화상 부상으로 인한 통증과 생쥐의 우울증과 같은 행동

요약

한쪽 뒷발의 일시적인 스컬드 손상(65°C ± 0.5°C, 3초)은 동측성 측면의 폰 프레이 필라멘트 자극으로 역치(g)를 감소시키고 보행 패턴을 변경한다. 게다가, 화상 부상은 강제 수영 테스트에서 우울증과 같은 행동을 유도합니다.

초록

물을 돋우는 것은 노인과 젊은 인구 모두에서 화상 부상의 가장 흔한 원인입니다. 그것은 저소득 및 중산층 국가에서 높은 사망률과 후유증으로 인해 주요 임상 과제 중 하나입니다. 화상은 종종 강렬한 자발적인 통증과 지속적인 이질통뿐만 아니라 생명을 위협하는 문제를 유발합니다. 더 중요한 것은, 과도한 통증은 종종 삶의 질을 크게 떨어 뜨릴 수있는 우울증을 동반합니다. 이 기사에서는 화상으로 인한 통증과 우울증과 같은 행동에 대한 연구를위한 동물 모델을 개발하는 방법을 보여줍니다. 마취 후, 화상 손상은 마우스의 한쪽 뒷발을 3초 동안 온수(65°C± 0.5°C)에 침지함으로써 유도하였다. 폰 프레이 테스트 및 자동 보행 분석은 화상 손상 후 2일마다 수행되었다. 또한, 강제 수영 테스트를 이용하여 우울증 유사 행동을 검사하고, 화상 부상 후 비정상적인 운동 기능을 구별하기 위해 로타로드 테스트를 실시하였다. 이 연구의 주요 목적은 마우스에서 화상 부상으로 인한 통증 및 우울증과 같은 행동을 연구하기위한 동물 모델의 개발을 설명하는 것입니다.

서론

화상 및 외상과 같은 조직 손상은 일반적으로 급성 통증의 동시 발생과 관련이 있습니다. 화상 부상 및 외상 관련 증상은 매년 1,80,000명의 사망자가 화상으로 인한 것으로 추정되며, 대다수는 다양한 유형의 화상으로부터 저소득 및 중산층 국가에서 발생한다¹. 전 세계 보고서에 따르면 화상은 어린이에게서 흔하며 입원 환자 ^2,3의 약 40 % -60 %를 차지합니다. 이러한 특정 부상은 끓이거나 목욕하는 물 ^4,5와 같은 일상 생활에서 발생할 수 있으므로 더욱 심각합니다. 급성 통증은 대부분의 경우 조직 손상으로부터 회복 된 후 자발적으로 해결 될 수 있지만, 신경계의 비정상적인 변화로 인해 만성화 될 수 있습니다 ^6,7.

최근에는 급성 통증이 우울한 기분을 유발할 수 있으며 만성 통증은 불안과 우울증을 유발할 수 있다고 제안되었습니다 8,9,10....

프로토콜

모든 실험 프로토콜은 한국 충남대학교 기관동물관리이용위원회에서 검토 및 승인한 후 국제통증연구협회(International Association for the Study of Pain)¹⁸의 윤리지침에 따라 실시하였다.

1. 뒷발에 스케일링 화상 부상의 유도

1. 체중 20-25 g의 수컷 ICR 마우스를 습도 40%-60%의 빛과 온도 조절된 방(12/12 h 광암주기, 22.5°C ± 2.5°C)에 보관한다.
   참고: 수컷과 암컷 마우스 모두 이 프로토콜에 사용할 수 있습니다.
2. 동물이 음식과 물에 자유롭게 접근 할 수있게하고 실험을 시작하기 전에 적어도 1 주 동안 순응하십시오.
   주: 모든 동물은 격리 스트레스와 같은 변수를 배제하기 위해 집단 수용되었다.
3. 마우스를 실험 또는 대조군에 무작위로 할당하고 동물 번호를 코드로 사용하여 맹검 실험을 수행하십시오.
4. 화상 유도 당일, 100 mg / kg의 용량으로 300 μL의 alfaxalone 주사를 복강 내 (i.p.) 주사하여 마우스를 마취하십시오. 화상 유도를 수행하는 동안 수술 가운, 장갑 및 마스크를 착용하십시오.
5. 마우스....

