이 프로토콜은 전신 염증 반응 증후군, 허혈 / 재관류 손상, 산화 스트레스, 신경 염증 등을 조사하는 데 적용될 수있는 쥐에서 심부 저체온 순환 정지의 확립을 제시합니다.
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이 논문에서
요약
초록
심부 저체온 순환 정지 (DHCA)는 복잡한 선천성 심장 질환 및 대동맥 궁 질환의 수술 중에 일상적으로 적용됩니다. 본 연구는 래트에서 DHCA를 확립하는 방법을 제공하는 것을 목표로 한다. 활력 징후에 대한 DHCA 과정의 영향을 평가하기 위해 순환 정지가 없는 정상 온도 심폐 우회(CPB) 쥐 모델을 대조군으로 사용했습니다. 예상대로 DHCA는 체온과 평균 동맥 혈압을 크게 감소시켰습니다. 혈액 가스 분석 결과 DHCA는 젖산 수치를 증가 시켰지만 혈액 pH와 헤모글로빈, 헤마토크릿, Na+, Cl-, K + 및 포도당 농도에는 영향을 미치지 않았습니다. 또한, 상온 CPB 래트와 비교하여 투과 전자 현미경의 결과는 DHCA 래트에서 해마 자가포식소체의 경미한 증가를 보여주었습니다.
서론
심부 저체온 순환 정지 (DHCA)는 1953 년부터 심장 수술에 사용되었습니다1. DHCA는 신체의 혈류를 전 세계적으로 차단하기 전에 환자의 심부 온도를 심히 저체온 수준(15-22°C)으로 낮추는 것을포함합니다2. 순환 정지는 상대적으로 무혈 수술장을 제공 할 수 있습니다. 깊은 저체온증은 특히 뇌와 심근에서 신진 대사를 감소 시키며, 이는 허혈에 대한 효과적인 보호 방법입니다3. DHCA는 일반적으로 복잡한 선천성 심장 질환, 대동맥 궁 질환, 심지어 대정맥혈전 4,5가 있는 신장 또는 부신 종양에 대한 수술 중에 적용됩니다. 따라서 DHCA 동물 모델을 확립하는 것은 임상 환경에서 절차의 개선과 합병증 예방에 중요한 참고 자료를 제공합니다.
개6, 토끼7 및 기타 동물로 모델을 설정할 수 있지만 조작성과 저렴한 비용 때문에 쥐를 사용하는 것이 바람직합니다. DHCA 래트 모델은 2006년 Jungwi....
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프로토콜
이 프로토콜은 기관 검토를 거쳐 중국 의학원 후와이 병원 기관 동물 관리 및 사용 위원회(FW-2021-0005)의 승인을 받았습니다. 모든 실험 절차는 국립 보건원에서 발행 한 실험실 동물의 관리 및 사용 가이드에 따라 수행되었습니다.
참고 : 수컷 Sprague-Dawley 쥐 (체중 : 500-600g, 연령 : 12-14 주)는 음식과 물에 자유롭게 접근 할 수있는 표준 실험실 조건에서 보관되었습니다. 래트를 무작위로 2개의 그룹 (n=6, 각 그룹): DHCA 그룹 및 정상 온도 CPB 그룹 (NtCPB 그룹)으로 할당하였다.
1. 준비 작업
- 실험 전에 수술 도구 (집게, 가위, 마이크로 집게, 전기 응고기, 면도기 등)를 소독하십시오 (그림 1).
- 2-0 실크, 16G 캐뉼라(기관 내 카테터), 22G 캐뉼라, 수제 16G 캐뉼라(다중 오리피스 정맥 카테터), 주사 주사기, 거즈 및 테이프를 포함한 소모품의 가용성을 확인하십시오.
알림: 수제 16G 캐뉼러의 경우 메스를 사용하여 캐뉼라 끝에서 직경 2mm의 구멍 2 개 또는 3 개를 자르면 정맥 배수를 더 매....
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결과
대조군으로서, 순환기 정지가 없는 정상 온도 CPB(NtCPB) 래트는 전체 시술 동안 안정적인 평균 동맥 혈압(MAP) 및 체온을 보인 반면, DHCA 래트의 MAP는 심정지 동안 감소하였다(p < 0.01, 도 3A). DHCA 랫트의 온도는 냉각 단계 동안 빠르게 떨어졌고 재가온 단계 동안 점차적으로 회복되었습니다. 쥐를 DHCA 회로에서 떼어냈을 때, DHCA 쥐의 온도는 정상으로 돌아왔다(도 3B).
쥐에 대한 DHCA 과정의 효과를 혈액 가스 분석에 의해 조사하였다. 프라이밍 용액과 전혈 접촉 후 헤모글로빈 (Hb) 농도는 두 그룹 모두에서 6g / dL보다 높았습니다 (그림 4A). 쥐를 DHCA 회로에서 떼어 놓을 때 CPB 회로에 남아있는 혈액을 쥐에게 주입했기 때문에 농도가 9g /.......
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토론
캐뉼러는 쥐에서 DHCA를 확립하는 가장 기본적인 절차입니다. 캐뉼레이션 전에 동맥을 2 % 리도카인 0.5mL로 담그면 캐뉼러가 더 쉬워집니다. 캐뉼레이션 후, 외부 경정맥을 통해 500 IU / kg 헤파린으로 헤파린 화가 미세 혈전 형성을 피하기 위해 필요합니다17. 우리는이 용량의 헤파린이 활성화 된 응고 시간 (ACT) >480 초의 목표를 달성 할 수 있음을 반복적으로 발견했습니다. 재가온 기간이 가장 어려운 부분입니다. 우리 실험에서 온도가 60 ° C에서 18 ° C로 상승하는 데 34 분 이상이 걸렸지 만 재가온 기간은 다른 실험30에서 40 분 또는 18,19 분 안에 완료 될 수있었습니다. Linardi 등은 더 높은 재가온 속도(45분)가 염증 반응을 증가시키고 DHCA20 후 뇌부종에 영향을 미칠 수 .......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없습니다.
감사의 글
저자는 실험 중에 비디오 데이터를 수집하는 데 도움을 준 Liang Zhang에게 감사를 표합니다. 이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (보조금 번호 : 82070479)과 중앙 대학 기초 연구 기금 (보조금 번호 : 3332022128)의 지원을 받았습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 열교환기 | Xi' Xijing Medical Appliance Co., Ltd | Animal-M | |
| 멤브레인 산소 공급기 | Dongguan Kewei Medical Instrument Co., Ltd. | 마이크로 M | |
| 모니터 | Chengdu Techman Co., Ltd | BL-420s | |
| 롤러 펌프 | Changzhou Prefluid Technology Co., Ltd | BL100 | |
| SD 쥐 | HFK Bioscience Co., Ltd. | / | |
| Sevoflurane | Maruishi 제약 Co., Ltd H20150020 | ||
| 면도기 | Hangzhou Huayuan Pet Products Co., Ltd. | / | |
| 기화기 | SPACECABS | / | |
| 인공호흡기 | Shanghai Alcott Biotech Co., Ltd | ALC-V8S | |
| 물 탱크 | 마케트 중환자 치료 AB | Jostra HCU20-600 |
참고문헌
- Lewis, F. J., Taufic, M. Closure of atrial septal defects with the aid of hypothermia; experimental accomplishments and the report of one successful case. Surgery. 33 (1), 52-59 (1953).
- Miler, R. D., et al. Miller's Anesthesia., eighth edition....
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재인쇄 및 허가
