질 세척을 활용한 설치류 에스트로우스 사이클 모니터링 : 정상주기와 같은 것은 없습니다.

요약

이 연구는 암컷 쥐와 관련된 실험 설계에서 고려해야 할 중요한 요소를 자세히 설명합니다. 더 큰 의미에서 이러한 데이터는 낙인을 줄이고 더 포괄적 인 진단 및 개입 도구의 개발을 돕는 역할을합니다.

초록

현재의 방법론은 여성 Sprague Dawley (SD) 청소년 쥐의 발정주기를 모니터링하기위한 재현 가능하고 표준화되고 비용 효율적인 접근법을 수립합니다. 이 연구는 호르몬주기의 복잡성과 신뢰할 수 있고 유효한 모니터링 기술을 구축하는 데 필요한 광범위한 이해를 보여줍니다. 주요 실험 설계 및 절차 요소에 대한 심층적 인 검토를 통해주기와 기본 원칙에 대한 이러한 설명은 향후 복제에 대한 오해를 더 깊이 이해하고 해체하기위한 틀을 제공합니다.

질 세척을 사용하는 샘플 수집 프로세스의 개요와 함께이 절차는 proestrus, estrus, metestrus 및 diestrus의 네 단계 모델로 데이터 분류 메커니즘을 설명합니다. 이러한 단계는 질액 상태, 존재하는 세포 유형, 세포 배열 및 수집시의 세포량의 4 가지 분류 결정 요인을 활용하는 새로운 제안 된 접근법을 특징으로합니다. 각 단계의 변형, 호의적이고 불리한 샘플, 순환성과 비순환성의 구별, 수집 된 분류 구성 요소의 그래픽 묘사는 데이터의 효과적인 해석 및 조직 관행과 함께 제시됩니다. 전반적으로 이러한 도구를 사용하면 처음으로 정량화 가능한 데이터 범위를 게시할 수 있으므로 복제 시 범주화 요소가 표준화됩니다.

서론

새로운 기여
설치류 발정주기는 건강의 필수 지표로 확인되었습니다. 그러나 조사관의 무의식적 인 편견과 여성의 신체에 관한 부정확 한 해석은 과학계를 방해합니다. "estrous"라는 단어의 어원은 열등감과 부정감을 의미합니다. Euripides는이 용어를 사용하여 "광란"또는 광기를 묘사하고, 호머는 공황을 묘사하고, 플라톤은 비합리적인 드라이브를 묘사했습니다. 이 연구는 이러한 원시적 관점이 현재 과학계에 어떻게 영향을 미치는지 강조하고 이전에 연구 된 방법의 업데이트 된 조합 인 새로운 모자이크 패러다임을 통해보다 포괄적 인 접근 방식을 위해 범위를 확대 한 새로운 모자이크 패러다임을 통해 이러한 우려를 해결합니다.

표준화되고 포괄적 인 모니터링 기술이 없기 때문에이 기술의 연구와 사용이 필요하며 데이터 해석 관행이 불분명 할 수 있습니다. 둘째, 에스트로우스 사이클 특성은 연구되는 개별 쥐에 의존하지만, 종종 보편화됩니다. 셋째, 호르몬 순환은 일상적이고 유익한 과정이지만 '인간으로의 번역'섹션에서 탐구 된 위험한 낙인으로 둘러싸여 있습니다. 이 연구는 (A) 심층적 인 에스트로 사이클 모니터링 기술을 설명하고 결과를 해석 할 수있는 방법을 명확히하고, (B) 각 사이클의 무결성과 개성을 유지하는 방법....

프로토콜

이 프로토콜에 설명 된 모든 취급 및 절차 방법은 NIH (National Institutes of Health) 동물 관리 및 사용 지침과 일치하며 Pepperdine University의 IACUC (Institutional Animal Care and Use Committee) 및 UCLA Chancellor 's Animal Research Committee (ARC)의 승인을 받았습니다.

