분석합니다.

7. 통계 분석

  1. 통계 분석을 수행합니다.
  2. 데이터를 평균 ± 표준 편차로 제시합니다.
  3. 학생의 t-검정을 사용하여 통계적 유의성이 P < 0.05로 설정된 그룹을 비교합니다.

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결과

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U251 신경교종 세포의 배양
U251 신경교종 세포는 DMEM에서 배양 후 24시간 내지 48시간 후에 방추형 형태를 가졌으며 부착되었습니다. 이 세포는 추가 연구에 사용되었습니다(그림 1).

신경교종 세포 형태 및 개수
X-선(2 Gy)과 결합된 HBO의 U251 신경교종 세포에 대한 세포 수는 세포 배양 24시간, 48시간 및 72시간(모두 P < 0.05) 후 X-선(2 Gy) 그룹의 세포 수보다 유의하게 낮았습니다(표 1). 24시간 동안 배양했을 때, 대조군에서 처리되지 않은 U251 세포는 긴 방추 모양의 형태로 잘 자랐습니다. X선(2 Gy) 그룹에서는 U251 세포 밀도가 감소하여 소수의 부유 죽은 세포가 보였습니다. HBO와 X-ray(2 Gy) 그룹을 병용한 경우 세포 밀도가 감소하고 ...

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토론

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신경교종 세포주 U251은 가장 고전적인 인간 신경교종 세포주 중 하나이며 많은 연구에서 신경교종 모델로 널리 사용됩니다.

U251 신경교종 세포 증식에 대한 HBO의 효과
HBO는 일반적으로 정상 대기압보다 1.5-3배 높은 압력으로 밀폐된 챔버에서 순수한 산소(100% 산소 농도)를 호흡하는 것을 말하며, 이는 미세혈관 혈장에서 산소 함량을 증가시킬 수 있습니다14. 신경교종 환자의 경우, 방사선 요법 또는 화학요법과 HBO를 병행하면 이러한 치료의 임상적 효능이 증가하는 것으로 보고되었습니다. 중추신경계 신생물이 있는 소아 또는 청소년의 경우, HBO와 방사선 요법을 병행하면 임상 증상과 종양 영상 결과를 개선할 수 있습니다. HBO의 적용은 안전하지만6, HBO 단독이 악성 신경교종 성장에 미...

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공개 사항

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

저자는 선언할 이해 상충이 없습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
바인딩 버퍼   Dickinson and CompanyRH10 9RR
CCK-8 테스트 키트 도진도 NJ세포 계수 분석
CELL FIT 세포주기 분석(DNA 함량)
CELLQUEST세포사멸 세포 분석
DMEM 및 Annexin V-FITCGibco BRL
유세포 분석기Dickinson
Glioma U251 및 U87 세포주Shanghai Institute of Cell Biology
고압 산소 챔버Hongyuan Institute
의료 선형 가속기Elekta Limited Company
마이크로플레이트 리더
MOD FITLT formac v1.01 세포 분석--세포 주기
단계 트립신Hyclone Laboratories 
주식회사

