Method Article

망막병증의 마우스 모델에 대한 광학 간섭 단층 촬영의 적용

DOI:

10.3791/63421

⸱

January 12th, 2022

 ,  ,  ,  , 
1Joint Shantou International Eye Center, Shantou University and the Chinese University of Hong Kong, 2Shantou University Medical College, 3Department of Ophthalmology and Visual Sciences, the Chinese University of Hong Kong

In This Article

Summary

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여기에서는 마우스에서 망막병증의 진단 및 정량적 측정을 용이하게 하기 위해 광학 간섭 단층 촬영을 사용하는 생체 내 이미징 기술에 대해 설명합니다.

Abstract

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광학 간섭 단층 촬영 (OCT)은 망막 병증 진단을위한 비 침습적 방법을 제공합니다. OCT 기계는 망막 두께를 계산할 수 있는 망막 단면 이미지를 캡처할 수 있습니다. OCT는 임상 실습에서 널리 사용되지만 기초 연구에서의 적용은 특히 생쥐와 같은 작은 동물에서 널리 퍼지지 않습니다. 안구의 크기가 작기 때문에 생쥐에서 안저 영상 검사를 수행하는 것이 어렵습니다. 따라서 작은 동물에 대한 OCT 영상을 수용하기 위해서는 특수 망막 영상 시스템이 필요합니다. 이 기사에서는 OCT 검사 절차를 위한 작은 동물 전용 시스템과 이미지 분석을 위한 자세한 방법을 보여줍니다. 초저밀도 지단백질 수용체(Vldlr) 녹아웃 마우스와 C57BL/6J 마우스의 망막 OCT 검사 결과가 제시됩니다. C57BL/6J 마우스의 OCT 이미지는 망막층을 나타낸 반면, Vldlr 녹아웃 마우스의 이미지는 망막하 신생혈관하 및 망막 얇아짐을 보여주었습니다. 요약하면, OCT 검사는 마우스 모델에서 망막병증의 비침습적 검출 및 측정을 용이하게 할 수 있습니다.

Introduction

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광학 간섭 단층 촬영 (OCT)은 조직 1,2,3,4,5,6,7,8, 특히 망막 9,10,11,12의 비 침습적 검사를 위해 생체 내 고해상도 및 단면 이미징을 제공 할 수있는 이미징 기술입니다. . 또한 망막 두께 및 망막 신경 섬유 층 두께와 같은 몇 가지 중요한 바이오 마커를 정량화하는 데 사용할 수 있습니다. OCT의 원리는 샘플로부터 반사된 빛의 일관성으로부터 단면 조직 정보를 획득하고 컴퓨터 시스템(7)을 통해 그래픽 또는....

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Protocol

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수술은 시력 및 안과 연구 협회의 안과 및 시력 연구에서 동물 사용에 관한 성명서에 따라 수행되었습니다. 실험 설계는 기관 동물 윤리위원회 (JSIEC의 의료 윤리위원회, EC 20171213 (4) -P01))의 승인을 받았습니다. 2개월 된 C57BL/6J 마우스와 Vldlr 녹아웃 마우스를 본 연구에 사용하였다. 각 그룹에는 7마리의 마우스가 있었고, 모두 암컷이었고 무게는 20g 내지 24g이었다.

1. 실험 조건

  1. 마우스를 Vldlr 녹아웃 마우스로 구성된 실험군과 C57BL/6J 마우스로 구성된 대조군의 두 그룹에 할당합니다.
  2. 생쥐에게 음식과 물을 전통적으로 먹이십시오.
  3. 동물 실험실에서 실온(22°C), 습도(50-60%), 명암주기(12h-12h) 및 실내광 강도(350-400lux)의 안정적인 조건에서 마우스를 키웁니다.
  4. 실험 장비 준비 : 작은 동물을위한 컨 포칼 스캐닝 레이저 검안경 (cSLO)을 사용한 광학 간섭 단층 촬영 (그림 1A).
  5. 실험에 필요한 모든 물질을 준비하고(도 1B) 마우스의 무게를....