1. 동물 관리 및 사용

1. 암컷 래트를 전력 분석에 따른 숫자로 획득하고, 수컷 래트를 획득하여 휘튼 효과 또는 보다 일관된 사이클링⁽⁴⁶)을 촉진시킨다. 공지된 데이터베이스⁽⁴⁷)에서 연구의 목적에 기초하여 변형을 결정한다.
   참고 : 현재 데이터는 공동 연구의 일환으로 Pepperdine University와 UCLA 실험실에 위치한 남성 SD 쥐가있는 여성 청소년 SD 국제 유전 표준화 프로그램 (IGS)의 데이터를 반영합니다. 이들 래트는 생후 28일에 별개의 그룹에 도착하였고, 발정주기 진행을 10일 또는 20일 동안 모니터링하여, 생후 34일(7일간의 순응 기간 후)부터 급성 및 만성 수준에 대한 차이를 입증하였다.
2. ....

결과

현재의 데이터는 남성 SD 쥐가있는 여성 청소년 SD 국제 유전 표준화 프로그램 (IGS)의 데이터를 반영합니다. 이 동물들은 공동 연구의 일환으로 페퍼딘 대학과 UCLA 실험실에 위치했다. 그림 5는 4 사이클 단계의 여러 변형을 보여줍니다. 도 5A1은 여러 세포 유형이 존재하는 디스트러스 샘플로서 확인되었다. 이 예는 더 많은 수의 상피 세포를 가진 샘플이 LEU의 우세와 같은 다른 분류 성분 자격을 충족할 때 디스트러스로 인정된다는 것을 보여줍니다. 이 샘플은 또한이 단계에서 종종 볼 수있는 LEU로 구성된 점액 가닥 배열을 입증했으며, 이는 PRO 단계에서 볼 수있는 SNE 세포로 구성된 가닥과 유사합니다. DIE 단계의 점액 가닥과 SNE 세포로 구성된 PRO 단계에서 나타나는 가닥을 구별하려면 LEU의 우세를 확인하는 것이 중요합니다. 도 5A.......

토론

주요 단계 및 중요한 고려 사항
제공된 프로토콜의 특정 중요한 단계는 특히 질 세포 수집 내에서 강조가 필요합니다. 질액 추출 중에 주사기 삽입의 적절한 각도와 깊이를 보장하는 것이 만족스러운 결과를 산출하고 궁극적으로 동물에 대한 자극, 부상 또는 자궁 경부 자극을 예방하는 열쇠입니다. 자궁 경부의 자극은 백혈구 전용 질 도말 (11)의 12-14 일로 표시된 의사 임신 유도의 한 원인이 될 수^{있습니다.} 현미경 평가 단계에서 수집 된 질 세포를 표시하는 시각적 평면에 초점을 맞추는 것이 중요합니다. 이것은 하나 또는 두 개의 셀을 식별하고 초점이 달성 될 때까지 시각화를 조정하여 완료됩니다.

그 후, 스테이징을 위한 질 세포의 대표적인 이미지를 캡처하는 것은 현미경 슬라이드의 전체를 스캔함으로써 발생한다. 이렇게하면 캡처 된 이미지가 동물의 질 운하에서 수집되고 존재하는 것을 정확하게 묘사 할 수 있.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
AmScope 40X-1000X LED 학생 현미경 + 5MP USB 카메라	AmScope	부품 번호: M150C-E5 EAN: 0608729747796 모델 번호: M150C-E5	https://www.amazon.com/AmScope-40X-1000X-Student-Microscope-Camera/dp/B00O9GNOTA/ref=sr_1_15?crid=2W9CHTG8YSOTV& keywords=usb+camera+for+현미경& 앰프; qid=1572477663& 앰프; s=industrial & 앰프; sprefix=USB+카메라+for+micr%2Cindustrial%2C177& 앰프; sr=1-15
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Corning™ 직사각형 커버 안경	Fischer Scientific	12-553-464
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