참고문헌

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Louis, D. N., et al. The 2016 World Health Organization Classification the Central Nervous System: A summary. Acta Neuropathologica. 131 (6), 803-820 (2016).
  2. Sun, M. Z., et al. Survival impact of time to initiation of chemoradiotherapy after resection of newly diagnosed glioblastoma. Journal of Neurosurgery. 122 (5), 1144-1150 (2015).
  3. Hegi, M. E., et al. MGMT gene silencing and benefit from temoozolomide in glioblastoma. New England Journal of Medicine. 352 (10), 997-1003 (2005).
  4. Zhu, Y., et al. Involvement of decreased hypoxia-inducible factor 1 activity and resultant G1-S cell cycle transition in radioresistance of perinecrotic tumor cells. Oncogene. 32 (16), 2058-2068 (2013).
  5. Kohshi, K., et al. Potential roles of hyperbaric oxygenation in the treatments of brain tumors. Undersea and Hyperbaric Medicine. 40 (4), 351-362 (2013).
  6. Aghajan, Y., Grover, I., Gorsi, H., Tumblin, M., Crawford, J. R. Use of hyperbaric oxygen therapy in pediatric neuro-oncology: a single institutional experience. Journal Neurooncology. 141 (1), 151-158 (2019).
  7. Ding, J. B., Chen, J. R., Xu, H. Z., Qin, Z. Y. Effect of hyperbaric oxygen on the growth of intracranial glioma in rats. Chinese Medical Journal. 128 (23), 3197-3203 (2015).
  8. Wang, Y. G., et al. Hyperbaric oxygen promotes malignant glioma cell growth and inhibits cell apoptosis. Oncology Letters. 10 (1), 189-195 (2015).
  9. Milovanova, T. N., et al. Hyperbaric oxygen stimulates vasculogenic stem cell growth and differentiation in vivo. Journal of Applied Physiology. 106 (2), 711-728 (2009).
  10. Conconi, M. T., et al. Effects of hyperbaric oxygen on proliferative and apoptotic activities and reactive oxygen species generation in mouse fibroblast 3T3/J2 cell line. Journal of Investigative Medicine. 51 (4), 227-232 (2003).
  11. Vermes, I., Haanen, C., Steffiens-Nakken, H., Reutellingsperger, C. A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on early apoptotic cells using fluorescein labelled Annexin V. Journal of Immunological Methods. 184 (1), 39-51 (1995).
  12. Cui, W., Niu, F. -L., He, L. -Y., W, S. -R. Comparison of two softwares for analysing apoptosis with flow cytometry. Journal of Beijing University of Traditional Chinese Medicine. 24 (6), 45-47 (2001).
  13. Cecchini, M. J., Amiri, M., Dick, F. A. Analysis of cell cycle position in mammalian cells. Journal of Visualized Experiments. (59), e3491(2012).
  14. Resanovic, I., et al. Effects of hyperbaric oxygen on inducible nitric oxide synthase activity/expression in lymphocytes of type 1 diabetes patients: A prospective pilot study. International Journal of Endocrinology. 2019, 2328505(2019).
  15. Stuhr, L. E., et al. Hyperoxia retards growth and induces apoptosis, changes in vascular density and gene expression in transplanted gliomas in nude rats. Journal of Neuro-Oncology. 85 (2), 191-202 (2007).
  16. Biollaz, G., et al. Site-specific anti-tumor immunity: differences in DC function, TGF-beta production and numbers of intratumoral Foxp3+ Treg. European Journal of Immunology. 39 (5), 1323-1333 (2009).
  17. McKenna, F. W., Ahmad, S. Fitting techniques of cell survival curves in high-dose region for use in stereotactic body radiation therapy. Physics in Medicine and Biology. 54 (6), 1593-1608 (2009).
  18. Malaise, E. P., Lambin, P., Joiner, M. C. Radiosensitivity of human cell lines to small doses. Are there some clinical implications. Radiation Research. 138, S25-S27 (1994).
  19. Björk-Eriksson, T., West, C., Karlsson, E., Mercke, C. Tumor radiosensitivity (SF2) is a prognostic factor for local control in head and neck cancers. International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 46 (1), 13-19 (2000).
  20. Bromfield, G. P., Meng, A., Warde, P., Bristow, R. G. Cell death in irradiated prostate epithelial cells: Role of apoptotic and clonogenic cell kill. Prostate Cancer and Prostatic Diseases. 6 (1), 73-85 (2003).
  21. Kalns, J. E., Piepmeier, E. H. Exposure to hyperbaric oxygen induces cell cycle perturbation in prostate cancer cells. In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal. 35 (2), 98-101 (1999).
  22. Lakka, S. S., et al. Inhibition of cathepsin B and MMP-9 gene expression in glioblastoma cell line via RNA interference reduces tumor cell invasion, tumor growth and angiogenesis. Oncogene. 23 (27), 4681-4689 (2004).
  23. Li, S., Shi, D., Zhang, L., Yang, F., Cheng, G. Oridonin enhances the radiosensitivity of lung cancer cells by upregulating Bax and downregulating Bcl-2. Experimental and Therapeutic Medicine. 16 (6), 4859-4864 (2018).
  24. Campbell, K. J., Tait, S. W. G. Targeting BCL-2 regulated apoptosis in cancer. Open Biology. 8 (5), 180002(2018).
  25. Rengarajan, T., et al. D-pinitol promotes apoptosis in MCF-7 cells via induction of p53 and Bax and inhibition of Bcl-2 and NF-κB. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention. 15 (4), 1757-1762 (2014).
  26. Shinagawa, A., et al. The potent peptide antagonist to angiogenesis, C16Y and cisplatin act synergistically in the down-regulation of the Bcl-2/Bax ratio and the induction of apoptosis in human ovarian cancer cells. International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 39 (6), 135-164 (2011).

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