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Results

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OCT의 고해상도 스캔 덕분에 마우스 망막의 층을 관찰하고 비정상적인 반사와 정확한 위치를 식별할 수 있습니다. Vldlr 녹아웃 마우스와 C57BL/6J 마우스의 망막 OCT 이미지를 이 연구에서 비교했습니다. 모든 C57BL/6J 마우스의 OCT 이미지는 반사율이 다른 다양한 망막층을 보여주었고 경계가 명확했습니다(그림 8D). 대조적으로, 모든 Vldlr 녹아웃 마우스는 OCT 이미지에서 비정상적이고 과반사성 병변을 나타냈다(도 8B).

Vldlr 녹아웃 마우스의 불완전 유리체 박리 (PVD)

OCT 결과는 Vldlr 녹아웃 마우스의 망막 표면에서 일부 중간 반사 .......

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Discussion

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이 연구에서는 불완전한 후방 유리체 박리, 망막 신생 혈관 및 망막 두께 얇아짐을 나타내는 Vldlr 녹아웃 마우스의 망막 변화를 평가하기 위해 작은 동물 망막 영상 시스템을 사용한 OCT 영상을 적용했습니다. OCT는 생체 내에서 망막의 상태를 검사하는 비침습적 영상 방법입니다. 대부분의 OCT 장치는 사람의 눈 검사용으로 설계되었습니다. 하드웨어 장비의 크기, 초점 거리 설정, 시스템 매개 변수 설정 및 수험자의 위치 요구 사항은 모두 사람의 눈을 기반으로합니다. 인간 전용 OCT 장비로 작은 동물을 검사하려면 렌즈 및 시스템 설정을 수정해야 합니다. 이 논문은 작은 동물 OCT 검사 절차를 제시합니다.

초점 거리는 안구의 크기가 다른 다른 작은 동물의 이미지 스캔 중에 다릅니다. 이러한 초점 거리의 차이는 매우 중요하며 명확하고 정확한 안저 이미지를 얻으려면 해결해야 합니다. 한 가지 효과적인 방법은 대물 렌즈를 다른 곡률의 렌즈로 교체하는 .......

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Disclosures

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저자는 잠재적 인 이해 상충이 없음을 선언합니다.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

프로젝트 출처 : 광동성 자연 과학 재단 (2018A0303130306). 저자는 안과 연구소, 산 터우 대학의 산 터우 국제 안과 센터 및 홍콩 중문 대학에 자금과 자료에 감사드립니다.

....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
100-Dpt 콘택트렌즈Volk Optical,Inc, Mentor, OHRETImap
이중 비구면 60-Dpt 유리 렌즈Volk Optical,Inc, Mentor, OH속하는 액세서리 RETImap
전기 가열 담요POPOCOLACW-DRT-0150 x 35cm
주입 주사기(1mL)Kaile0.45 x 16RWLB
Levofloxacin Hydrochloride Eye GelEBE PHARMACEUTICAL Co.LTD5 g: 0.015 g
의료용 히알루론산 나트륨 젤Alcon16H01E
마이크로리터 주사기상하이 높은 비둘기 산업 및 무역 Co., LTDQ31/0113000236C001-201750 µ L
포비돈 요오드 용액Guangdong medihealth pharmaceutical Co., LTD100 mL
RETImapROLAND CONSULT19-99_50-2.1_1.2EcSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP
작은 동물 귀 스터드OSMO POCKET OT110INS1005-1S
트로피카미드 페닐에프린 안약Santen Pharmaceutical Co., LTD5 mg/mL
자일라진시그마X1251-5G5g
졸레틸 50Virbac.S.A7FRPA틸레타민 125mg + 졸라제팜 125mg
에

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Frombach, J., et al. Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers. Pharmaceutics. 12 (9), 862(2020).
  2. Osiac, E., Săftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R.

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Optical Coherence TomographyMouse Retinopathy ModelRetinal Thickness MeasurementRetinal Cross Section ImagingSubretinal NeovascularizationRetinal Layer AnalysisSmall Animal ImagingVldlr Knockout MiceFundus ImagingNoninvasive Retinal Imaging

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