결과

동물의 고통을 최소화하고 Three Rs (대체, 감소 및 정제) 지침에 따라 사용되는 동물의 수를 줄이기 위해,이 연구는 예비 실험을 통해 확립 된 중요한 데이터의 수집을위한 최소 수의 동물로 설계되었습니다. 본 연구에서, 행동 실험은 독립적으로 다음과 같이 두 번 수행되었다. 보행 분석, 기계적 동종 다량체 및 우울증 유사 행동 시험을 대조군 (n = 5), 화상 (n = 7; 비히클 대조군; 식염수) 및 화상 + 아세트 아미노펜 (n = 7) 그룹으로 수행하였다. 로타로드 시험에서, 대조군 (n=3), 화상 (n=4; 비히클 대조군; 식염수), 화상 + 아세트아미노펜 (n=4), 양성 대조군 (n=4; Alfaxalone) 그룹이 설계되었다. Alfaxalone은 현재 수의학에서 주사 가능한 전신 마취 유도제로 사용되는 신경 활성 스테로이드 및 마취제의 일종입니다. 이 연구에서, alfaxalone은 화상 유도를 위한 동물 마취에 사용되었고, 로타-로드 시험에서 운동 장애에 대한 양성 대조군 약물로 사용되었다.

토론

스케일링 화상은 가열 된 액체에 의해 발생하는 열 화상의 일종입니다. 대부분의 경우 첫 번째 또는 두 번째 정도의 화상이 발생하지만 열원과의 장기간 접촉으로 인해 세 번째 정도의 화상이 발생할 수 있다고 제안되었습니다²⁶. 본 연구에서, 화상 손상은 마우스의 오른쪽 뒷발을 3초^동안 65°C에서 뜨거운 물에 노출시켜 ^4,26을 유도하였다. 화상 손상 발에서 조직 손상이 검출되었으며, 이는 발적, 피부 벗겨짐 및 붓기와 같은 화상의 일반적인 증상을 보여줍니다 (보충 그림 1)⁴.

기계적 이질통 측정은 동물 통증 모델에서 일반적으로 사용되는 통증 반응 식별 방법이며, 본 연구에서 von-Frey 필라멘트를 사용하여 측정되었다. 폰 프레이 필라멘트를 사용한 오름차순 자.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
1 mL 주사기	BD	307809
1.5 mL 튜브	Axygen	MCT-150-C
50 mL 튜브	SPL	50050
아세트아미노펜 BioXtra, ≥ 99.0%	Sigma-Aldrich	A7085-100G	이 진통제는 양성 대조군으로 사용됩니다.
Alfaxan multidose (Alfaxalone)	JUROX Pty.Limited		본 실험에서 이 물질은 동물 마취에 사용되었으며, rota-rod test에서 실험적으로 처리된 약물에 대한 양성 대조군으로 사용되었습니다.
CatWalk 자동 보행 분석 시스템	Noldus	CatWalk XT	보행 분석은 감각 운동 기능 장애가 있는 모델의 사지 움직임 및 위치 변화를 연구하는 데 사용됩니다
OPTISHIELD(Cyclosporin ophthalmic ointment)	Ashish Life Science		이 물질은 마취 유도 후 각막 건조를 방지하기 위한 연고로 사용되었습니다.
플렉시글라스 실린더	SCITECH KOREA	강제 수영 테스트에 사용되는	맞춤형 제품
Rota-rod system	SCITECH KOREA	가속 로타로드	Motor Function
von Frey 필라멘트	North Coast Medical	NC12775	Mechanical Allodynia
Waterbath	CHANGSHIN SCIENCE C-WBE		화상 부상 유도에 사용

Normal 측정에 사용 측정에 사용